Unidade estrutural básica: aminoácido

A amostra é aquecida e digerida com ácido sulfúrico concentrado e um catalisador para decompor a proteína, no qual carbono e hidrogênio são oxidados em dióxido de carbono e fuga de água, enquanto o nitrogênio orgânico na amostra é convertido em amônia e combinado com ácido sulfúrico para formar sulfato de amônia. Em seguida, adicione álcali para destilação para evaporar a amônia, absorva-a com ácido bórico e depois titule-a com ácido padrão. O teor de proteína na amostra pode ser calculado com base no consumo de ácido padrão.

Digestão: Após o pré-tratamento da amostra, adicione ácido sulfúrico concentrado, sulfato de potássio (aumenta o ponto de ebulição), sulfato de cobre (catalisador, indicador de ponto final)

Destilação e absorção: Adicione álcali (NaOH, 400g/L), vaporize a amônia e absorva-a com ácido bórico (20g/L)

Titulação: ácido padrão 0,05mol/L ou ácido sulfúrico (a solução muda de azul para avermelhado)

Processamento de dados (proteína bruta)

O resultado é proteína bruta

Adequado para valor F

Excesso de ácido sulfúrico deve ser usado para evitar excesso de amônia

Duas partes de uréia são condensadas em biureto a 180°C e reagem com sulfato de cobre em ambiente alcalino para formar um complexo vermelho-púrpura.

Solução de proteína padrão

Coomassie G-520 liga-se às proteínas para formar um complexo colorido com pico máximo de absorção em 595nm.

Solução padrão: solução padrão de albumina de soro bovino

Os aminoácidos contêm -COOH ácido e -NH2 básico, que interagem para tornar o aminoácido um sal interno neutro. Quando o formaldeído é adicionado, o -NH2 se combina com o formaldeído e sua alcalinidade desaparece, fazendo com que o grupo -COOH apresente acidez. usado Titulação de soluções padrão.

De acordo com o efeito anfotérico dos aminoácidos, o formaldeído é adicionado para fixar a alcalinidade do grupo amino e fazer com que o grupo carboxila apresente acidez. Insira o eletrodo de vidro e o eletrodo calomelano do acidômetro no líquido a ser medido ao mesmo tempo para formar. uma bateria. Use solução padrão de NaOH para titular de acordo com as instruções do acidômetro.

Ninidrina → Hidrato de ninidrina → Hidrato de ninidrina → Hidrato de ninidrina → Composto azul-roxo