Wondershare EdrawMind
Mindmap-Galerie Klinische Immunologie
- 5
Klinische Immunologie
Zu den Wissenspunkten für die mittlere Berufsprüfung in der medizinischen Diagnostik zählen unter anderem monoklonale Antikörper, Agglutinationsreaktionen, Autoimmunerkrankungen, immunproliferative Erkrankungen, Präzipitationsreaktionen etc.
Bearbeitet um 2024-01-14 00:56:14
- Hundert Jahre Einsamkeit Charakter-Beziehungsdiagramm
Einhundert Jahre Einsamkeit ist das Meisterwerk von Gabriel Garcia Marquez. Die Lektüre dieses Buches beginnt mit der Klärung der Beziehungen zwischen den Figuren. Im Mittelpunkt steht die Familie Buendía, deren Wohlstand und Niedergang, interne Beziehungen und politische Kämpfe, Selbstvermischung und Wiedergeburt im Laufe von hundert Jahren erzählt werden.
- Hundert Jahre Einsamkeit Charakter-Beziehungsdiagramm
Einhundert Jahre Einsamkeit ist das Meisterwerk von Gabriel Garcia Marquez. Die Lektüre dieses Buches beginnt mit der Klärung der Beziehungen zwischen den Figuren. Im Mittelpunkt steht die Familie Buendía, deren Wohlstand und Niedergang, interne Beziehungen und politische Kämpfe, Selbstvermischung und Wiedergeburt im Laufe von hundert Jahren erzählt werden.
- Projektmanagement-Prozess-Vorlage
Projektmanagement ist der Prozess der Anwendung von Fachwissen, Fähigkeiten, Werkzeugen und Methoden auf die Projektaktivitäten, so dass das Projekt die festgelegten Anforderungen und Erwartungen im Rahmen der begrenzten Ressourcen erreichen oder übertreffen kann. Dieses Diagramm bietet einen umfassenden Überblick über die 8 Komponenten des Projektmanagementprozesses und kann als generische Vorlage verwendet werden.
Klinische Immunologie
- Hundert Jahre Einsamkeit Charakter-Beziehungsdiagramm
Einhundert Jahre Einsamkeit ist das Meisterwerk von Gabriel Garcia Marquez. Die Lektüre dieses Buches beginnt mit der Klärung der Beziehungen zwischen den Figuren. Im Mittelpunkt steht die Familie Buendía, deren Wohlstand und Niedergang, interne Beziehungen und politische Kämpfe, Selbstvermischung und Wiedergeburt im Laufe von hundert Jahren erzählt werden.
- Hundert Jahre Einsamkeit Charakter-Beziehungsdiagramm
Einhundert Jahre Einsamkeit ist das Meisterwerk von Gabriel Garcia Marquez. Die Lektüre dieses Buches beginnt mit der Klärung der Beziehungen zwischen den Figuren. Im Mittelpunkt steht die Familie Buendía, deren Wohlstand und Niedergang, interne Beziehungen und politische Kämpfe, Selbstvermischung und Wiedergeburt im Laufe von hundert Jahren erzählt werden.
- Projektmanagement-Prozess-Vorlage
Projektmanagement ist der Prozess der Anwendung von Fachwissen, Fähigkeiten, Werkzeugen und Methoden auf die Projektaktivitäten, so dass das Projekt die festgelegten Anforderungen und Erwartungen im Rahmen der begrenzten Ressourcen erreichen oder übertreffen kann. Dieses Diagramm bietet einen umfassenden Überblick über die 8 Komponenten des Projektmanagementprozesses und kann als generische Vorlage verwendet werden.
- Für Sie empfohlen
- Gliederung
Mittlerer Softwaretest „System Integration Project Management Engineer“ – Kapitel 6 Gesamtprojektmanagement (2)
- 6
Software-Prüfung Mittelstufe „System Integration Project Management Engineer“ – Kapitel 7 Projektumfangsmanagement (2)
- 7
„System Integration Project Management Engineer“ Kapitel 8 Projektfortschrittsmanagement (1)
- 5
Klinische Immunologie
Einführung
Einführung
Immunfunktion
Verteidigung
Beseitigen Sie pathogene Mikroorganismen
Erweitern
Überempfindlichkeitsreaktion
schwächen
Immunschwächekrankheit
ausländisch
selbststabilisierend
Entfernen Sie beschädigte oder alternde Zellen
Erweitern
Autoimmunerkrankung
Kann nicht alleine verwendet werden
Monitor
Eliminieren Sie mutierte oder aberrante bösartige Zellen
schwächen
bösartiger Tumor
Anti-Tumor
Zelle
Zellen, die von lymphoiden Vorläuferzellen abgeleitet sind
NK-Zellen
Zellen, die bei akuten Entzündungen eine Schlüsselrolle spielen
Neutrophile
Zellen, die akute allergische Reaktionen hervorrufen können
Basophile
Zellen mit der Funktion, gemeinsam Immunkomplexe aus dem Blutkreislauf zu entfernen
rote Blutkörperchen
Immunreaktion
Eine Reihe von Reaktionen, die auftreten, wenn sie durch Antigene stimuliert werden
Der Zweck der Ausscheidung oder des Abbaus des Antigens
Besonderheit
Identifizieren Sie sich selbst und Nicht-Selbst
Spezifität
Erinnerung
Vielfalt, Toleranz, Selbstregulierung
Einstufung
angeborene Immunität
Auch bekannt als angeborene Immunität, unspezifische Immunität
erste Verteidigungslinie
Gewebebarriere
Haut und Schleimhäute
Merkmale
Anfangszeit
schnell
angeboren
unspezifisch
adaptive Immunität
Auch erworbene Immunität, spezifische Immunität genannt
Verfahren
identifizieren
Antigenpräsentierende Zellen (APC)
Erkennen, aufnehmen, abbauen
identifizieren
aufnehmen
In den Magen schlucken
Degradierung
in antigene Peptide zerlegt
Einreichen
nach der Zersetzung freigesetzt
Präsentieren Sie Antigeninformationen
Um T-Helferzellen und verwandte Lymphozyten zu unterstützen
Aktivierung
T- und B-Zellen
Der Prozess der Aktivierung, Proliferation und Differenzierung nach dem Empfang von Antigen-Stimulationssignalen
direkte Stimulation
APC-Stimulation nach der Präsentation
B-Zellen
Plasma Zelle
Humorale Immunität
Vollständige humorale Immunität mit Hilfe von Phagozyten
T-Zellen
Effektorzellen (Killer-T-Zellen)
zelluläre Immunität
Wirkungsstufe
Plasma Zelle
Antikörper absondern
Thymusabhängige Zellen
Bei der Aktivierung von B-Zellen
Brauche Hilfe von T-Helferzellen
T-Zellen
Helfer-T-Zellen (Th-Zellen)
sezernieren Zytokine
Killer-T-Zellen (CTL)
Zytotoxische Effekte ausführen
Zielzellen
Tumorzellen
von Bakterien infizierte Zellen
transplantiertes Organ
Gedächtniszellen
Nach der Proliferation und Differenzierung eine kleine Anzahl von T-Zellen und B-Zellen
Führt keine direkten Effektorfunktionen aus
Einwirken auf
Wieder eine Immunantwort
Keine Aktivierungsphase erforderlich
Antikörper direkt produzieren
primäre Immunantwort
Merkmale der Antikörperproduktion
Antikörper mit geringer Affinität
Künstliche aktive Immunität und künstliche passive Immunität
künstliche aktive Immunität
Impfung mit Impfstoff (Antigen)
künstliche passive Immunität
Immunserum (Antikörper), Lymphokin
wie Tetanus
Keine Notwendigkeit, zu stimulieren
Sofortige Immunität
Immungewebe und Organe
System
Immunorgan
Immunzellen
Immunmoleküle
Immunorgan
zentrales Immunorgan
Der Ort, an dem Immunzellen produziert, differenziert und gereift werden
Mark
wichtiges blutbildendes Organ
Der Geburtsort der Blutzellen und Lymphozyten (T, B)
B-Zellen
reifer Ort
Auch Körperflüssigkeiten stammen aus dem Knochenmark.
Thymusdrüse
T-Zellen
reifer Ort
periphere Immunorgane
Ort der Immunantwort
Orte der Identifikation und Aktivierung
Lymphozytenrezirkulation
Ausgangspunkt, Zwischenstation und Ziel der Heimkehr
periphere Immunorgane
Blut
periphere Immunorgane
Organ
Lymphknoten
Der größte Betrag
Milz
maximal
Schleimhautassoziiertes Lymphgewebe
Mandeln, Dünndarmlymphknoten, Blinddarm
Immunzellen
Einstufung
Lymphozyten
T- und B-Zellen
NK-Zellen
Mononukleär-phagozytische Zellen
Unterstützende Rolle
Spätphase der humoralen Immunität
Frühstadium der zellulären Immunität
Antigen-präsentierende Zellen
Monozyten dringen in Gewebe ein
Es sind Fresszellen
Lymphozyten
T-Zellen
Funktion
zelluläre Immunität
der gesamten peripheren Blutlymphozyten
60 %–80 %
Oberflächenmarkierung
CD28
ausgedrückt
T-Zelloberfläche
Kann mit CD80 auf der Oberfläche von B-Zellen interagieren
Stimulieren Sie die T-Zell-Aktivierung
CD45RO
Gedächtnis-T-Zelloberflächen-spezifisches CD-Antigen
Subpopulation
Th
Funktion
Fördern und verstärken Sie die Immunantwort
Do1
Sekretion von IL-2, IFN-r (Interferon-r), TNF-β (Tumornekrosefaktor β)
Fördern Sie die zelluläre Immunität
Do2
Sekret IL-4, 5, 6, 10
Fördern Sie die humorale Immunität
Reguliert zelluläre Immunantworten negativ
TCF-β
Negative Regulierung der zellulären Immunität
CTL
spezifische Anerkennung
Endogener antigener Peptid-MHC-Klasse-I-Molekülkomplex
Bedingungen, unter denen Tumorzellen abgetötet werden
Drückt MHC-Klasse-I-Faktoren aus
Gezielte Abtötung von Zielzellen
B-Zellen
Funktion
Humorale Immunität
der gesamten peripheren Blutlymphozyten
8 %–15 %
Oberflächenmarkierung
mIgM=u-Ketten-Ig
CD80
ausgedrückt
aktivierte B-Zelloberfläche
Interagiert mit CD28 auf der Oberfläche von T-Zellen
Stimulieren Sie die T-Zell-Aktivierung
CD21
CD-Moleküle auf der Oberfläche reifer B-Zellen
Kann an das Epstein-Barr-Virus binden
B2-Zellen
Wichtige B-Zellen im peripheren Blut
Primärzelle, die humorale Immunität ausübt
B1-Zellen
Da sie an der körpereigenen Immunregulation beteiligt sind, stehen Autoimmunerkrankungen und von B-Zellen abgeleitete Tumoren in engem Zusammenhang
Art des erkannten Antigens
Polysaccharid
Natürliche Killerzellen (NK-Zellen)
Merkmale
unspezifisch
Keine Antigenstimulation erforderlich
Keine Aktivierung erforderlich
Zielzellen direkt abtöten
Nicht durch MHC-Moleküle eingeschränkt
Zytoplasma enthält azurophile Granula
Oberflächenmarkierung
CD56, CD16
CD56 CD3-CD16
Zwei alte Männer ficken direkt ohne Stimulation
Bestimmung aktiver Zielzellen
Aktivität menschlicher NK-Zellen
K562-Zelllinie
Aktivität der NK-Zellen der Maus
YAC-Zelllinie
Antikörperabhängige zellvermittelte Zytotoxizität
Zellvermittelt: NK-Zellen
ADCC
Auch die Tötungsfunktion der NK-Zellen erfordert die Hilfe von Antikörpern
Antikörper benötigt
IgG
Verfahren
IgG bindet an die entsprechende antigene Determinante der Zielzelle
NK-Zellen binden an das Fc-Segment von IgG
Aktivieren Sie NK-Zellen
Setzen Sie Perforin, Granzyme usw. frei, um Zielzellen abzutöten
Apoptose der Zielzelle
Erkennung
Aktivität zur Abtötung von NK-Zellen
Zytotoxizitätstest
Immunhelferzellen
Glossar
Lymphozyten
Vor allem T-Zellen
Die Aktivierung erfordert die Beteiligung von Nicht-Lymphozyten
Einstufung
Mononukleär-phagozytische Zellen
Dendritische Zellen
Mononukleär-phagozytische Zellen
große Fresszellen
Monozyten im Blut
Makrophagen im Gewebe
Die Oberfläche enthält Scavenger-Rezeptoren, TcrR, TLR und Komplementrezeptoren
Kein Antigen-Erkennungsrezeptor
Weil Makrophagen unspezifisch sind
kleine Fresszellen
Neutrophile
Oberflächenmarkierungen
Mononukleär-phagozytische Zellen
CD14
Neutrophile
CD33
Dendritische Zellen
Keine phagozytische Fähigkeit
Verfügt über eine starke Fähigkeit zur Antigenpräsentation
Antigenpräsentierende Zellen (APC)
wichtige Oberflächenmarkierungen
MHC-Klasse-II-Antigen
Nach der Aktivierung der Makrophagen werden hohe Konzentrationen an
Die Expressionsniveaus in ruhenden Makrophagen sind niedrig
Vollzeit
Mononukleär-phagozytische Zellen
Dendritische Zellen
Primär präsentierende Zellen der primären Immunantwort
B-Zellen
Keine Aktivierung erforderlich
Die wichtigsten präsentierenden Zellen sind wiederum die Immunantwort
Teilzeit
Endothelzellen
Epithelzellen
aktivierte T-Zellen
muss aktiviert sein
Isolierung und Konservierung von Immunzellen
Trennung
Isolierung mononukleärer Zellen
Ficoll-Trennflüssigkeit
Methode der Gradientenzentrifugation mit einfacher Dichte
Nach der Zentrifugation gibt es nur eine Dichte, nur eine Schicht (Mittelschicht).
Single-Core gibt es auch hier
Isolieren Sie mononukleäre Zellen
Lymphozyten
Einzelprozessor
geschichtet
Blutplättchen, Plasmaschicht
Mononukleäre Zellschicht (Ficoll-Trennmedium)
Granulozyten, rote Blutkörperchenschicht
Spezifischer Gewichtsbereich
mononukleäre Zellen
1,075-1,090
mehrkernige Granulozyten
Etwa 1.092
Blutplättchen
1.030-1.035
Lymphozytenisolierung
Adhäsionsmethode, Adsorptionssäulenfiltrationsmethode
Prinzip
Mononukleäre Zellen können aktiv an Glas, Kunststoff, Nylonwolle, Baumwollfasern und Dextran-Gel haften
Monozyten aus der Suspension entfernen
Erhalten Sie eine reine Lymphozytenpopulation
Magnetanziehungsmethode
Mononukleus kann Eisenpartikel phagozytieren
Percoll-Trennmethode
kontinuierliche Dichtegradientenzentrifugation
geschichtet
tote Zellen, Blutplättchen, Plasma
Monozyten (obere Schicht)
Lymphozyten (untere Schicht)
Granulozyten, rote Blutkörperchenschicht
Isolierung von T- und B-Zellen
E-Rosetten-Sedimentationsmethode
T-Zellen verfügen über Schaf-Erythrozyten-Rezeptoren (E-Rezeptor/CD2-Rezeptor).
T-Zellen
EA-Rosettensedimentationsmethode
B-Zellen verfügen über IgG-Fc-Rezeptoren
Kann an das Fc-Segment von Immunglobulin-IgG binden
B-Zellen
Isolierung von T-Zell-Untergruppen
Prinzip
Entsprechend den Eigenschaften der entsprechenden Zellen und unterschiedlichen Oberflächenmarkern
Th
CD4
CTL
CD8
Bindungs- und Trennmethode mit Affinitätsplatten
Methode zur Trennung magnetischer Mikrokügelchen
Fluoreszenzaktivierte Zellseparator-Trennmethode
speichern
Langzeitkonservierung
Kryotechnik mit flüssigem Stickstoff
-196
Schutzmittel
Dimethylsulfoxid
Lebensfähigkeitstest isolierter Zellen
Schauen Sie, ob es eine Funktion hat
Überprüfen Sie vor dem Speichern die Funktionen
Trypanblau-Färbung
Einschließlich der Überprüfung, ob das Sperma lebt oder tot ist
Trypanblau
Intakte Zellmembran, die für lebende Zellen undurchlässig ist
Lebende Zellen verfärben sich nicht
Färbung abgestorbener Zellen
Blau
Erkennung von Oberflächenmarkierungen
Antikörper-sensibilisierte Zellrosettenmethode
E-Girlande
EA-Girlande
Immunzytochemie
Enzymmarkierte Antikörper binden an spezifische Rezeptoren auf Zellen
Prozentsatz der gefärbten Zellen, die unter einem gewöhnlichen Mikroskop beobachtet werden
Immunfluoreszenz
Fluorescein-markierte Antikörper binden an spezifische Rezeptoren auf Zellen
Fluoreszenzmikroskopische Beobachtung des Prozentsatzes fluoreszierender Zellen
Durchflusszytometrie
Funktionstest von Lymphozyten
T-Zell-Funktionstest
T-Lymphozyten-Proliferationstest/Lymphoblastentransformation (In-vitro-Test) (PHA-Lymphozytentransformationstest)
Prinzip
Nachdem T-Zellen in vitro durch Mitogene oder Antigene stimuliert wurden
Erhöhte intrazelluläre Protein- und Nukleinsäuresynthese
Erhöhte Größe, erhöhte DNA-Synthese im Zellkern und RNA im Zytoplasma
Erhöhtes Zytoplasma
Es tritt Kavitation auf
Loses Kernchromatin
Nukleolen sind offensichtlich
kehren zum Lymphoblasten zurück
Zellbildung der Mutter
Zurück zur Mutter verwandelt, um sich zu vermehren
Reizstoffe
unspezifisches Mitogen
Phytohämagglutinin (PHA)
Concanavalin A (ConA)
Phytolacca americana (PWM)
spezifisches Antigen
Gereinigtes Proteinderivat (PPD) von Mycobacterium tuberculosis
Tetanustoxoid
Stimulieren Sie die T-Zell-Proliferation
Tumorantigen
allogene Zellen
Phytohämagglutinin (PHA)
Stimulieren Sie die B-Zell-Proliferation
Epstein Barr Virus
Stimuliert gleichzeitig die Proliferation von T- und B-Zellen
Gereinigtes Proteinderivat (PPD) von Mycobacterium tuberculosis
Erkennungsmethode
Morphologische Untersuchung
3H-TdR-Einbaumethode (Radionuklidmethode)
Aktivierte Lymphozyten nehmen Vorläufer für die DNA-Synthese auf
3H-markiertes Thymidin
Je nach Mischmenge
T-Zell-vermittelter Zytotoxizitätstest
Prinzip
Wenn die sensibilisierten T-Zellen erneut auf das entsprechende Zielzellantigen treffen
Nachgewiesene Zerstörung und Lyse von Zielzellen
Klinische Anwendung
Bewerten Sie das Immunniveau von Körperzellen
Insbesondere wird die Fähigkeit von CTL bei Tumorpatienten gemessen, Tumorzellen abzutöten
Bestimmen Sie die Prognose und beobachten Sie die heilende Wirkung
In-vivo-Tests
Prinzip
Nachdem der normale Körper eine zelluläre Immunität gegen ein bestimmtes Antigen aufgebaut hat,
Führen Sie einen Hauttest mit demselben Antigen durch
positive verzögerte Überempfindlichkeitsreaktion
Methode
Tuberkulintest (OT/PPD)
Subkutane Impfung
2-3 Tage später
Rötung, Schwellung, Blasen
>20mm
Nachweis einer Tuberkulose-Infektion
Wenn bei dem Patienten Tuberkulose diagnostiziert wird
PPD negativ
Zeigt eine verminderte zelluläre Immunfunktion
Klinische Anwendung
Ob es über eine spezifische zelluläre Immunantwortfähigkeit auf ein bestimmtes Antigen verfügt
Zellulärer Immunstatus
Diagnostik bestimmter pathogener mikrobieller Infektionen (Tuberkulose, Lepra)
Diagnose zellulärer Immundefizienzerkrankungen
Bestimmen Sie die Krankheitsprognose
Funktionstest von B-Zellen
B-Zell-Proliferationstest
Prinzip
Identisch mit dem T-Zell-Proliferationstest
Reizstoffe
Maus-B-Zellen
Bakterielles Lipopolysaccharid (LPS)
menschliche B-Zellen
Staphylococcus aureus und Anti-IgM-Antikörper mit SPA
SPA
Staphylokokken-Protein A
Hämolytischer Plaque-Test
Die Fähigkeit von B-Zellen, Antikörper zu produzieren
Prinzip
Verwendung roter Blutkörperchen vom Schaf (SRBC)
Immunisierte Mäuse
Entfernen Sie die Milz der Maus
Herstellung einer Splenozytensuspension
Im Inneren befinden sich Plasmazellen
Vorbereitung von Agarplatten mit SRBC
Fügen Sie der Platte Milzzellsuspension hinzu
Werden Anti-SRBC-Antikörper gebildet, kommt es zu einer Sensibilisierung der Umgebung
Unter Beteiligung von Komplement
SRBC auflösen
Mit bloßem Auge sichtbare Bildung hämolytischer Plaques
Verfahren
klinische Bedeutung
In der Mitte jedes Plaques befindet sich eine Antikörper-bildende Zelle
Anzahl der Plaketten
Anzahl der Antikörper-bildenden Zellen
Plaquegröße
Wie viele Antikörper produziert jede Zelle?
Umkehrhämolytischer Plaquetest
Bestimmen Sie die Anzahl der Antikörper produzierenden Zellen
Enzyme-linked Immunospot-Test (ELISPOT)
TOPF
Bedeutung der Flecken
Anwendung
In-vitro-Tests
spezifische Antikörper-B-Zellen
Menge der Antikörpersekretion
Zytokin-sezernierende T-Zellen
Kann Antikörper-sezernierende Zellen erkennen
Es kann auch die Menge der abgesonderten Antikörper ermitteln
Phagozytischer Zellfunktionstest
Neutrophilen-Funktionstest
Chemotaxis-Funktionstest
Methode der Filtermembranpermeabilität (Boyden-Kammer-Methode)
Hautfenstertest
Intrazelluläre bakterizide Fähigkeit
Nitroblau-Tetrazolium (NBT)-Reduktionstest
Positive Quote normaler Menschen
5 %–10 %
Die Positivitätsrate stieg deutlich an
systemische bakterielle Infektion
Phagozytose und Stoffwechselaktivität
Chemilumineszenz-Methode
Stoffe, die die Lichtausbeute steigern können
Luminol
Makrophagen-Funktionstest
Kohlenstoffpartikel-Clearance-Test
Phagozyten können Kohlenstoffpartikel verschlucken
Immunmoleküle
Immunaktive Zellen oder verwandte Zellen
Wird abgesondert, um an der Immunantwort oder Immunregulation des Körpers teilzunehmen
Protein- und Polypeptidsubstanzen
Einstufung
Immunoglobulin
Antikörper
ergänzen
Zytokine
Zelladhäsionsmoleküle
Antigen zur Differenzierung menschlicher Leukozyten
Immunoglobulin
Immunglobulin (Ig)
Ein Globulin, das eine ähnliche chemische Struktur wie ein Antikörpermolekül hat
Y-Form
Antikörper (Ab)
Globulin, das von B-Zellen produziert wird, die sich nach einer Antigenstimulation vermehren und zu Plasmazellen differenzieren.
Ausübung der humoralen Immunfunktion
Antikörper mit minimalen Nebenwirkungen
kleine Molekül-Antikörper
Der wirksamste Träger für therapeutische Medikamente
Monoklonale Antikörper
Alle Antikörper sind Immunglobuline
Nicht alle Immunglobuline sind Antikörper
wie zum Beispiel das multiple Myelom
Einstufung
Sekretiert (sIg)
Hauptsächlich in Körperflüssigkeiten enthalten
Antikörper haben verschiedene Funktionen
Modell (mIg)
Wird auf der Oberfläche von B-Zellen als Antigenrezeptor exprimiert
Membranoberflächen-Immunglobulin
chemische Struktur
Ig-Moleküle bestehen aus 4 Peptidketten
2 identische schwere Ketten (H)
γ-, α-, μ-, δ-, ε-Kette
Unterschiedliche schwere Ketten, unterschiedliche Arten von Immunglobulinen
2 identische leichte Ketten (L)
K-, L-Kette
K:L etwa 2:1
Zwei schwere und zwei leichte, obere Änderung und untere Konstante, schwere und konstante Klassifizierung, leichte und konstante Klassifizierung, leichtes und schweres variables Knotenantigen
Klassifizierung von Immunglobulinen
konstante Region der schweren Kette
Immunglobulin-Typisierung
konstante Region der leichten Kette
Antigenität der konstanten Region der schweren Kette (CH)
IgG (γ)>IgA (α)>IgM (μ)>IgD (δ)>IgE (ε)
FC-Segment
Konstante Region (VH-Region)
Epitope des Immunglobulin-Isotyps
Konstanter Bereich (CH, CL)
Immunglobulin-Antigen-Bindungsstelle
Variabilität der schweren Kette (H) und leichten Kette (L) (V-Region)
Hypervariable Region (HVR)
Innerhalb der variablen Region des Antikörpers (V-Region)
Stelle, die an ein antigenes Epitop bindet
Auch bekannt als komplementaritätsbestimmende Region (CDR)
Es gibt 6 Stellen, die tatsächlich an das Antigen binden.
Einstufung
IgG
Hauptkraft
Der höchste Inhalt
Der einzige Antikörper, der die Plazenta passieren kann
Autoantikörper, hypersensitive Typ-II-Antikörper, Sekundärantikörper (Sekundärantikörper) in der immunologischen Untersuchung
IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
Der höchste Gehalt an IgG1
IgG4 kann das Komplement nicht aktivieren
Konvektive Immunelektrophorese
IgG1 und IgG2
durch Elektroosmose
Gehen Sie zur Kathode
IgG3 und IgG4
Aufgrund der aktuellen
Bewegen Sie sich in Richtung Positivität
Lange Inkubationszeit
Hohe Affinität
primäre Antikörper der sekundären Immunantwort
Wirkung
IgM
Erster März
Pentamer
Großes Molekulargewicht
Makroglobulin
Die frühesten Antikörper wurden während der Ontogenese synthetisiert und abgesondert
Erhöhtes IgM im Nabelschnurblut von Neugeborenen
intrauterine Infektion
Antikörper werden erstmals nach Antigenstimulation produziert
Während einer Infektion steigen die Serum-IgM-Spiegel an
kürzliche Infektion
Kann in salzhaltigem Medium zur Aggregation roter Blutkörperchen führen
Identifizierung der Blutgruppe (Objektträgermethode)
Geringe Affinität
Die stärkste Fähigkeit, Komplement zu aktivieren
natürliche Lektine
kaltes Agglutinin
Kälteagglutinin-Syndrom
Autoimmunerkrankungen, die durch IgM-Immunglobuline verursacht werden
IgA
Grenzsoldat
Sekretiert (sIgA)
Dimerstruktur
Enthält eine J-Kette und ein Sekretionspflaster
Beteiligen Sie sich an der lokalen Schleimhautimmunität
primärer Antikörper
Vorhandensein von Magen-Darm-Trakt, Bronchialsekret, Kolostrum, Speichel, Tränen
sIgA in der Muttermilch verbessert die lokale Immunbarriere bei Säuglingen 4–6 Monate nach der Geburt
lokale Antikörper
IgE
am wenigsten zufrieden
Zytotrope Antikörper
Affinität zwischen Mastzellen und Basophilen
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
Zunahme
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
Asthma bronchiale, allergische Rhinitis
nichtallergische Erkrankungen
IgE-Myelom
parasitäre Infektion
Herstellung von Immunglobulinfragmenten
enzymatische Methode
Papain-Empfindlichkeit
IgG wird in 2 Fab-Fragmente und ein Fc-Fragment gespalten
Enzyme, die zur Herstellung von Fc-Fragmenten von Immunglobulinen verwendet werden
Pepsin
IgG wird in F(ab)2 und mehrere kleine Fragmente gespalten
Unterthema
Immunglobulintest in Körperflüssigkeit
Bestimmung von IgG, IgA, IgM
Inhalt g/L-Niveau
Einweg-zirkuläre Immundiffusionsmethode
Immunturbidimetrie
Am Meisten verwendet
Enzyme-linked Immunosorbent Assay
Bestimmung von IgG-Subklassen
niedrigste Empfindlichkeit
ergänzen
Überblick
Komplement (C)
Eine Gruppe von Glykoproteinen im Serum, die eine enzymähnliche Aktivität aufweisen und hitzelabil sind (hauptsächlich β-Globulin).
aber kein Enzym
Von Leberzellen und Makrophagen synthetisiert
Antigene stimulieren den Körper
wird nicht produzieren
Komplementsystem
Komposition
inhärente Inhaltsstoffe
C1, C2, C3, C4, C5
ergänzen regulatorisches Protein
Zusammensetzung des Komplementrezeptors
C3
Der höchste Inhalt
C2
Der niedrigste Inhalt
D-Faktor (kein C2)
Der niedrigste Inhalt
Mindestmolekulargewicht
Cq1
Das größte Molekulargewicht
Ein Fragment von C1
chemische Eigenschaften
Gefriertrocknen
halte es aktiv
Komplementinaktivierung
56℃
30 Minuten
Starke Säuren und Basen
Starker Schock
bestimmte Zusatzstoffe
Äther
Ethanol
Protease
UV-Bestrahlung
Aktivierungsweg
C9 ist N
Identifikationsphase
Erfordert die Beteiligung von Immunglobulinen
IgM oder IgG binden an Antigen
Aktivieren Sie C1q und C1s
Aktivierungsphase
C1s spaltet C4 und C2
Bildung der C3-Konvertase (C4b2b).
C3-Konvertase spaltet C3
Es bildet sich die C5-Konvertase (C4bC2bC3b).
MAC-Filmangriffsphase
C5-Konvertase spaltet C5
Bildung des C5b67-Komplexes
C5b678 eingebettet in die Zellmembran
N C9 eingeben
bilden Transmembranporen
Wasser von außen kann in die Zellen eindringen
was zur Zelllyse führt
Das Komplement wird während der Aktivierung in mehrere Fragmente gespalten
kleinere Fragmente
A
größere Fragmente
B
C2-Ausnahme
größeres Fragment
C2a
kleineres Fragment
C2b
Das einzige kleine Fragment auf dem klassischen Weg
Wirkung
Helferantikörper üben eine zytolytische Wirkung aus
Beteiligen Sie sich an der Abwehrwirkung und Selbststabilität des Körpers
Immunpathologische Reaktionen hervorrufen
C3a und C5a
Wirkt auf die Zellmembran von Mastzellkernen und Basophilen
Entkernt Zellen, um Histamin und Leukotriene freizusetzen
Änderungen der Krankenakte bei anaphylaktoiden Reaktionen
Anaphylatoxine
Raji-Zellen
Auf der Oberfläche gibt es eine große Anzahl von C3b-, C1q- und C3d-Rezeptoren
Kein Wunder
Nutzt diese Rezeptoren, um an zirkulierende Immunkomplexe zu binden, die Komplement binden
Fügen Sie dann mit Radionuklid markiertes Anti-Human-IgG hinzu
Nachweisbare zirkulierende Immunkomplexe
Gesamtkomplementaktivitätstest
Komplementärer 50 %-Hämolysetest (CH50-Bestimmung)
Prinzip
SRBC-Antikörper (rote Schafsblutkörperchen) binden an SRBC-Oberflächenantigene
Komplement aktivieren (klassischer Weg)
Mindestserumvolumen für 50 % Hämolyse
Spiegelt die Gesamtkomplementaktivität wider
Als 100 % Hämolyse
Empfindlicher und leichter zu beobachten
Abhängigkeit der hämolytischen Reaktion von der Komplementdosis
Spezielle S-förmige Kurve
Am häufigsten wird Hämolysin verwendet
2 Einheiten (2U)
Einheit
U/ml
Beeinflussen
Verminderte hämolytische Aktivität
PH
Puffer und Ionenstärke
Höhe erhöhen
Ion
Puffern Sie Kalzium- und Magnesiumionen
Überschuss
Hämolytische Aktivität hemmen
klinische Bedeutung
Höhe erhöhen
bösartiger Tumor
C3 und C4 stiegen ebenfalls an
Komplementfixierungstest
Prinzip
Antigen-Antikörper-Komplexe binden Komplement
Freies Antigen oder Antikörper kann kein Komplement binden
Verdünnungspuffer
Eine angemessene Menge Natriumchlorid
Geringe Mengen an Calcium- und Magnesiumionen
Einen bestimmten pH-Wert haben
Erkennung
Antigen oder Antikörper
Anzeigesystem
Hämolysin
Antikörper, die rote Blutkörperchen lysieren
Rote Blutkörperchen von Schafen
Antigen-Antikörper-System
Wirkung
Gibt an, ob Komplement gebunden ist
Ermitteln Sie das Vorhandensein des zu testenden Antigens oder Antikörpers
Einstufung
Reaktionssystem
Komplementsystem
ist ein Reagenz
Allgemeiner Gebrauch
Frisches Meerschweinchenserum
Wird nicht getestet
Anzeigesystem
Hämolysin
Rote Blutkörperchen von Schafen
Verfahren
Reagenz 1 hinzufügen
Bekanntes Antigen/bekannter Antikörper
Serum hinzufügen (Antikörper betrachten/Antigene betrachten)
Reagenz 2 hinzufügen
Ergänzung hinzufügen
Reagenz 3 hinzufügen
Treten Sie dem Lehrsystem bei
Wenn im Serum Antikörper vorhanden sind, hat sich das Komplement bereits mit dem ersten Schritt verbunden und Reagenz 3 kann sich nicht mehr verbinden.
Nicht hämolytisch
Nicht hämolytisch
Positiv
Vorhandensein des zu testenden Antigens/Antikörpers
Dosiereinheit
Versorgungseinheit
minimale vollständige Hämolyse
Dosierung
Antigen, Antikörper, Hämolysin, rote Blutkörperchen von Schafen
Jeweils 0,1 ml
ergänzen
0,2 ml
Insgesamt 0,6 ml
Formale Testkomplementdosierung
Formel
minimale Menge an vollständiger Hämolyse
1:60 Verdünnung
Y
Y*2:60=0,2:X
X: Verdünnungsfaktor
2: 2 Komplementeinheiten
0,2: Komplementärdosierung
klinische Bedeutung
reduzieren
Erhöhter Verbrauch
RA (rheumatoide), SLE (systemischer Lupus erythematodes), aktive Autoimmunhämolyse (Typ-II-Überempfindlichkeit), Transplantatabstoßung
Bakterielle Infektionen
Besonders gramnegative Zellinfektionen
empfindlichste Mikroorganismen
Verminderte Serumkomplementspiegel resultieren häufig aus der Aktivierung des alternativen Komplementwegs
Lipopolysaccharid (LPS)-Stimulation
Unzureichende Synthese
schwere Lebererkrankung
Unterernährung
massiver Verlust
Ausgedehnte Verbrennungen
Starkes Bluten
nephrotisches Syndrom
klinische Bedeutung
Genetische Erkrankungen des Komplementmangels
Defekt des C1-Hemmmoleküls
Es ist kein Mangel an C1
hereditäres Angioödem
C3-Defekt
schwere Infektion
Zytokine
Aktivierte Immunzellen und bestimmte Stromazellen
abgesonderte Wirkstoffe
chemischer Natur
Protein oder niedermolekulares Peptid
Hauptsächlich Glykoproteine
Hauptsächlich Proteine mit niedrigem Molekulargewicht
Meistens liegen sie in Einzelform vor
Nicht durch MHC eingeschränkt
biologische Funktionen
Vermitteln und regulieren Sie Immunreaktionen und Entzündungsreaktionen
Reguliert eine Vielzahl zellphysiologischer Funktionen
B-Zellen allein können nicht zur Produktion von Antikörpern angeregt werden
Aktivierung und Proliferation von B-Zellen
Erfordert duale Signale, duale Erkennung und Zytokine
Erkennung
am häufigsten verwendete Methode
Immunologischer Test
ELISA
Bevorzugte Methode
Nur Messung der Immunreaktivität
Nicht auf Immunaktivität getestet
Durchflusszytometrie
Enzyme-linked Immunospot-Test (ELISAPOT)
Methoden, die Vorläufermoleküle von Zytokinen nicht messen können
Test der biologischen Aktivität
enthalten
Interleukin (IL)
IL-2
T-Zell-Produktion
Fördern und pflegen Sie eine langfristige T-Zellkultur
T-Zell-Wachstumsfaktor
Abstoßung einer Transplantation
Nach der Aktivierung wird IL-2 ausgeschüttet, um Effektor-T-Zellen (CTL) zum Eindringen in das Transplantat und B-Zellen zur Produktion von Antikörpern zu bewegen.
Bei verzögerter Überempfindlichkeit (DTH)
verursacht nicht nur eine Antigen-aktivierte T-Zell-Proliferation
Es kann auch dazu führen, dass sich „umstehende“ T-Zellen vermehren
Kann NK-Zellen aktivieren
Erkennung
Assay zur geförderten Zellproliferation
reduzieren
chronische Hepatitis B
chronische Hepatitis B
Mit LPS stimulierte mononukleäre Zellen
Die Fähigkeit, IL-1 und IL-2 abzusondern, ist deutlich geringer als bei normalen Menschen.
IL-4
Produktion von Th2-Zellen
Fördern Sie den Wechsel der Immunglobulinklasse
Mononukleäre Zellen des peripheren Blutes von Tuberkulosepatienten, stimuliert mit mykobakteriellen Antigenen
offensichtlich zunehmen
Starten Sie ruhende B-Zellen, um in die DNA-Synthesephase einzutreten
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
Stimuliert die Proliferation und Differenzierung spezifischer B-Zellen zu Plasmazellen
Produzieren Sie charakteristisches IgE
Zunahme
aktive Lungentuberkulose
IL-3, IL-5
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
Nach Bindung an eosinophile Oberflächenrezeptoren
stimulieren seine Aktivierung
Gibt eosinophile Granula und bioaktive Substanzen frei
IL-5
Fördern Sie die Proliferation, Differenzierung und Chemotaxis von Eosinophilen
IL-6
Multiples Myelom, Myelompatienten
Wichtige Faktoren, die die Anzahl der Osteoklasten erhöhen
Schlüsselfaktoren, die die Proliferation und Differenzierung von Plasmazellen fördern
Am häufigsten verwendet, um die Proliferation von B-Zell-Hybridomzellen zu stimulieren
Nach einer Organtransplantation kommt es zu einer chronischen Abstoßung
Zytokinspiegel bei Patienten
deutlich erhöht
IL-6
IL-6, IL-1
Stimuliert Hepatozyten zur Sekretion von Akute-Phase-Proteinen
IL-8
Chemotaktische Wirkung auf Neutrophile
IL-10
negativer Immunregulator
Kann die Synthese von IL-2 und IL-1 hemmen
IL-18
Hat chemotaktische Aktivität
Methode
Chemotaktischer Aktivitätstest
Interferon (IFN)
Typ-I-Interferon
Alpha-Interferon
menschliche Leukozytenproduktion
Beta-Interferon
Produziert von menschlichen Fibroblasten
Starke antivirale Wirkung
Typ-II-Interferon
Rinterferon
T-Zell-Produktion
Produktion von Th1-Zellen
Wirkung
Immunmodulatorische Wirkung
am stärksten
antivirale Wirkung
Hemmen Sie die Umwandlung von Th0-Zellen in Th2-Zellen
Da dies von Th1 produziert wird, ist es natürlich an meine Mutter gerichtet
Das heißt, die Aktivierung und Proliferation von Th2-Zellen wird gehemmt
Kann NK-Zellen aktivieren
IFN-α und IFN-r wirken auf unterschiedliche Rezeptoren
Wird nach Stimulation durch Antigen produziert
Erkennungsmethode
Antiviraler Aktivitätstest
Wachstumsfaktoren
Transformierender Wachstumsfaktor (TGF)
TCF-β
Negative Regulierung der zellulären Immunität
Chemokin-Familie
Tumornekrosefaktor (TNF)
TNF-α
Kachexie
Wichtige Zytokine, die Kachexie verursachen
regen die Zielzellen zur Produktion an
IL-1, IL-6
Kann NK-Zellen aktivieren
Erkennung
Hat zytotoxische Aktivität
Verfügbare Tests zur zytotoxischen Aktivität
TNF-β
durch T-Zellen
Produktion von Th1-Zellen
Koloniestimulierender Faktor (CSF)
Faktoren, die die Funktion der NK-Zellen aktivieren
IL-2, IFN-r, TNF-α
Zelladhäsionsfaktor (CAM)
Entstanden durch die gegenseitige Bindung und Adhäsion zwischen Zellen oder zwischen Zellen und extrazellulärer Matrix
Kleine Molekülpeptide oder Glykoproteine
Form der Funktionsweise
Bindung von Rezeptorliganden
Wirkung
Beteiligen Sie sich an Immunantwort, Entzündung, Gerinnung, Wundheilung und Tumormetastasierung usw.
Molekulare Basis
Einstufung
Calciumionenabhängige Familie/Mucocadin-Familie
Integrin-Familie
Immunglobulin-Superfamilie
Mucin-ähnliche Familie
Selectin-Familie
Beinhaltet nicht die Familie der Entzündungsfaktoren
Hauptmessmethoden
ELISA-Methode
Merkmale
Leistung
Pleiotropie
Überlappung
Widerstandseffekt
Synergie
Müssen spezifisch an hochaffine Rezeptoren auf Zielzellen binden
biologische Wirkungen auszuüben
das Gleiche wie Insulin
Hat extrem starke biologische Wirkungen
Es werden nur Spuren von Zytokinen benötigt
Kann parakrin, autokrin oder endokrin wirken
das Gleiche wie Hormone
klinische Auswirkungen
Beurteilung des körpereigenen Immunstatus und der zellulären Immunfunktion
Am Meisten verwendet
Assistierte Diagnose spezifischer Krankheiten
Spezifisch
Nur ein Hilfsmittel
Erkennung von Auswirkungen auf die Behandlung von Krankheiten und Anleitung zur Medikamentenverwendung
Krankheitsprävention
Krankheitsbehandlung
Mittlerweile wurden viele Zytokine zu Medikamenten verarbeitet
andere
Über Zytokine, die von T-Zellen produziert werden
Arten von Antikörpern, die B-Zellen beeinflussen können
Antigen-Antikörper-Reaktion
Prinzip
Strukturelle Komplementarität und Affinität antigener Determinanten (Epitope) und hypervariablen Regionen von Antikörpern
Antigenbindungskapazität
nichtkovalente Bindung
Bildet keine kovalenten Bindungen
elektrostatische Anziehung
Van-der-Waals-Kräfte
am schwächsten
Wasserstoffbindungskraft
hydrophobe Kraft
am stärksten
Dies liegt daran, dass die Hydratationsmembran des Antigens und des Antikörpers zur Seite geschoben werden muss, um die Bindungsstelle freizulegen.
Es ist also das stärkste
Affinität
Die Bindungsstärke zwischen einer Antigenbindungsstelle auf einem Antikörpermolekül und einem reagierenden Antigen-Epitop
es hängt davon ab
Grad der Komplementarität der räumlichen Konfiguration
spiegelt
Antigen-Antikörper-Komplementärbeziehung
äußern
Gleichgewichtskonstante K
Je größer der K-Wert, desto stärker ist die Affinität.
Je stärker die Bindung an das Antigen ist
Affinität
Die adaptive Bindungsstärke zwischen einer Antigenbindungsstelle auf einem Antikörpermolekül und der entsprechenden antigenen Determinante
Die inhärente Bindungskraft zwischen Antigen und Antikörper
spiegelt
Die Bindungsstärke zwischen Antigen und Antikörper
Merkmale
Spezifität
Reversibilität
Verhältnismäßigkeit
Bühne
Spezifität
Komplementarität zwischen antigenen Determinanten und hypervariablen Antikörperregionen
Kreuzreaktivität
zwei verschiedene Antigenmoleküle
Antigene Epitope mit teilweise identischer oder ähnlicher Struktur
Kann mit den entsprechenden Antiseren des jeweils anderen kreuzreagieren
Waifei-Reaktion
Mutans-Bakterien und Klebsiella haben das gleiche Antigen-Epitop
Ersatz von Chrysotitis sp. durch Mutans
Typhus (Krittsiose) diagnostizieren
Ich habe draußen Feierabend gemacht und werde sofort zurückkommen
Außen: Epiphyse, Seite: Metamorphose, Klasse: Makula, unmittelbar: Rickettsien
Reversibilität
Unter bestimmten Bedingungen kann es zu einer Dissoziation kommen
Affinitätschromatographie
Eine Änderung des pH-Werts und der Ionenstärke der Lösung fördert die Dissoziation des Antigen-Antikörper-Komplexes
Dadurch wird das Antigen oder der Antikörper gereinigt
Bleibt nach der Dissoziation biologisch aktiv
Verhältnismäßigkeit
Die Menge der gebildeten Konjugate hängt von der Konzentration der Reaktanten ab
Optimales Verhältnis (Äquivalenzpunkt)
Das Konzentrationsverhältnis von Antigen zu Antikörper, das die schnellste sichtbare Reaktion hervorruft
Äquivalenzzone
Der geeignete Bereich für das Verhältnis von Antigen-Antikörper-Molekülen
Die maximale Fällungsreaktion findet auch bei statt
Bandphänomen
Überschüssiges Antigen und Antikörper ohne Niederschlag
vorderer Riemen
Überdosis Antikörper
Rückengurt
Antigenüberschuss
Vorne schlicht und hinten schlicht
Antikörper sind relativ flach
Bühne
Die erste Stufe
Antigen- und Antikörperspezifische Bindung
Schnell, unsichtbar
Sekunden bis Minuten
zweite Etage
Agglutination, Ausfällung, Zelllyse
Langsame Reaktion, sichtbar
Minuten bis Stunden
Beeinflussende Faktoren
Elektrolyt
Lassen Sie das Antigen und den Antikörper einen Teil ihrer Ladung verlieren
anfällig für Agglutination oder Ausfällung
0,85 % Natriumchlorid
beschleunigen die Bildung von Immunkomplexen
von langsam nach schnell
SCN-, CLO4-, NO3-, SO4-, H2PO4-
Am schnellsten ist
CL-
pH-Wert
Antigen-Antikörper-Reaktionen müssen in einer geeigneten pH-Umgebung durchgeführt werden
Optimaler pH-Wert: 6–9
Weil der menschliche pH-Wert 7,35–7,45 beträgt
Temperatur
Temperaturanstieg
Kann molekulare Bewegung beschleunigen
Erhöhte Wahrscheinlichkeit einer Antigen-Antikörper-Kollision
Reaktionsbeschleunigung
Temperatur: 37℃
Herstellung von Immunogenen und Antiseren
Herstellung von Immunogen
Immunogen
Kann den Körper dazu veranlassen, Antikörper oder sensibilisierte Lymphozyten zu produzieren
Stoffe, die spezifische Reaktionen hervorrufen
charakteristisch
Immunogenität
Es kommt zu einer Immunantwort
Die Fähigkeit, die Entwicklung von Antikörpern oder sensibilisierten Lymphozyten zu induzieren
Immunreaktivität (Antigenität)
Merkmale der spezifischen Bindungsfähigkeit
Einstufung
vollständiges Antigen
immunreaktiv
immunogen
Hapten
immunreaktiv
Nicht immunogen
Keine Immunantwort
Produziert keine Antikörper und sensibilisiert keine Lymphozyten
Peptide, Steroidhormone, Nukleoside, bestimmte Medikamente (Penicillin)
Nicht immunogen
Nur in Kombination mit einem Träger (am häufigsten wird Rinderserumalbumin verwendet)
immunogen sein
Thymus-abhängiges Antigen
Auf mich, den Arbeiter, kann man sich nicht verlassen
Vorbereitung
Frisch oder bei -40℃ gelagert
partikuläres Antigen
groß
Zelluläre Antigene, bakterielle Antigene, Parasitenantigene
intravenöse Immunisierung
lösliches Antigen
Kleines Molekül
Proteine, Glykoproteine, Lipoproteine, Enzyme, Komplement, bakterielle Toxine, Immunglobulinfragmente, Nukleinsäuren
grobe Extraktion
Erfassung einzelner Zellen
Mechanisches Maischen
Enzymbehandlung
Methode zum Zellaufschluss
wiederholte Gefrier-Tau-Methode
Ultraschallstörung
Autolysemethode
Enzymbehandlung
Methode zur Tensidbehandlung
Extraktion und Reinigung
Aussalzmethode
Methode zum Aussalzen von Ammoniumsulfat
Extraktionsverfahren mit Ammoniumoktansäuresulfat
Methode zum Aussalzen von Natriumsulfat
Neutralsalz (33-50 % gesättigtes Ammoniumsulfat)
Kann die Hydratationsmembran zerstören
Ladung neutralisieren
aggregieren und präzipitieren Proteine
Das Klassischste
am rauesten
Technologie zur Proteintrennung und -reinigung
Beeinträchtigt die Aktivität nicht
Polymerfällungsmethode (CIC)
Nachweis zirkulierender Immunkomplexe
PEG-Fällungsmethode
Kann die Situation der zirkulierenden Immunkomplexe kleiner Moleküle nicht widerspiegeln
Bestimmung Antigen-unspezifischer Immunkomplexe
Merkmale
Einfach
Schlechte Spezifität
anfällig für Temperatureinflüsse
Polyethylenglykol (PEG)
Molekulargewicht
6000
Je größer das Molekulargewicht des Proteins ist
Je niedriger die PEG-Konzentration, die zur Ausfällung erforderlich ist
3%-4%PEG
Ausfällbare Immunkomplexe
>5 %
Das Merkmal der Selektion von präzipitiertem CIC verschwindet
8 %–12 %
Fällt IgG aus
Die Komplementbeteiligungstechnologie erkennt CIC
Methode
C1q-Festphasenmethode
Antikörper C3-CIC-ELISA-Methode
Zirkulierende Immunkomplexe, die durch Antikörper der IgA-Klasse gebildet werden, können nicht nachgewiesen werden
Weil IgA kein Komplement binden kann
aldehydisierte rote Blutkörperchen
Merkmale
Kann einer Erwärmung auf 60 °C standhalten
Kann wiederholt eingefroren und aufgetaut werden und ist nicht leicht zu zerbrechen
Die Blutgerinnungsreaktion ist stärker als die von frischen roten Blutkörperchen
Lange Lagerzeit
Es können mehrere Viren gleichzeitig gereinigt werden
Starke Anwendbarkeit auf Viren
Immunadjuvans
Hilft bei der Generierung einer Immunantwort
Wird vor oder gleichzeitig mit dem Antigen in den Körper injiziert
Kann unspezifisch sein
Verbessern Sie die Immunantwort
Ändern Sie die Art der Immunantwort
Typ
immunogen
Zytokine, Lipopolysaccharid, Bacillus pertussis, BCG-Impfstoff
Zellen und Bakterien
Nicht immunogen
Aluminiumhydroxid, flüssiges Paraffin, Lanolin, Alaun
Adjuvantien zur Immunisierung von Tieren
Freunds Adjuvans
Freunds komplettes Adjuvans
Flüssiges Paraffin, Lanolin, BCG-Impfstoff
Noch ein BCG-Impfstoff
Freunds unvollständiges Adjuvans
Flüssiges Paraffin, Lanolin
Mechanismus
Ändern Sie die physikalischen Eigenschaften des Antigens
Verbessern Sie die Immunogenität
Verzögern Sie den Abbau und die Eliminierung von Antigenen
Stimuliert effektiv das Immunsystem
Stimuliert das Monozyten-phagozytische Zellsystem
Verbessern Sie seine Fähigkeit, Antigene zu verarbeiten und zu präsentieren
Stimulieren Sie die Proliferation und Differenzierung von Lymphozyten
Erhöhen Sie die Antikörpertiter der körpereigenen Immunantwort
Antikörpertyp ändern
Produzieren Sie mehr IgG
Auslösung von Überempfindlichkeitsreaktionen vom verzögerten Typ
Typ IV
Die Antigenspezifität kann nicht geändert werden
Wenn die Spezifität geändert wird, ist dieser Impfstoff nicht mehr derselbe.
Herstellung von Antiserum (Herstellung von Antikörpern)
Antiserum: Serum, das Antikörper enthält
Mehrere B-Zellen im Körper aktivieren und produzieren Antikörper gegen ein bestimmtes Antigen
polyklonaler Antikörper
Jede B-Zelle produziert einen Antikörper
Multiple B-Zellen sind polyklonale Antikörper
Typ
Typ R
Kaninchen und andere Kleintiere
Starke Affinität und schwer zu dissoziieren
Geeignet für große Auswahl
für diagnostische Reagenzien
H-Typ
Pferde und andere große Tiere
Schwache Affinität, leicht zu dissoziieren
Geeignet für enge Bereiche
zur Immuntherapie
Tetanusimpfstoff
wählen
Programm
Zeit
1. und 2. Mal
10-20 Tage
Zum dritten Mal und später
7-10 Tage
Blutentnahme nach der Impfung
5-7 Tage
5.7.10.20
Blutentnahmestelle
Blutentnahme aus der Halsschlagader
Große und mittlere Tiere
Augenentfernung oder Schwanzkupieren
Maus
Reinigung von Antiserum
Entfernung von Heteroantikörper-Adsorbaten
Antigenlösung ohne spezifisches Antigen
Affinitätschromatographie
Spezifische Affinität (Spezifität)
Reinigen Sie Antikörper, Enzyme und Rezeptorproteine
am besten, am effektivsten
Wie zum Beispiel die Extraktion von hochreinem spezifischem IgG
Affinitätsbindung Engagiert genug
Gelfiltration
Trennen Sie Proteine nach ihrem Molekulargewicht
Große Moleküle passieren zuerst
Gel durch Loch Schauen Sie sich die Größe an
Aussalzmethode
Das Klassischste und Rauste
Beeinflusst die Proteinaktivität nicht
Caprylsäure-Extraktionsmethode
Aussalzen der Rohölgewinnung sehr klassisch
Ionenaustauschchromatographie
Entsprechend der Ladung, die das Protein trägt
Ionen sind unterschiedlich geladen
Affinitätschromatographie
Verfahren
Während das Antiserum die Säule passiert
Die spezifische Affinität des Festphasenträgers zur abgetrennten Substanz
IgG wird von der Chromatographiesäule adsorbiert
Wechseln Sie dann die mobile Phase, damit die spezifische Adsorption der Zielsubstanz verschwindet.
IgG dissoziiert von der Säule
um den Zweck der Reinigung zu erreichen
Gelfiltration
Gelchromatographie/Molekularsiebfiltration
Nach dem Molekulargewicht des Proteins
großes Protein
Direkt durch die Lücken zwischen den Gelen
zuerst abgewaschen
kleines Protein
wird in das Gel gelangen
wurde später eluiert
Aussalzmethode
Methode zum Aussalzen von Ammoniumsulfat
Extraktionsverfahren mit Ammoniumoktansäuresulfat
Methode zum Aussalzen von Natriumsulfat
Neutralsalz (33-50 % gesättigtes Ammoniumsulfat)
Kann die Hydratationsmembran zerstören
Ladung neutralisieren
aggregieren und präzipitieren Proteine
Das Klassischste
am rauesten
Technologie zur Proteintrennung und -reinigung
Beeinträchtigt die Aktivität nicht
Ionenaustauschchromatographie
Unterschiedliche Gebühren
positiv geladen
Anionenaustauscherharz
Denn was ich austauschen möchte, ist Anion
negativ geladen
Kationenaustauscherharz
Denn was ich austauschen möchte, sind Kationen
Identifizierung und Konservierung von Antiseren
Identifikation
Antikörperspezifität
Zwei-Wege-Immundiffusion
Bestimmung des Antikörpertiters
Schachbretttitration (Quadrattitrationsmethode)
Zwei-Wege-Immundiffusion
Optimale Arbeitskonzentration
Berwertungskriterien
Antigen und Antikörper
Stark positiv
höchste Verdünnung
niedrigste Konzentration
speichern
kurzfristige Lagerung
2-8℃
5 Jahre haltbar
Gängige Methoden
Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen
Kryokonservierung
5-10 Jahre haltbar
Vakuumtrocknung
Monoklonale Antikörper
Grundprinzipien der Hybridom-Technologie
Herstellung monoklonaler Antikörper
Schutzmittel
Dimethylsulfoxid
Monoklonale Antikörper
Einzelne B-Zellen isoliert
Nach der Proliferation bildete sich eine Klonkolonie
einzelnes Epitop
Gleiche Struktur
Funktionell homogene Antikörper
Verdünnen Sie die fusionierten Zellen
Jede Kultur gut
Eigentlich
0-Anzahl der Zellen
Die Theorie ist
1 Zelle
Von Hybridomzellen produzierte Antigenmoleküle
eine einzelne antigene Determinante
von Antikörpern
Spezifität
es hängt davon ab
Screening klonaler Zellen
Klonkultur positiver Hybridomzellen
Grenzverdünnungsmethode
Am Meisten verwendet
Mikroskopie
Intuitiv und zuverlässig
Lange Betriebszeit und leichte Verschmutzung
Fluoreszenzaktivierter Zellsortierer
Hohe Effizienz und teuer
Methode mit weicher Agarplatte
Schwer zu meistern
Grundlegend
Splenozyten
Sensibilisierte B-Zellen
Funktion der Antikörpersekretion
Myelomzellen
nicht-sekretorisch
Produziert keine Immunglobuline
Kann unendlich geteilt werden und hat Unsterblichkeit
Rückmiete verhindern
8-Azaguanin
Medikament, das Myelomzelllinien züchten kann, denen Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribose-Konvertase (HGPRT) fehlt
speichern
-196℃ flüssiger Stickstoff
Mittel zur Zellfusion
Polyethylenglykol (PEG)
HAT mittel
Hypoxanthin (H), Aminopterin (A), Thymidin (T)
Aminopterin (A)
Folsäure-Antagonist, der den Hauptweg der DNA-Synthese in Zellen blockiert
Nicht fusionierter Zelltod
Überleben von Hybridomzellen
Typ
B-Lymphozyten-Hybridom-Technologie
Bereiten Sie monoklonale Antikörper vor
T-Lymphozyten-Hybridom-Technologie
Herstellung verschiedener Lymphokine
Vorbereitung
In-vivo-Induktionsmethode
Nehmen Sie BALB/c-Mäuse
Intraperitoneale Injektion von 0,5 ml flüssigem Paraffin, gefolgt von Phytan
Induktor
Aszites auslösen
1 Woche später
Intraperitoneale Inokulation von Hybridomzellen
Vermehren sich in der Bauchhöhle von Mäusen
Produktion und Sekretion monoklonaler Antikörper
10-14 Tage nach der Impfung
Aszites absaugen
Peritonealzellen
Feederzellen
Erhalten Sie große Mengen monoklonaler Antikörper
charakteristisch
Sehr spezifisch
Bindet nur an das entsprechende Epitop
Zielen Sie nur auf ein Epitop
hoher Grad an Einheitlichkeit
Wiederholbarkeit
schwache Agglutinationsreaktion
Kein Niederschlag
Nach der Fällung besteht keine Möglichkeit zur Durchführung einer Immunturbidimetrie.
Sehr empfindlich gegenüber der Umwelt
Reinigungsmethode
Aussalzmethode
Caprylsäure-Extraktionsmethode
Gelfiltration
Ionenaustauschchromatographie
Affinitätschromatographie
Der effektivste
Identisch mit der Reinigung des Antiserums
speichern
Vakuumtrocknung
Gentechnik
Prinzip
DNA-Rekombinations- und Protein-Engineering-Technologie
Modifizieren und montieren Sie Antikörper-kodierende Gene je nach Bedarf
Importieren Sie entsprechende Empfängerzellen
erneut exprimierte Antikörper
Vorteil
Reduzieren oder beseitigen Sie sogar die Abstoßung von Antikörpern durch den Körper
humanisierte Antikörper
Behält die Affinität und Spezifität des Elternantikörpers
Reduzieren Sie die Heterogenität der Antikörper
Förderlich für die Anwendung im menschlichen Körper
Typ
chimäre Antikörper
Funktionelles humanes Ig-genehmigtes Gen der variablen Region
Chimäre Maus-Mensch-Antikörper
Merkmale
Heterogenität reduzieren
Behält die Spezifität und Affinität des Elternantikörpers bei
Reduzieren Sie die Ablehnung
modifizierter Antikörper
Komplementaritätsdeterminanten (CDRs) in variablen Regionen menschlicher Antikörper (hypervariable Regionen)
Wechseln Sie zur Mausquellsequenz
Merkmale
Hat die Spezifität von aus der Maus stammenden monoklonalen Antikörpern
Avidität der Antikörper aufrechterhalten
menschliche Antikörper
Vollständig menschliche Antikörper
Die idealste Form therapeutischer Antikörper
Bispezifische Antikörper/bifunktionale Antikörper
Zwei Antigenbindungsstellen haben unterschiedliche Spezifitäten
kombiniert zwei verschiedene Antigenmoleküle
Kombinatorische Antikörperbibliothekstechnologie
Variable Regionen der leichten und schweren Kette
zufällige Kombination
Entwicklung einer neuen Technologie zur Paarung leichter und schwerer Ketten
Agglutinationsreaktion
Überblick
partikuläres Antigen
Bakterien, rote Blutkörperchen
oder Oberfläche, die mit löslichem Antigen oder Antikörper bedeckt ist
Feinstaub
Lösliches Antigen muss die Partikel umhüllen
Sonst unsichtbar
Bindet an den entsprechenden Antikörper oder das entsprechende Antigen
Sichtbare Blutgerinnsel
Einstufung
direkte Agglutinationsreaktion
partikuläres Antigen
indirekte Agglutinationsreaktion
lösliches Antigen
Brauche Hilfe vom Mobilfunkanbieter
Merkmale
Qualitativ
Halbquantitativ
Nach der Verdünnung
Als Potenz bzw. Titer verwenden Sie den höchsten Verdünnungsfaktor
Bequem und einfach
Keine spezielle Ausrüstung erforderlich
zwei Etappen
spezifische Bindung von Antigen und Antikörper
Es kommt zu einer sichtbaren Agglomeration der Partikel
Beeinflussen
Fördern Sie die Agglutination
Erhöhen Sie Elektrolyte oder Proteine
Erhöhen Sie die Viskosität der Testlösung
Cystinase-Behandlung
Neuraminidase-Behandlung
direkte Agglutinationsreaktion
partikuläres Antigen
Agglutinogen
Antigen (partikulär)
Lektin
Antikörper
Methode
Slide-Methode
Bekannte Antikörper
Testantigen
Bei der Blutgruppenbestimmung ist Blut das Antigen, daher werden bekannte Antikörper verwendet
Kann sowohl Antigene als auch Antikörper erkennen
Anwendung
Stammidentifizierung
Kann beide Antigene erkennen
Auch Antikörper können getestet werden
Serologische Typisierung
Identifizierung der ABO-Blutgruppe
Reagenzglasmethode
Halbquantitativ
bekanntes Antigen
Test auf Antikörper
Waifei-Test, Cross-Match, Feida-Test
Tipp: Diplomaten sind so fett, dass sie bluten.
Waifei-Test
Verwendung des gleichen Epitops von Proteobakterien und Klebsiella
Test auf Typhus
Feida-Test
Typhus-Agglutinationstest
So fett, so traurig
Antikörper bestimmen
heterophiler Agglutinationstest
Epstein Barr Virus
Es treten IgM-Antikörper auf
Kann rote Blutkörperchen von Schafen und Pferden unspezifisch agglutinieren
heterophiler Antikörper
Oberflächenrezeptoren
C3d-Rezeptor
Diagnose der infektiösen Mononukleose
indirekter Agglutinationstest
Lösliches Antigen oder Antikörper
Kann nicht erkannt werden
AFP-Antigen
Vorwärtsindirekter Agglutinationstest
bekanntes Antigen
Test auf Antikörper
Agglutination ist positiv
Vorwärts gibt es zuerst ein Antigen, es handelt sich also um ein bekanntes Antigen
Antigen-sensibilisierender Träger
umgekehrter indirekter Agglutinationstest
Bekannte Antikörper
Testantigen
Agglutination ist positiv
Antikörpersensibilisierender Träger
Anwendung
Diagnose einer Latexschwangerschaft
Motto: Mach die Dinge richtig und mach die Dinge richtig
Antikörper sind relativ flach
Unterschied: Antigen- oder Antikörper-sensibilisierender Träger
Vorwärtsindirekter Hemmungsagglutinationstest
im Gegenzug
Bekannte Antikörper
Testantigen
Agglutination ist negativ
Auch die Interpretation der Ergebnisse ist umgekehrt.
Es ist jedoch bekannt, dass Antikörper den Träger nicht sensibilisieren
Ein weiteres allergenes Mittel 2
Verfahren
Anwendung
Ascoli-Test auf Anthrax
Agglutinationstest mit umgekehrter indirekter Hemmung
im Gegenzug
bekanntes Antigen
Test auf Antikörper
Agglutination ist negativ
Auch die Interpretation der Ergebnisse ist umgekehrt.
Das bekannte Antigen ist jedoch kein sensibilisierender Träger
Ein weiteres allergenes Mittel 2
synergistischer Agglutinationstest
Staphylococcus aureus Protein A (SPA) als Träger
Unspezifische Bindung an das Fc-Segment von IgG (sensibilisierter Partikelträger)
Testantigen (unbekannt)
für lösliche Antigene
Direkter Nachweis bakterieller Viren
indirekter Hämagglutinationstest
Träger
rote Blutkörperchen
Häufig verwendet
Schafe, Kaninchen, Hühner
Menschliche rote Blutkörperchen vom Typ O
Weil sich auf der O-Typ-Oberfläche kein Antigen befindet
Beschichtendes Antigen oder Antikörper auf roten Blutkörperchen
Sensibilisierungsvektor bilden
Einfache rote Blutkörperchen sind keine sensibilisierenden Träger
Überprüfen Sie, ob rote Blutkörperchen passiv miteinander verklumpen
Ergebnis
Positiv
Agglutination
um den Boden des Lochs herum
Negativ
Boden des Sedimentationslochs
ein kleiner Punkt
Wie der TPPA-Test für Syphilis
Latex-Agglutinationstest
indirekter Agglutinationstest
Latexpartikel
adsorbierbares Protein
Prinzip
adsorbiertes Antigen
Antikörper erkennen
Antigen
Denaturiertes IgG
Rheumafaktor (RF)
Auch Rheumafaktor genannt
Hämolysin „O“
Antihämolysin „O“ (ASO)
Vektor verwendet
Polystyrol-Latex
Durchmesser
0,8 um
Merkmale
Reagenzglasmethode
Slide-Methode
Bindungsfestigkeit
Unterschied
Weniger empfindlich als Gerinnungstests
Gelatine-Agglutinationstest
indirekter Agglutinationstest
An rosa Gelatine adsorbiertes Antigen
Antikörper erkennen
Testbare Viren
Antiglobulintest (Coombs-Test)
Coombs-Test
Autoimmunhämolyse erkennen
Methoden zum Nachweis unvollständiger Antikörper gegen rote Blutkörperchen
Antikörperklassifizierung
vollständiger Antikörper
IgM
Weil es ein Pentamer ist
Kann dazu führen, dass rote Blutkörperchen zusammenkleben und sich dann vernetzen
mit bloßem Auge sichtbar
unvollständige Antikörper
Merkmale
Kann an Antigene binden (sensibilisieren)
Es sollte keine sichtbare Agglutinationsreaktion auftreten
ein Fragment eines IgG-Antikörpers
Immunantikörper sind meist unvollständige Antikörper
Typ
direkter Antiglobulintest
Bestimmung der Oberflächenbindung
Es hat diagnostischen Wert für die Rh-hämolytische Erkrankung des Neugeborenen
Denn hiermit soll festgestellt werden, ob Zellen sensibilisiert sind
indirekter Antiglobulintest
Kostenlos bestimmen
Nachweis mütterlicher Rh(D)-Antikörper (Anti-D-Antikörper)
Anwendung
Blutvergleichstest
Anti-D-Antikörper
Diagnose einer hämolytischen Anämie bei Neugeborenen
Nachweis unvollständiger Antikörper gegen Bakterien
Kaltkondensationstest
Kälteagglutinin-Syndrom
Autoimmunhämolyse erkennen
Verursacht durch IgM/Makroglobulin/Kälteagglutinin
eingeteilt in
Einzelner Pflanzentyp
Hybrid
Verfahren
bei niedrigeren Temperaturen
Antikörper und autologe Agglutination roter Blutkörperchen
Symptome einer Zyanose an Händen und Füßen
Die Temperatur steigt auf 20-25℃
Das Komplement wird aktiviert und es kommt zur Hämolyse
Die Temperatur steigt um 37℃
Völlig reversible Trennung
Die Symptome verschwinden
Kaltkondensationstest
in vitro
Optimale Temperatur 0-4℃
Dissoziieren bei 37°C
Beurteilung der Ergebnisse
Negativ
Kälteagglutinin-Titer <1:32
Positiv
Kaltagglutinin-Titer > 1:64
Diagnose
primäre atypische Pneumonie
Fällungsreaktion
zirkulierende Immunkomplexe
optimale Niederschlagstemperatur
4℃
Fällungsreaktion in Flüssigkeit
Immunturbidimetrie
Definition
Puffer
Phosphatlösung
Trübungssteigerndes Mittel
Polyethylenglykol (PEG)
Kann schnell Immunkomplex-Partikel (IC) bilden
Bei leichtem Antikörperüberschuss und Immobilisierung
IC ist proportional zur Menge des zu messenden Antigens
Prinzip
Optische Messgeräte kombiniert mit automatisierten Analysesystemen
Klassifizierung der Immuntrübung
Immunturbidimetrie
Übertragenes Licht
Kein Licht trifft auf den Komplex (IC)
Das auf den Komplex (IC) treffende Licht wird absorbiert
Absorptionswert (absorbierte Lichtmenge) und IC-Menge
Positive Korrelation
Je mehr IC, desto höher die Extinktion
Immunturbidimetrie
Streulicht
Licht, das nach dem Auftreffen auf den Komplex (IC) gebrochen wird
Wenn der Partikeldurchmesser viel kleiner ist als die Wellenlänge des einfallenden Lichts
Die Streulichtverteilung ist relativ gleichmäßig
Werden Sie ein Rayleigh Scatter
Streulichtintensität erkennen
Positive Korrelation
Je mehr ICs vorhanden sind, desto stärker ist das Streulicht
Einstufung
Endpunktstreuturbidimetrie
Nachdem das Antigen-Antikörper-Gleichgewicht erreicht ist
Bestimmen Sie die Menge an Komplex
Rate-Scatter-Turbidimetrie
Immunglobulintest
am empfindlichsten
Der am besten geeignete Ansatz
Zur Bestimmung der Enzymaktivität
Genauer
Kinetische Bestimmungsmethode
Anwendung
Das zweite Spitzensignal erscheint
Das erste Spitzensignal wird von allen zu testenden Antigenen erzeugt
Es erscheint kein zweites Spitzensignal
Die getestete Antigenmenge ist zu hoch
Prämisse
Überdosis Antikörper
System zur Erkennung einer Antikörper-Überdosis
Entwickeltes Erkennungssystem zur Sicherstellung überschüssiger Antikörper
Hook-Effekt verhindern
Antigen-Überdosierung verhindern (Afterzone-Phänomen)
Schwellenwerte für Antigenüberschuss
Beeinflussende Faktoren
Antikörperqualität
Starke Spezifität, hohe Wirksamkeit und starke Affinität
Verwenden Sie Antikörper vom Typ R
Nachweisreagenz
Klinische Anwendung
Testen Sie den Ig-Gehalt
am häufigsten verwendete Methode
Testen Sie Serum-Apolipoprotein
am häufigsten verwendete Methode
Immunglobuline erkennen
IgG, IgA, IgM
Hoher Inhalt
Nachweis von Immunglobulin-Unterklassen
Ergänzen Sie C3, C4
Spurenprotein im Urin
therapeutische Wirkstoffkonzentration
Sedimentationstest im Gel
Einweg-Agar-Diffusionstest
Kann manuell durchgeführt werden
Kann nur auf Antigen getestet werden
Prinzip
Mischen Sie eine quantitative Menge Antikörper in das Agargel
Agarplatte
Bohren Sie Löcher in die Kunststoffplatte
Serum (Antigen) in die Vertiefung injizieren
Plattenmethode
In 0,9 % Agargel
37℃, freie Erweiterung
Ringdiffusion
Reagenzglasmethode
0,7 % Agaroselösung
Diffusion bei 50℃
Bildung sichtbarer Niederschlagsringe
Positive Korrelation
Je höher der Antigengehalt
Je größer der Niederschlagsring
Es muss eine Standardkurve erstellt werden
Fügen Sie gleichzeitig 5-7 Antigenstandards unterschiedlicher Konzentration hinzu
Bestimmen Sie den Durchmesser des Sedimentationsrings
Abszisse
Antigen-Standardkonzentration
Y-Achse
Durchmesser des Sedimentationsrings
Anwendung monoklonaler Antikörper zur Messung polymorpher Antigene
Messwert
Auf der niedrigen Seite
Single und niedriger
Messung von M-Protein mittels polyklonaler Antikörper
Messwert
Auf der hohen Seite
Wie hoch
Methode
Reagenzglasmethode
Plattenmethode
Rechenmethode
Mancini-Kurve
Geeignet für großmolekulare Antigene und Langzeitdiffusion (>48 Stunden)
Das Quadrat des Niederschlagsringdurchmessers d2 steht in einem linearen Zusammenhang mit der Antigenkonzentration c
c/d2=k
k: konstant
Fahey-Kurve
Geeignet für kleinmolekulare Antigene und kürzere Diffusionszeiten
logc/d=k
c: Antigenkonzentration
d: Sedimentationsringdurchmesser
k: konstant
klinische Bedeutung
Wird von Primärkrankenhäusern verwendet
Bestimmung des IgG-, IgA-, IgM- und Komplement-C3- und C4-Gehalts
Bei der Messung von M-Protein mit polyklonalen Antikörpern
Der Sedimentationskreis erweitert sich
Methodische Bewertung
Nicht sehr empfindlich
Erkennungszeit
48-72 Stunden
2-3 Tage
Gleichzeitig muss eine Standardkurve erstellt werden
zur quantitativen Bestimmung
Zwei-Wege-Agar-Diffusionstest
bilden
Reagenzglasmethode
Geben Sie zunächst Agar mit Antikörpern in das Reagenzglas
Nach dem Erstarren eine Schicht gewöhnliches Agar in die Mitte geben
Nach dem Abkühlen die Antigenlösung zur oberen Schicht hinzufügen
Nach der Platzierung diffundieren Antigen und Antikörper frei in die mittlere Agarschicht.
Plattenmethode
zwei Löcher
ein Antigen
Ag
ein Antikörper
Ab
Beurteilung der Ergebnisse
In der Nähe des Antigenbrunnens
Hoher Antikörperspiegel
In der Nähe der Antikörpervertiefung
Hoher Antigengehalt
Wer sich fernhält, wird es eher sein
Bogen erscheint
Weil das Molekulargewicht klein ist
Schnell verteilen
Aufgrund des kleinen langsamen Diffusionskreises ist die lokale Konzentration groß
Die Fällungslinie wird sich zur Seite mit dem größeren Molekulargewicht hin verbiegen.
Wessen Kopf ist kleiner?
Bestimmung des Antikörpertiters
Schachbretttitration (Founder-Titrationsmethode)
Ein zweiphasiger Immundiffusionstest
Zweck
Wählen Sie die optimale Arbeitskonzentration
Höchste Verdünnung, die stark positiv war
Die niedrigste Konzentration, die stark positiv ist
Immunelektrophorese
Prinzip
Elektrisches Gleichstromfeld
Kombiniertes Produkt aus elektrophoretischer Analyse und Geldiffusion (Fällungsreaktion)
Am häufigsten verwendete Gele
Agarose
Konzentration
0,8 %–1,0 %
Im Allgemeinen ist die Elektrophorese von Proteinmolekülen im Gel fast die gleiche wie die freie Elektrophorese.
Aufgrund des Pufferverhältnisses im Gel
99 %
Prinzip
Antigene und Antikörper sind negativ geladen
Weil das Antigen negativer geladen ist
Kathode anlegen
schwimmt zur Anode
Denn Antikörper sind weniger negativ geladen
Setzen Sie die Anode auf
Unter der Wirkung elektroosmotischer Kraft
Elektroosmotische Kraft: Wasser schwimmt von der Anode zur Kathode
schwimmt zur Kathode
Konvektive Immunelektrophorese
IgG1 und IgG2
durch Elektroosmose
Gehen Sie zur Kathode
IgG3 und IgG4
Weil es negativer geladen ist
Bewegen Sie sich in Richtung Positivität
Einstufung
Konvektionsimmunelektrophorese (CIEP)
Zweiphasige Immundiffusion kombiniert mit Elektrophorese
Antigen-Kathode
Antikörperanode
IgG-Antikörper
durch Elektroosmose
Bei optimalem Verhältnis von Antigen zu Antikörper bildet sich eine milchig-weiße Niederschlagslinie.
Phänomen, das als umgekehrte negative Polregression bezeichnet wird
Beeinflussen
Elektroosmose
Die elektrophoretische Kraft des Antikörpers ist geringer als die elektroosmotische Kraft
Schwimmen Sie also zur Kathode
pH-Wert
Wie viel Ladung hat ein Molekül?
Hängt vom pH-Wert des Puffers ab
Je weiter der pH-Wert des Puffers vom isoelektrischen Punkt entfernt ist
Je mehr aufgeladen
schneller schwimmen
Isoelektrischer Punkt
Der pH-Wert einer Lösung, wenn Proteine in gleiche positive und negative Ladungen dissoziieren
Raketenimmunelektrophorese (RIE)
Messbereich
ug/ml oder höher
Einphasige Immundiffusion kombiniert mit Elektrophorese
Die Höhe des Peaks ist proportional zur Antigenmenge
Die Spitze des Gipfels hat die Form unklarer Wolken
Die Elektrophorese hat ihren Endpunkt noch nicht erreicht
beispielsweise in Kombination mit der Autoradiographie
Erhöhte Empfindlichkeit
1000 Mal
Immunelektrophorese (IEP)
Zweiphasige Immundiffusion kombiniert mit Zonenelektrophorese
Verfahren
Zonentechnologie zuerst
Erkennen Sie ungenutzte Zonen
Nachdem die Elektrophorese stoppt
Geben Sie dann Serum (Antikörper) in den parallelen Antikörpertank.
Machen Sie nur ein Loch und geben Sie das Serum hinein
Schauen Sie sich die bogenförmige Sedimentationslinie an
Ergebnis
messbar
M-Protein
klinische Bedeutung
Qualitativer Test
Serumproteinanalyse von multiplem Myelom und Makroglobulinämie
M-Protein
zwischen γ und β
Identifizierung der Antigenkomponente
Identifizierung monoklonaler Gamma-Antikörper
Kann grob den Immunglobulintyp widerspiegeln
kann nur grob widerspiegeln
Nicht genau
IgG
Zwischen α und langsamem γ
IgA
β und γ1
IgM
β2 oder γ
IgD
β oder γ
IgE
β, um γ zu verlangsamen
Immunfixationselektrophorese (IFE)
erste Person, die sich meldet
Alfons
Immunchemische Methoden (Antigen-Antikörper-Bindungsreaktion) kombiniert mit Zonenelektrophorese
Prinzip
Zonentechnologie zuerst
verschiedene Zonen erkennen
Anschließend die leichten Kappa- und Lambda-Ketten mit Antikörpern (Antikörper gegen leichte Kappa- und Lambda-Ketten) oder Schwerketten-Antiserum (Antikörper gegen schwere Ketten) bedecken.
Bildung eines komplexen Niederschlags
Spülen und färben
rendert farbige Zonen
klinische Bedeutung
M-Protein
am häufigsten verwendete Methode
Monoklonale Antikörper
Qualitative und typisierende (Art der leichten und schweren Kette) Identifizierung
Bevorzugte Methode
Identifizierung von leichten Immunglobulinketten und Nachweis wöchentlicher Proteine im Urin sowie κ- und λ-Typisierung
Ergebnisdiagramm
G-, A-, M-, Kappa- und Lambda-Ketten
SP steht für Total Serum Protein
Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE)
Prinzip
Zonenelektrophorese
Das Gel hat eine Netzwerkstruktur
Hat Molekularsiebwirkung
Je kleiner das Molekulargewicht
bewege dich schneller
Mehrere Bänder können getrennt werden
Mangel
Proteine mit ähnlichem Molekulargewicht können nicht getrennt werden
Verfahren
getrennte Bands
Der Trenneffekt ist für das bloße Auge unsichtbar
Elektrophoretische Banden treten erst nach der Färbung auf
Fügen Sie der oberen Gelschicht Stapelgel hinzu, um den Trenneffekt zu verbessern
Kompaktes Protein zur Schwimmförderung
Die Trennung von Serumproteinen kann erfolgen
Über 20 Zutaten
isoelektrische Fokussierungselektrophorese
Prinzip
Ein spezieller Puffer erzeugt einen pH-Gradienten im Gel
Häufig verwendete Gele
Polyacrylamidgel
Dasselbe wie Sicherheitsdatenblatt
Merkmale
Die isolierten Molekulargewichte sind ähnlich
Proteine mit unterschiedlichen isoelektrischen Punkten
Radioimmunoassay
Radioimmunoassay
Häufig verwendete Radionuklide
125 I (Jod 125)
125 I (Jod 125) Markierungsmethode
direkte Notation
Jodmarkierung von Peptiden, Proteinen und Enzymen
Methode
Chloramin T (ch-T)-Methode
Lactoperoxidase-Markierungsmethode
indirekte Kennzeichnung
Anwendbar auf
Kleine Molekülverbindungen ohne Iod-Markierungsgruppen
Methode
Verbindungsnotationsmethode (Bolton-Hunter-Methode)
Erfordern
Radiochemische Reinheit
>95 %
Anforderungen an die Immunaktivität
>80 %
Stabilisator, der dem Eluat von Radionuklidmarkern zugesetzt wird
Die gleiche Menge 1 % Eiweiß
spezifische Radioaktivität
Die Intensität der Radioaktivität, die in einer chemischen Einheitsmenge eines Markers enthalten ist
Radiochemische Reinheit
Testmethoden
Verwenden Sie Trichloressigsäure, um alle Proteine in der zu untersuchenden Probe auszufällen
Insulinstandard
Reduziert die maximale Bindung von 125I-Insulin an Antiserum um 50 %
DosierungX
Proinsulin-Dosierung Y
Kreuzreaktivitätsrate = X/Y
Titer
Nach serieller Verdünnung eines Antiserums
reagieren mit markiertem Antigen
Methodik
hohe Empfindlichkeit
Proben und Reagenzien
Weniger Dosierung
Starke Spezifität
Gute Wiederholgenauigkeit
Einfach zu verwenden
einfach zu standardisieren
Mangel
radioaktive Kontamination
Klinische Anwendung
Hormone (wie hCG, Insulin etc.), Medikamente (Digoxin, Morphin, Barbiturate), Tumormarker (AFP, CEA), Spurenproteine
Es sind alles Spurenstoffe
Radioimmunoassay (RIA)
RIA
Prinzip
kompetitive Hemmungsreaktion
Es gibt Konkurrenz
Die Geschwindigkeit wird also langsamer
Kann nur messen
Antigen
Einheit
cpm oder cps
Umgekehrt proportional zu
Je mehr Antigene getestet werden sollen
Das weniger radioaktive Material
Verfahren
Markierte Antigene und bekannte Antikörper
Alle sind limitiert
Getrennter markierter Antigen-Antikörper-Komplex (B) und ungebundenes markiertes Antigen (F)
Methode
Zweite Antikörper-Präzipitationsmethode
Fällungsmethode mit Polyethylenglykol (PEG).
PEG kann makromolekulare Proteine wie Antigen-Antikörper-Komplexe unspezifisch ausfällen.
Fällt keine niedermolekularen Antigene aus
Mangel
Mehr unspezifischer Niederschlag
Wenn die Temperatur höher als 30 °C ist, löst sich der Niederschlag leicht wieder auf
PR-Reagenzmethode
Behält die Vorteile von Sekundärantikörpern und PEG bei
Sparen Sie Dosierung, schnelle und einfache Trennung
Aktivkohle-Adsorptionsmethode
Immunradiometrische Analyse (IRMA)
IRMA
Prinzip
nichtkompetitive Bindungsreaktion
Kann Antigen erkennen
Auch Antikörper können getestet werden
Einzelpunkt-IRMA
Reaktionssystem
markierter Antikörper
Zu testendes Antigen oder Antikörper
Antigen auf Festphase aufgetragen
der Unterschied
Prinzip
Verwenden Sie zunächst überschüssigen markierten Antikörper, um mit dem zu testenden Antigen zu reagieren
komplex bilden
im Überstand
Messen Sie die Strahlungsmenge im Überstand
Anschließend wird Festphasenantigen verwendet, um ungebundene markierte Antikörper zu binden.
und trennen Sie es
Kann Antigen erkennen
Auch Antikörper können getestet werden
IRMA mit zwei Standorten
Doppelte Antikörper-Sandwich-Methode
Reaktionssystem
markierter Antikörper
Zu testendes Antigen
Auf der Festphase beschichtete Antikörper
der Unterschied
Prinzip
Doppelte Antikörper-Sandwich-Methode
Die verbleibenden markierten Antikörper müssen abgewaschen werden
Messen Sie die Radioaktivität in fester Phase
Kann nur auf Antigen getestet werden
Verglichen
Anwendung
Raji-Zellen
Auf der Oberfläche gibt es eine große Anzahl von C3b-, C1q- und C3d-Rezeptoren
Kein Wunder
Nutzt diese Rezeptoren, um an zirkulierende Immunkomplexe zu binden, die Komplement binden
Fügen Sie dann mit Radionuklid markiertes Anti-Human-IgG hinzu
Nachweisbare zirkulierende Immunkomplexe
Fluoreszenz-Immuntechnik
Überblick
Die älteste etablierte Markierungstechnologie
Kann nicht zur quantitativen Bestimmung verwendet werden
Konzept
Fluorescein
Marker, die direkt an der Lumineszenz beteiligt sind
Fluoreszenz
Grundzustandsmoleküle (stabil, niedrige Energie)
Nach der Absorption von Licht einer bestimmten Wellenlänge
Angeregter Singulett-Zustand (höhere Energie)
Bei schneller Rückkehr in den Grundzustand
Emittiert Licht von einer Pflanze mit spezifischer Anregungslumineszenz
Fluoreszenzeffizienz
Der Prozentsatz an Fluorescein, der absorbierte Lichtenergie in Fluoreszenz umwandelt
Löschung der Fluoreszenz
Unter bestimmten physikalischen und chemischen Faktoren kann die Fluoreszenz schwächer werden oder sogar verschwinden.
UV-Bestrahlung
hohe Temperatur
Verwenden Sie Fluoreszenzlöscher, um unspezifische Fluoreszenz zu eliminieren
Methylenblau
Evans blau
Grundlegendes Fuchsin
Jodlösung
fluoreszierender Stoff
Fluoreszierende Pigmente
Fluoresceinisothiocyanat (FITC)
Gelbgrün
Molekulargewicht
389,4 kDa
Maximal absorbiertes Licht (Anregungswellenlänge)
490–495 nm
Maximal emittiertes Licht
520–530 nm
Die am weitesten gebrauchten
Vorteil
Das menschliche Auge reagiert empfindlich auf Gelbgrün
Normalerweise gibt es in geschnittenen Proben weniger grüne Fluoreszenz als rote Fluoreszenz
Tetraethylrhodamin (RB200)
Orange
Maximal absorbiertes Licht (Anregungswellenlänge)
570 nm
Maximal emittiertes Licht
595–600 nm
Nicht in Wasser löslich
Löslich in Ethanol und Aceton
Kann lange gelagert werden
Tetramethylrhodaminisothiocyanat
Orange Rot
Maximal absorbiertes Licht (Anregungswellenlänge)
550 nm
Maximal emittiertes Licht
620 nm
Kann mit FITC doppelt beschriftet werden
Phycoerythrin (R-RE)/(PE)
orange Farbe
Maximale Absorption (Anregungswellenlänge)
565 nm
488 nm
Maximal emittiertes Licht
620 nm
575 nm
Nicht in Wasser löslich
Löslich in Ethanol und Aceton
Kann mit FITC doppelt beschriftet werden
weit verbreitet
Gemeinsames 488-nm-Anregungslicht
Andere fluoreszierende Substanzen
Lanthanid-Chelate
Europium (Eu3)
Die am weitesten gebrauchten
Anwendbar auf
Zeitaufgelöster Fluoreszenzimmunoassay
Erzeugt Fluoreszenz nach Enzymeinwirkung
Kein fluoreszierender Effekt
Unter Einwirkung von Enzymen kann Fluoreszenz erzeugt werden
Herstellung fluoreszierender Antikörper
Fluorescein-Markierung von Antikörpern
Methode
Rührmethode
Dialyse
Reinigung markierter Antikörper
Methode
Dialyse
chromatographische Trennung
Identifizierung von Antikörpern
Antikörpertiter
Zweiphasiger Immundiffusionstest
Wenn der Antigengehalt 1 g/L beträgt
Titer>1:16
Beeinflussende Faktoren
Temperatur
Je niedriger die Temperatur
Höhere Effizienz und höhere Festigkeit
pH-Wert
Hängt von fluoreszierenden Pigmenten ab
Beispielsweise nimmt FITC im sauren Bereich ab
Lanthanoid-Chelate verstärken den Säuregehalt
Konzentration
Konzentration zu hoch
selbstverlöschendes Phänomen
Da es zu hoch ist, sollten die Moleküle heftig zusammenstoßen
Energie verlieren
Lösungsmittel
Fluoreszierende Verunreinigungen in Ethanollösungen
Muss bearbeitet werden
Verstärker
Beschleunigen Sie das Färben
Hat keinen Einfluss auf Farbeffekte
Fluoreszenzmikroskop
Lichtquelle
Anregungslichtquelle
Hochdruck-Quecksilberlampe
Xenonlampe
Halogenlampe
Filter
Thermofilter
Vor dem Kondensator des Lichtraumes
Blockiert den Durchgang von Infrarotstrahlen und isoliert Wärme
Anregungsfilter
zwischen Lichtquelle und Objektiv
Lässt selektiv Licht im ultravioletten, sichtbaren Wellenlängenbereich durch
Einstufung
UV-Filter (UG)
275-400 nm UV-Licht dringt durch
Maximale Transmission
365 nm
Blauer UV-Filter (BG)
Blaues ultraviolettes Licht von 325–500 nm dringt durch
Maximale Transmission
410 nm
Absorptionsfilter
zwischen Objektiv und Okular
Blockiert das Anregungslicht und lässt die emittierte Fluoreszenz durch
dunkler Hintergrund
Fluoreszenz zeigen
leicht zu beobachten
Augen vor starker Lichtreizung schützen
Transmissionsbereich
410–650 nm
Einstufung
OG
Orange Gelb
GG
hellgrünliches Gelb
andere
Sehen Sie sich FITC an
Anregungsfilter
BG12
Absorptionsfilter
OG4 oder GG9
Sehen Sie sich RB200 an
Anregungsfilter
BG12
Absorptionsfilter
OG5
Fluoreszierende Antikörpertechnologie
Auch bekannt als
Fluoreszenz-Immunhistochemie
Erforderlich für die Reaktion von Gewebe oder Zellen
Fluoreszenzmikroskopie
Man muss es sich unter dem Mikroskop ansehen
Verfahren
markierter Antikörper
Es können nur Antikörper markiert werden
Reagieren Sie mit Gewebe- oder Zellantigenen im Abschnitt
Nach dem Waschen und Trennen
Beobachten Sie Komplexe und Teile unter dem Mikroskop
klinische Bedeutung
Charakterisieren oder lokalisieren Sie Gewebezellantigene
Position
Welcher Teil emittiert Licht (Kern, Zytoplasma, Hülle usw.)
Es können Antigen-Lokalisierungstests durchgeführt werden
Fluoreszierende Antikörpertechnologie
Enzym-Gewebeimmunchemie
Vorbereitung von Proben
Muss Zellen haben
Serum und Plasma sind nicht akzeptabel
Quelle
Gewebeschnitte, Gewebeabdrücke, Zellabstriche, mikrobielle Abstriche, exfolierte Zellabstriche, konzentrierte Körperflüssigkeitsproben (Sedimente von Pleuraerguss und Aszites)
Typen
direkte Methode
Reagieren Sie direkt mit Antigen
auf dem Antikörper markiert
Nur das Antigen kann überprüft werden
Merkmale
Höchste Spezifität
Methode mit der geringsten unspezifischen Färbung
Hohe direkte Spezifität
schlechte Empfindlichkeit
Wenige unspezifische fluoreszierende Färbefaktoren
indirekte Methode
Testen Sie unbekannte Antikörper mit bekannten Antigenen
primärer Antikörper
humanIg
sekundärer Antikörper
Glühwürmchen- oder enzymmarkiertes Schaf-/Kaninchen-Ig
Das Gleiche gilt für ELISA-Tests auf Antikörper.
Es gibt sekundäre Antikörper
Auf sekundärem Antikörper markiert
Fluorescein-markierter Sekundärantikörper, konjugiert an den Primärantikörper
Kann Antigen erkennen
Auch Antikörper können getestet werden
Vorteile gegenüber der direkten Methode
Erkennen Sie verschiedene Antigene
Bereiten Sie einfach einen fluoreszierenden Antikörper vor
Weil Fluorescein auf dem Sekundärantikörper markiert ist
Erkennung
antinukleäre Antikörper
Der effektivste
Doppeletikettierungsmethode
Markieren Sie verschiedene Antikörper mit FITC bzw. Rhodamin
Färben Sie dasselbe Exemplar
Klinische Anwendung
Kein Ersatz für andere Routinetests
Autoantikörpertest
Antinukleäre Antikörper (ANA) im Serum
Erregernachweis
Identifizieren Sie Krankheitserreger
Spezifische Antikörperspiegel im Serum
Immunpathologische Tests
Nachweis von Oberflächenantigenen und -rezeptoren
Identifizierung von Lymphozyten und Subpopulationen
Durchflusszytometrie
Typ Fluoreszenz-Immunoassay
Zeitaufgelöster Fluoreszenzimmunoassay (TRFIA)
Prinzip
Mit Lanthanidenelementen
Markieren Sie Antigen oder Antikörper
Bestimmt mit zeitaufgelösten Techniken
Zeitauflösung
unspezifische Fluoreszenz
Die Fluoreszenzlebensdauer ist kurz
Lanthanid-Chelate
Lange Fluoreszenzlebensdauer
Nach unspezifischem Fluoreszenzabfall
Erkennen Sie das Fluoreszenzsignal erneut
Stokes-Verdrängung
Wellenlängenunterschied zwischen Anregungsspektrum und Emissionsspektrum
Wenn die Stokes-Verschiebung klein ist
Anregungs- und Emissionsspektren überschneiden sich häufig
stören sich gegenseitig
Lanthanid-Chelate weisen große Verdrängungen auf
Eliminiert problemlos Streuinterferenzen des Anregungslichts
Signalstärke
Die Fluoreszenz kann in saurer Verstärkungslösung verstärkt werden
Klinische Anwendung
ähnlich dem Radioimmunoassay
Spurenstoffe erkennen
Noch ein Protein zum Nachweis
Fluoreszenzpolarisationsimmunoassay (FPIA)
Prinzip
Nutzung von Antigen-Antikörper-Konkurrenzreaktionen
Unterschied im Fluoreszenzpolarisationsgrad von markiertem Antigen und Komplex
Anwendung
im Blut oder Urin
Bestimmung kleiner Moleküle
Arzneimittelkonzentration
Erste Methode
Fluoreszierender Enzymimmunoassay
Prinzip
Nutzen Sie die Reaktion von Antigen und Antikörper mit Hilfe der Enzymreaktion des fluoreszierenden Substrats
Die vorherige Methode ist die Doppel-Antikörper-Sandwich-Methode.
Substrat hinzufügen
Verfahren
Substrat 4-MUP weist keine Fluoreszenz auf
Emittieren Fluoreszenz unter der Stimulation von ALP
Durchflusszytometrie-Analysator (FCM)
Überblick
Nutzung der Eigenschaften integrierter Optik, Strömungsmechanik, elektronischer Computertechnologie und Fluorescein zur Erzeugung von Fluoreszenz
Technologie zur quantitativen Multiparameter-Messung und Sortierung jeder Zelle
Häufig verwendete Lichtquellen
Licht ausgestrahlt
Von Fluorescein absorbiertes Licht
Laser
Struktur
Flüssigkeitsflusssystem
Optisches und Signalumwandlungstestsystem
Computersysteme zur Signalverarbeitung und -verstärkung
Prinzip
Einzelzellsuspensionen und Hüllflüssigkeiten, markiert mit spezifischen fluoreszierenden Brennstoffen
Betreten Sie den Flow-Raum
Es bildet sich eine einzellige Flüssigkeitssäule, die die Zellsuspension in der Hüllflüssigkeit einkapselt
Flüssigkeitssäule und horizontaler Laserstrahl (Anregungslichtquelle)
vertikaler Schnittpunkt
Daten
Vorwärtsstreulicht (FS)
Partikelgröße
Seitliches Streulicht (SS)
Die Komplexität im Inneren des Teilchens
Oberflächenglätte
Es ist dasselbe wie die fünf Kategorien
Fluoreszenz (FL)
Die Anzahl der durch Partikel verfärbten fluoreszierenden Teile
PI-Färbung
Zellzyklus
Häufig verwendete DNA-Marker
PI (Propidiumiodid)
Häufig verwendete Anregungswellenlängen
488 nm
Häufig verwendete Emissionswellenlängen
620 nm
Erntemenge sortieren
Es besteht ein entsprechender Zusammenhang zwischen Erntemenge und Reinheit
Hohe Reinheit der sortierten Zellen
Die Erntequote ist relativ gering
Hüllenflüssigkeit
Wirkung
Wickeln Sie den Probenstrom um
Zentrieren Sie den Probenfluss in der Düse
Garantierte Genauigkeit
Verhindern Sie, dass Zellen in die Nähe der Düsenwand gelangen und das Loch blockieren
Anwendung
T-Zell-Untergruppen
Höchste Nachweisempfindlichkeit
Mit fluoreszierenden Anti-Ig-Antikörpern gefärbte B-Zellen
Die Oberfläche zeigt mit der Zeit Veränderungen der Fluoreszenz
klingeln, flecken, bedecken, verschwinden
Enzymimmunoassay
Enzymimmunoassay
Nutzen Sie die effiziente und spezifische katalytische Aktivität von Enzymen
Enzymkonjugat
Enzymmarkiertes Antigen oder Antikörper
Biomagnifikation katalytischer Substrate
Eine kleine Menge Enzym kann eine große Menge an Substanzen widerspiegeln
Markiertechnik
Antigen oder Antikörper
Positionierung, qualitativ, quantitativ
Merkmale
Enzyme und Substrate
Enzymbedarf
Starke Aktivität
Hohe Reinheit
Einfache Kopplung mit Antigen und Antikörper
Die Aktivität ist nach der Markierung stabil
Beeinflusst die Immunreaktivität von Antigenen und Antikörpern nicht
Spezifität
In der getesteten Probe ist kein endogenes Enzym oder Inhibitor vorhanden, der mit dem markierten Enzym identisch ist
Produkte, die durch Enzymkatalyse hergestellt werden
leicht zu beurteilen oder zu messen
Häufig verwendete Enzyme
Meerrettichperoxidase (HRP)
Substrat
Tetramethylbenzidin (TMB)
Meist genutzt
Blau
gute Stabilität
Keine Notwendigkeit, Licht zu meiden, keine mutagene Wirkung
Mangel
Schlechte Wasserlöslichkeit
O-Phenylendiamin (OPD)
Eines der empfindlichsten Chromogensubstrate
Orange Gelb
instabil
Erhältlich als Tabletten oder Pulver
Vor Gebrauch rekonstituieren
Konzept
Aus Gemüse gewonnen
ein Glykoprotein
Zuckergehalt 18 %
Komposition
farbloses Glykoprotein
Hauptenzym
Unabhängig von der Enzymaktivität
Maximaler Absorptionspeak
275 nm
Eisenhaltiges Blutrot
Coenzym
aktive Enzymgruppe
Maximaler Absorptionspeak
403 nm
Meist genutzt
Alkalische Phosphatase (AP/ALP)
Substrat
p-Nitrophenylphosphat (p-NPP)
Farbe
Gelb
Konzept
Extrahiert aus E. coli oder der Darmschleimhaut von Kälbern
Einstufung
Bakteriogen
Darmschleimhaut
Hohe Aktivität
β-Galactosidase (β-Gal)
Substrat
4-Methylumbelanoyl-R-D-Galactopyranosid (4-MUU)
Merkmale
Höhere Empfindlichkeit als HRP
30-50 Mal
Aber beim Messen ist es notwendig
Fluorometer
Konzept
Escherichia coli-Extraktion
Dem menschlichen Blut fehlt dieses Enzym
Keine Beeinträchtigung der Messung durch körpereigene Enzyme
Enzymmarker
Markierungsmethode
Glutaraldehyd-Vernetzungsmethode
Modifizierte Natriumperiodat-Methode
Mit HRP (Meerrettichperoxidase) markiertes Antigen und Antikörper
am häufigsten verwendete Methode
Festphasenträger
Der am häufigsten verwendete Festphasenträger für ELISA
Polystyrol
bedeckt
Der Prozess der Bindung eines Antigens oder Antikörpers an einen festen Träger
Puffer
PH9.6
Carbonatpuffer
geschlossen
1–5 % Rinderserumalbumin oder 5–20 % Kälberserum
Wieder abgedeckt
Beseitigen Sie unspezifische Farbentwicklung
Verhindern Sie, dass verunreinigte Proteine in das Serum gelangen und die Ergebnisse beeinträchtigen
Einstufung
Enzymimmunhistochemie
in der Pathologie verwendet
Lokalisierung von Antigenen in Gewebeschnitten oder anderen Proben
nur Antigen
Nur Positionierung
Enzymimmunoassay (EIA)
Qualifizierung oder Quantifizierung von Antigenen oder Antikörpern in Flüssigkeiten
Homogener Enzymimmunoassay
Enzymamplifizierte Immunoassay-Technologie (EMIT)
Clonase-Spender-Immunoassay (CEDIA)
Das auf dem Antigen markierte Enzym ist inaktiv Nur nach spezifischer Bindung aktiv
heterogener Enzymimmunoassay
Festphasen-Enzymimmunoassay
Flüssigphasen-Enzymimmunoassay
Trennen und unterscheiden Sie gebundene und freie Enzymmarker je nach Bedarf
in heterogene Phasen getrennt
Eine Scheidung erfordert eine Trennung
Homogener Enzymimmunoassay
Homogen ohne Trennung
Kein Träger erforderlich
Enzymimmunoassay
Wettbewerbsrecht
Prinzip
Das kombinierte Enzym verliert seine Aktivität
Testen Sie die Enzymaktivität
Was fehlt, ist das bindende Enzym
Vorteil
Zur Messung von niedermolekularen Antigenen (Hormonen) oder Haptenen (Arzneimitteln)
heterogener Enzymimmunoassay
heterogene Phasentrennung
Prinzip
Das kombinierte Enzym bleibt aktiv
Ich muss nur das Brett waschen
Es ist eine andere Phase
Einstufung
Flüssigphasen-Enzymimmunoassay
Bestimmung extrem kleiner Mengen kurzer Peptidhormone
Arzneimittel und andere kleine Molekül-Haptene
Empfindlichkeit
ng zu pg
Festphasen-Enzymimmunoassay
Als Träger feste Untergründe verwenden
gemeinsam
Enzymimmunoassay (ELISA)
Enzymimmunoassay (ELISA)
So erkennen Sie Antigene
Doppel-Antikörper-Sandwich-Methode (Zwei-Schritt-Methode)
Verfahren
Festphasenantikörper
Verbinden Sie zunächst den spezifischen Antikörper mit dem Festphasenträger
Antigen-Antikörper-Reaktion
Fügen Sie das zu testende Antigen hinzu
Bildung eines Festphasen-Antikörper-Antigen-Komplexes
erste Wäsche
Enzymmarkierte Antikörper
Enzymmarkierte Antikörper hinzufügen
Bildung eines Festphasen-Antikörper-Antigen-Enzym-markierten Antikörperkomplexes (auf zwei verschiedenen Epitopen des zu testenden Antigens)
zweite Wäsche
Farbentwicklung
Zur Farbentwicklung Substrat hinzufügen
Die Menge des gefärbten Produkts ist proportional zum zu testenden Antigen
Anwendbar auf
am häufigsten verwendete Methode
Multivalente Antigene mit mindestens zwei Epitopen
makromolekulares Antigen
Wie Hepatitis-B-Oberflächenantigen, Alpha-Fetoprotein, hCG
extrazelluläres lösliches Adhäsionsmolekül
lösliches Antigen
Zwei-Standort-Methode (einstufige Methode)
Verfahren
Kombinieren Sie das zu testende Antigen und den enzymmarkierten Antikörper
Nehmen Sie gleichzeitig an der Reaktion teil
Die beiden Antikörper stören sich gegenseitig nicht
Nach einer Wäsche
Zur Farbentwicklung Substrat hinzufügen
Mangel
Wenn die Konzentration des zu testenden Antigens zu hoch ist
Hook-Effekt (Backband-Phänomen)
Reduzierte Farbwiedergabe
Falsch negativ
Proben können verdünnt und erneut getestet werden
Wettbewerbsrecht
Umgekehrt proportional zu
Je höher die Menge des zu messenden Antigens ist
Die weniger farbigen Produkte
Verfahren
Festphasenantikörper
Verbinden Sie zunächst den spezifischen Antikörper mit dem Festphasenträger (begrenzte Menge).
Antigen-Antikörper-Reaktion
Fügen Sie das zu testende Antigen und das enzymmarkierte Antigen hinzu (begrenzte Menge).
Konkurrierende bindungsspezifische Antikörper
Waschen
Farbentwicklung
Zur Farbentwicklung Substrat hinzufügen
Anwendbar auf
Kleinmolekül-Antigene mit nur einem einzigen Epitop
Medikamente, Hormone usw.
So erkennen Sie Antikörper
indirekte Methode
Antikörper gegen das Hepatitis-C-Virus
Verfahren
Festphasenantigen
Auftragen des Antigens auf einen Festphasenträger
Antigen-Antikörper-Reaktion
Fügen Sie den zu testenden Antikörper hinzu
Bildung des zu testenden Festphasen-Antigen-Antikörper-Komplexes
erste Wäsche
Enzymmarkierter Sekundärantikörper
Enzymmarkierten Sekundärantikörper hinzufügen (Ziegen-Anti-Human-IgG)
Bildung eines Festphasen-Antigen-Antikörper-zu-nachzuweisenden-Enzym-markierten sekundären Antikörperkomplexes
zweite Wäsche
Ein Marker erkennt mehrere Analyten
Enzymmarkierte Sekundärantikörper können jeden Antigen-Antikörper-Komplex erkennen
Farbentwicklung
proportional zu
Wettbewerbsrecht
Hepatitis-B-Virus-Kernantikörper (HBcAb), Hepatitis-B-Virus-e-Antikörper (HBeAb)
Umgekehrt proportional zu
Je höher die zu messende Antikörpermenge ist
Die weniger farbigen Produkte
Verfahren
Festphasenantigen
Auftragen des Antigens auf einen Festphasenträger
limitierte Auflage, beschränkte Auflage
Antigen-Antikörper-Reaktion
Fügen Sie den zu testenden Antikörper und den enzymmarkierten Antikörper hinzu (begrenzte Menge).
Konkurrierende bindungsspezifische Antikörper
Waschen
Farbentwicklung
Zur Farbentwicklung Substrat hinzufügen
Beeinflussende Faktoren
Unzureichende Zentrifugation der Probe
Vorhandensein von Fibrin
Enzymetiketten bleiben am Fibrin haften
Dies führt dazu, dass es nicht abgewaschen werden kann
dunkle Farbe
Falsch negativ
Hämolyse
Weil die Hämolyse eine dunkle Farbe hat
Falsch negativ
Doppel-Antigen-Sandwich-Methode
Sensitivität und Spezifität
höher als die indirekte Methode
Anwendung
Nachweis von Hepatitis-B-Oberflächenantikörpern
Erfassungsmethode
auch als umgekehrte indirekte Methode bekannt
Verfahren
Sekundärer Antikörper gegen IgM, beschichtet auf einem Festphasenträger
Fügen Sie die zu testende Probe hinzu
IgM kann von Festphasenträgern eingefangen werden
Spezifisches Antigen hinzufügen
Fügen Sie enzymmarkierte Antikörper zu bestimmten Antigenen hinzu
Bildung eines Festphasen-Sekundärantikörper-IgM-Antigen-Enzym-markierten Antikörperkomplexes
Anwendung
Antikörper vom IgM-Typ
Anwendung
extrazellulärer löslicher Adhäsionsfaktor
ELISA
Hauptmessmethoden
Chemilumineszenz-Immunoassay-Technologie
Prinzip
Kombination der hohen Empfindlichkeit der Lumineszenzanalyse mit der hohen Spezifität von Antigen und Antikörper
Markierte Immunoassay-Technologie zum Nachweis von Spurenmengen von Antigenen oder Antikörpern
Identisch mit Radioimmunoassay
Markierungsmethode
Carbodiimid-Kondensationsmethode
Kondensationsmittel
Carbodiimid
Natriumperiodat-Oxidationsmethode
Markierte Glykoproteine weisen eine gute Stabilität auf
Nicht leicht herunterzufallen
Diazoniumsalz-Kupplungsmethode
Einfach, kostengünstig und gute Wiederholbarkeit
N-Hydroxysuccinimid-Aktivierungsmethode
glühen
Grundzustand
Licht absorbieren
Springe in den aufgeregten Zustand
Rückkehr in den Grundzustand
Der Prozess der Freisetzung von Photonen
Gleiches Prinzip wie Fluoreszenz
Chemilumineszenzmittel
Typ
Direkter Chemilumineszenz-Immunoassay
Verwenden Sie Acridiniumester
in alkalischer Umgebung
Direkte Markierung von Antigenen (Antikörpern)
Es kommt zu einer Antigen-Antikörper-Reaktion
Chemilumineszenz-Enzymimmunoassay
Enzymmarker, die durch katalytische Reaktionen oder Energieübertragung an der Lumineszenz beteiligt sind
Verwenden Sie Meerrettichperoxidase oder alkalische Phosphatase
Markieren Sie Antigen oder Antikörper
Es kommt zu einer Antigen-Antikörper-Reaktion
Mikropartikel-Chemilumineszenz-Immunoassay
Markieren
alkalische Phosphatase
Elektrochemilumineszenz-Immunoassay
Beteiligen Sie sich an Oxidationsreaktionen durch Energieübertragung
Mit Rutheniumterpyridin markierter Antikörper (Antigen)
Tripropylamin
Elektronendonor (Elektronenakzeptor)
Im elektrischen Feld kommt es aufgrund der Elektronenübertragung zu einer spezifischen Chemilumineszenzreaktion auf der Elektrodenoberfläche.
Einschließlich zweier Prozesse: Elektrochemie und Chemilumineszenz
Vorteil
Ähnlich dem Radioimmunoassay
Aber keine Umweltverschmutzung
Hohe Sensitivität und starke Spezifität
ng oder sogar pg
Großer linearer Bereich
Marker ist stabil
Das Reagenz hat eine lange Gültigkeitsdauer und ist ungiftig
hoher Automatisierungsgrad
Anwendung
Hormone, Tumormarker, Arzneimittelkonzentrationen, Myokardmarker, virale Antikörper und andere Spuren biologischer Aktivitäten
Erkennung
kleine Menge
Biotin-Avidin-Verstärkungstechnologie
aktiviertes Biotin
Nutzung der Carboxylgruppe von Biotin
Verwenden Sie chemische Modifikationen, um Derivate verschiedener reaktiver Gruppen herzustellen
Nach der Aktivierung
Lässt sich leicht an entsprechende Gruppen in verschiedenen Antigenen, Antikörpern, Enzymen und Nukleinsäuremolekülen koppeln
biotinylierte Marker
Struktur
Ich klingele
Imidazol-Kupferring
Avidin: Tryptophan
II-Ring
Thiophenring
Bindet Antikörper und andere große Moleküle
Biotin (B)
Avidin (A)
hohe Affinität
Kombination von Geschwindigkeit, Spezifität und Stabilität
Avidin
Kreuzform
Biotin
Dreieck
Avidin hat vier Bindungsstellen und kann 4 Biotine binden
Es kommt also zu einer Verstärkungsreaktion
Beschriften Sie verschiedene Arten von aktiviertem Biotin
aktiviertes Biotin
Carboxylgruppen können nicht markiert werden
Weil es eine von ihm vorgenommene chemische Modifikation war
Anwendungen des Biotin-Avidin-Systems (BAS)
B: Biotin, A: Avidin, S: Amplifikation
Avidin-Markierungsmethode
Natriumperiodat-Methode
ABC-Methode
Prinzip
C: Die Bedeutung von Enzym
Biotin-Markierungsenzym
Biotin-bindendes Avidin
Mit biotinyliertem Antikörper konjugiertes Avidin
markierte Enzyme und Antikörper
Es ist alles Biotin
Avidin dient ausschließlich der Bindung von Biotin
gekoppelt mit ELISA
Verbessern Sie die Empfindlichkeit des ELISA erheblich
Das Enzym ist in markiert
auf Biotin
Festphasenmembran-Immunoassay
Häufig verwendete Festphasenmembranen
Nitrozellulosemembran (NC)
Kolloidales Gold
Antigen-Antikörper-Komplexe werden mit Goldpartikeln markiert
unter dem Mikroskop
Dunkelbraune Partikel
bloßes Auge
rote oder rosa Flecken
hCG
hCG erkennen
Test auf monoklonalen Antikörper mit kolloidalem Gold
Höchste Empfindlichkeit
hCG-Test während des Eisprungs
Um Kreuzreaktionen zu vermeiden
Monoklonaler Zweipunkt-Enzymimmunoassay
8-10 Wochen
Höhepunkt erreichen
hCG im Serum ist etwas höher als im Urin
Das einzige Hormon, dessen Sekretion mit zunehmendem Gewicht der Plazenta nicht zunimmt
Unterscheidung zwischen Molenschwangerschaft und normaler Schwangerschaft
Quantitativer hCG-Konzentrationstest
Einstufung
Dotted-Gold-Immunfiltrationstest
auf NC-Film
Flüssigkeit fließt senkrecht nach unten
Kolloidales Gold wie Lungenkleidung
Immunchromatographischer Dot-Gold-Assay
auf NC-Film
flüssiger horizontaler Fluss
wie Schwangerschaftsteststreifen
Enzyme-linked Immunospot-Test (ELISPOT)
Messbare B-Zellen
scheiden spezifische Antikörper aus
Auch die Antikörpersekretion kann gemessen werden
Messbare T-Zellen
Zytokin-sezernierende T-Zellen
Western-Blot/wb
Verfahren
drei Phasen
SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE)
Zonenelektrophorese
Elektrotransfer
unter Transferelektrophoresebedingungen
Übertragung auf Nitrozellulosemembran (NC-Membran)
Blot-Protein auf Festphasenmembran
Für das bloße Auge immer noch unsichtbar
Nachweis von Enzymreaktionen
Geblottetes Protein (entspricht einem mit Antigen beschichteten Festphasenträger)
Reagieren Sie mit spezifischen Antikörpern und enzymmarkierten Sekundärantikörpern
Zur Farbentwicklung Substrat hinzufügen
Umfangreiche SDS-PAGE und ELISA
Klinische Anwendung
HIV
Bestätigungstest
Nachweis von Antikörperbestandteilen
gp41/gp120/gp160 erscheint
zwei Streifen hinein
Wenn er stirbt, rufen Sie 120 an und es wird ihn nicht heilen. Er wird weglaufen.
gp120 bindet an CD4
Zerstöre CD4-T-Zellen
CD4/CD8
Das Verhältnis nimmt ab
Anti-extraktiver Antigen-Antikörper-Assay (ENA-Antikörper)
Southern-Blot
Blot-Methoden zum Nachweis von Nukleinsäuren
Immunhistochemie
Überblick
Immunhistochemie
markierte spezifische Antikörper
Tests zur Lokalisierung, Quantifizierung und qualitativen Identifizierung von Antigenen
Kann nur auf Antigen getestet werden
Probenquelle
lebendes Gewebe
Gewebeschnitte
Verschiedene Körperflüssigkeiten und Punktionsflüssigkeiten (Serum und Plasma sind nicht akzeptabel, da sie keine Zellen enthalten)
Abstriche und Abdrücke
Kultivierte Zellen
Live-Zellen-Objektträger
Der Zweck der Probenfixierung
Gerinnungsprotein
Beenden Sie die Wirkung intrazellulärer Enzyme
Autolyse verhindern
Behalten Sie die Form und Struktur der Zellen bei
Behalten Sie die Zellantigenität bei
Verhindern Sie, dass Zellschichten abfallen
Entfernen Sie Lipide, die die Bindung von Antikörpern verhindern
Bakterienwachstum hemmen
Korrosionsschutz
Immunhistochemischer Prozess
Antigenextraktion und -reinigung
Zu testendes Antigen
Immunisierung von Tieren und Zellfusion
Herstellung spezifischer Antikörper
Hybridom-Technologie
Antikörperreinigung
Konjugieren Sie Marker mit Antikörpern
Bilden Sie markierte Antikörper
Probenhandhabung und -vorbereitung
Primärreagenz
Antikörper
Monoklonale Antikörper
Da es nur Gewebe erkennen kann, muss es ein Antigen sein, also kann es nur Antigene erkennen
Schlüsselschritt
Immunfärbung
Immunfluoreszenz-Histochemie
Fluorescein-markierte Antikörper
Kann nur auf Antigen getestet werden
Merkmale
Kann mehrere Antigene gleichzeitig in Proben nachweisen
Vorteile im Vergleich zu enzymimmunhistochemischen Techniken
Während der Fluoreszenzmikroskopie-Beobachtung
Vorsichtsmaßnahmen
Beobachten Sie die Proben unmittelbar nach dem Färben
Es ist nicht ratsam, ein Sichtfeld über einen längeren Zeitraum zu beobachten
Verwenden Sie nicht fluoreszierendes Linsenöl
Beobachtung im Dunkelraum
Fehler
Bei 37℃ ist die Beobachtung am besten
Enzymimmunhistochemie
Verwenden Sie enzymmarkierte Antikörper (Antigene)
Antikörper und Antigene können gemessen werden
Einstufung
Enzymmarkierte Antikörper-Immunhistochemie-Technik
Identisch mit Enzymimmunoassay
Nicht markierte Antikörper-Immunenzym-Histochemie-Färbung-Enzym-Brückenmethode
Das Enzym ist nicht auf dem Antikörper markiert
Anti-Enzym-Antikörper als dritte Antikörper
Haben Sie einen Brückenantikörper als Sekundärantikörper?
Bildung eines Testantigen-spezifischen Antikörper-Brücken-Antikörper-Anti-Enzym-Antikörper-Komplexes
Enzymatische Färbung mit nicht markierten Antikörpern – PAP-Methode (Peroxidase-Anti-Peroxidase-Methode)
Der dritte Antikörper ist anders
Der dritte Antikörper (Anti-Enzym-Antikörper) und das Enzym bilden einen löslichen Komplex (PAP-Komplex).
Dieser Komplex besteht aus 2 Anti-Enzym-Antikörpern und 3 Peroxidase-Enzymen
fünfeckige Struktur
sehr stabil
Transplantationsimmunität
Einstufung
Autotransplantation
Das Transplantat stammt vom Wirt selbst
Keine Ablehnungsreaktion
syngene Transplantation
Transplantation zwischen genetisch identischen Individuen
Eineiige Zwillinge
Abstoßungsreaktionen treten im Allgemeinen nicht auf
allogene Transplantation
Transplantation zwischen Individuen derselben Art, aber mit unterschiedlichen Genotypen
Zielantigen, das eine Abstoßung verursacht
Haupthistokompatibilitätsantigen (MHA)
Haupthistokompatibilitätsantigen (MHA) des Haupthistokompatibilitätskomplexes (MHC) auf Chromosom 6
Auch bekannt als Humanes Leukozytenantigen (HLA)
Menschliches MHC=HLA
Einstufung
HLA I
HLA-A, HLA-B, HLA-C
Alle kernhaltigen Zelloberflächen
Die meisten Lymphozyten
Nervenzellen
kein Kern
HLA-C
Hat keinen signifikanten Einfluss auf den Transplantationsimmunprozess
HLA II
HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP
Verteilt in professionellen APC-Zellen, aktivierten T-Zellen und Thymusepithelzellen
Immunglobulin-ähnliche Domäne
α2- und β2-Funktionsdomänen
Antigen-Polypeptid-Bindungsregion
Funktionsdomänen α1 und β1
CD4-Bindungsregion
Funktionsbereich β2
HLA-DR
Am immunogensten
Am wichtigsten für die Abstoßung von Transplantaten
CDC-Methode zum Nachweis des HLA-DR-Antigens
Zu testende Zellen
gereinigte B-Zellen
Weil Klasse-II-Proteine auf der Oberfläche von B-Zellen und Makrophagen vorhanden sind (professionelle APCs)
Eine Beeinträchtigung der Klasse HLA-I wurde nicht ausgeschlossen
mit gereinigten B-Zellen
biologische Typisierung
PCR-RFLP
PCR-SSO
Die am weitesten verbreitete Methode zur HLA-Typisierung der Klasse II
PCR/SSP
Prinzip
Entwerfen Sie einen Satz sequenzspezifischer Primer (SSP) für HLA-Allele
PCR-Amplifikation der zu testenden DNA
erhalten
allelspezifische Amplifikationsprodukte
PCR-SSCP
SBT
Die genaueste und intuitivste Methode
muss
DNA-Isolierung der zu testenden Zellen
PCR-Amplifikation mit orts-, gruppen- oder allelspezifischen Primern
Reinigung und Sequenzierung amplifizierter Produkte
Vergleich der gemessenen Gensequenz mit der bekannten DNA-Sequenz der Genbank
HLA-Typisierungszytologie
negatives Tippen
Standardzellen
Homozygot typisierte Zellen mit nur einem LD-Antigen auf ihrer Oberfläche
positives Tippen
Standardzellen
präsensibilisierte Lymphozyten
Struktur und Funktion von MHC-Molekülen
MHC
Eine Gruppe eng verbundener Gene auf einem Chromosom, die für wichtige Histokompatibilitätsantigene kodieren
MHC-I
Tumorzellen können nur dann von Tc-Zellen abgetötet werden, wenn sie MHC-I exprimieren.
Blutplättchen exprimieren nur MHC-1
MHC-II
Wichtige Oberflächenmarker präsentierender Zellen (APCs)
B-Zellen können MHC der Klassen I und II exprimieren
Wird von CD4-T-Helferzellen erkannt
Schleife
Allotypische Epitope (polymorpher Teil von HLA-Klasse-II-Molekülen)
Antigene Peptidbindungsregion
Erkennen Sie CD4- und CD8-Moleküle
Ig-Probenbereich
Immunglobulinähnliche Region: β2-Domäne
Verankerung von HLA-Molekülen an der Zellmembran
Transmembranregion
und intrazelluläre Signalübertragung
Intrazelluläre Region (zytoplasmatische Region)
HLA-II
Antigen-Polypeptid-Bindungsregion
Funktionsdomänen α1 und β1
Immunglobulin-ähnliche Domäne
α2- und β2-Funktionsdomänen
CD4-Bindungsregion
Funktionsbereich β2
Faktoren, die den MHC-Polymorphismus bestimmen
MHC-Gene sind mehrere Allele
sind co-dominant
Identifikationsweg
direkter Identifikationsweg
Spender-APC
Spendertransplantationsantigen (MHC)
den T-Zellen des Empfängers präsentiert
indirekter Identifikationsweg
EmpfängerAPC
Spendertransplantationsantigen (MHC)
den T-Zellen des Empfängers präsentiert
Erkennung von Spender-MHC durch T-Zellen
erkanntes Molekül
sind Peptide, die von verarbeiteten Allotyp-MHC-Molekülen abgeleitet sind
Solange zwischen Spender und Empfänger ein Aminosäureunterschied besteht
Es kann zu einer Abstoßungsreaktion kommen
Typ
Host-versus-Graft-Reaktion (HVGR)
Ablehnung des Spenders durch den Empfänger
Transplantat-gegen-Wirt-Reaktion (GVHR)
Ablehnung des Empfängers durch den Spender
Host-versus-Graft-Reaktion (HVGR)
Einstufung
hyperakute Abstoßung
Innerhalb von Minuten bis 1-2 Tagen
Es kommt zu einer irreversiblen humoralen Abstoßung
Schnell, stark, irreversibel
humorale Immunantwort
Hauptsubstanz vermittelnd
Zytotoxische Antikörper (zytotoxische T-Zellen/Killer-T-Zellen/Tc-Zellen)
Grund
Personen mit inkompatiblem ABO und anderen Blutgruppen, inkompatiblen Rh-Blutgruppen, Mehrlingsschwangerschaften, wiederholten Bluttransfusionen oder Personen, die Organtransplantationen erhalten haben
Schlechte Durchblutung des transplantierten Organs oder übermäßige Ischämiezeit
Unsachgemäße Konservierung und Handhabung von Transplantaten
akute Ablehnung
Wochen bis Monate
häufigster Typ
Diagnose
sIL-2R- und Serumkreatininwerte stiegen gleichzeitig an
3H-TdR 4-Stunden-Einarbeitungsmethode
3H-TdR 4-Stunden-Zelltransformationstest
Methoden zum Nachweis sensibilisierter T-Zellen bei Empfängern
Ein zufriedenstellender Test zur Vorhersage einer akuten Ablehnungskrise
Unterscheidung zwischen akuter Abstoßung und Virusinfektion
1–5 Tage vor Auftreten klinischer Symptome
Erhöhtes CD4/CD8-Verhältnis
>1.2
Zeigt an, dass eine akute Abstoßung bevorsteht
Zytomegalievirus-Infektion
CD4/CD8-Abnahme
<1,08
Hohe Infektionsgefahr
chronische Ablehnung
Monate oder sogar Jahre
Die Krankheit schreitet langsam voran
Transplantat-gegen-Wirt-Reaktion (GVHR)
Knochenmarktransplantation
Wenn Sie keine immunsuppressive Behandlung erhalten
Abhängig von HLA-DR
Vor der Behandlung sind hochdosierte Strahlentherapie und Chemotherapie erforderlich, um alle Zellen im Knochenmark abzutöten.
eine Immunschwäche aufweisen
Zeig das
Es ist lediglich eine ABO-Blutgruppenanpassung erforderlich.
Das Knochenmark, das in den Körper des Empfängers gelangt, verfügt über eine große Anzahl von Immunzellen
Kann eine Immunantwort auf die Organe und Gewebe des Empfängers ausüben
Serologische HLA-Typisierung
Mikrokomplementabhängiger Zytotoxizitätstest (CDC)/Mikrolymphozytotoxizitätstest
HLA-I- und HLA-II-Typisierungsmethoden
Komplementabhängiger Zytotoxizitätstest
genetisch veranlagt
Nicht identifizierbar
HLA-DP
Zur Identifizierung ist eine zytologische HLA-Typisierung erforderlich
Identifizierung präsensibilisierter Zellen durch Zelltypisierung
Bekannte spezifische Anti-HLA-Standardtypisierungsseren
Bekannte Antikörper
Wenn als Anti-HLA-DR oder DQ gekennzeichnet
Verwendung von Blutplättchen zur Adsorption von HLA-I-Antikörpern
Mit den zu testenden Lymphozyten kombinieren
Zu testendes Antigen
Ergänzung hinzufügen
Zytologische HLA-Typisierung
Identifizierbares HLA-DP
Es werden Standardzellen verwendet
negatives Tippen
Homozygot typisierte Zellen mit nur einem LD-Antigen auf ihrer Oberfläche
positives Tippen
präsensibilisierte Lymphozyten
Zweifacher gemischter Lymphozytentest/gemischter Lymphozytentest
Stellen Sie fest, ob die HLA-Antigene von Spender und Empfänger kompatibel sind
Wenn die Menge der infiltrierten und transformierten Zellen am größten ist
Zeigt eine starke MLC-Positivität an
Zeigt eine vollständige Fehlpaarung des D-Antigens an
HLA-Typ kann nicht bestimmt werden
Prävention und Behandlung
HLA-Crossmatch
Lymphozyten-Kreuztest (Lymphozyten-Kreuztoxizitätstest)
Lymphozyten-Kreuztoxizitätstest
Zweck
Ob sich im Serum des Empfängers Antikörper gegen Spenderlymphozyten befinden
Spenderlymphozyten
Antikörper im Empfängerserum
Monophasische gemischte Lymphozytenreaktion zwischen Zellen des Empfängers und Zellen des mit Rhomycetin C behandelten Spenders
und Cross-Matching
Wie Hauptseite
behandeln
Allogene Anti-CD3-Antikörpertherapie
Wichtigste Komplikationen
Serumkrankheit
Tumorimmunität
Makrophagen
Infiltrierende Makrophagen in Tumorläsionen
und Tumorausbreitung und Metastasierung
negative Korrelation
Anti-Tumor-Wirkmechanismus
Töten Sie Tumorzellen über den ADCC-Weg ab
Tumorantigen
Neu aufgetreten oder während des Auftretens und der Entwicklung des Tumors überexprimiert
Antigene Substanzen
spezifische Klassifizierung
Tumorspezifisches Antigen (TSA)
Neoantigene, die für Tumorzellen spezifisch sind
Wird nur in Tumorzellen exprimiert
Fehlende und normale Gewebezellen
Melanom-assoziiertes Abstoßungsantigen
MARA
Prostata-spezifisches Antigen
PSAs
tumorassoziiertes Antigen
Nicht spezifisch für Tumorzellen
Auch normale Gewebe und Zellen exprimieren
Wenn Krebs auftritt
Der Inhalt hat deutlich zugenommen
alpha Fetoprotein
AFP
Anti-Tumor-Wirkmechanismus
zelluläre Immunität
Die wichtigste Rolle
T-Zellen, NK-Zellen, Makrophagen
Humoraler Immunmechanismus
Zytolytische Wirkung von Komplement
Antikörperwirkung
Antikörperabhängige zellvermittelte Zytotoxizität (ADCC)
Immunmodulatorische Phagozytose von Antikörpern
Antikörper blockieren bestimmte Rezeptoren auf der Oberfläche von Tumorzellen
Antikörper binden an Rezeptoren und blockieren die Signalübertragung in Tumorzellen
Antikörper stören die Adhäsion von Tumorzellen
Häufige Tumormarker
embryonale Antigene
Alpha-Fetoprotein (AFP)
primärer Leberkrebs
AFP>300ug/L
erheben
schwangere Frau
Neugeborenes
akute Hepatitis
primärer Leberkrebs
Dynamische AFP- und ALT-Kurven
Unterscheidung zwischen Leberkrebs und gutartiger Lebererkrankung (aktive Hepatitis)
dynamischer Kurvenfolger
gutartige Lebererkrankung
So hoch wie Sie wollen
dynamischer Kurvenseparator
Erhöhter AFP
ALT-Abnahme
Denken Sie an Leberkrebs
Karzinoembryonales Antigen (CEA)
Hat mehrere Isoformen
CEA-A, CEA-P, CEA-M usw.
Enthält komplexe antigene Determinanten und mehrere isomere Glykoproteine
Raucher
Leichter Anstieg
Darmtumoren
Darmkrebs, Mastdarmkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs
Zuckerkettenantigene
CA153
Brustkrebs
Willst du, dass ich sie berühre?
Brüste zum Anfassen
CA125
Eierstockkrebs
Willst du mich
Ein Sohn steht kurz vor der Geburt, also im Eierstock
Humanes Nebenhodenprotein 4 (HE4)
Neue Tumormarker
Eierstockkrebs
CA199
Magen-Darm-Tumoren
Willst du 99
Ich kann es nicht verdauen, es kostet 99
Bauchspeicheldrüsenkrebs
9 Von der Seite betrachtet sieht es aus wie eine Bauchspeicheldrüse
Bauchspeicheldrüsenkrebs, Gallenblasenkrebs, Darmkrebs, Magenkrebs
Plattenepithelkarzinom-Antigen (SCCA)
Plattenepithelkarzinom
Plattenepithelkarzinom des Ösophagus
Gebärmutterhalskrebs
Enzyme und Isoenzyme
Prostataspezifisches Antigen (PSA)
Prostatakrebs
organspezifische Tumormarker
f-PSA und f-PSA/t-PSA-Verhältnis
Unterscheidung zwischen Prostatakrebs und gutartigen Prostataerkrankungen
Sowohl t-PSA als auch f-PSA sind erhöht
f-PSA/t-PSA-Verhältnis
<10 %
Prostatakrebs ist wahrscheinlich
Prostatasäurephosphatase (PAP)
Prostatakrebs
Neuronenspezifische Enolase (NSE)
Kleinzelliger Lungenkrebs (Haferzellkarzinom)
a-L-Fucosidase (AFU)
primärer Leberkrebs
Hat nichts mit AFP zu tun
komplementäre Wirkung
Eine erhöhte AFU kann auch bei negativem AFP beobachtet werden
Hormone
Vanillyl-Mandelsäure (VMA)
Phäochromozytom
menschliches Choriongonadotropin
Trophoblasttumoren und Keimzelltumoren
Blasenmole, erosives Muttermal, Chorionkarzinom
Calcitonin
medullärer Schilddrüsenkrebs
adrenocorticotropes Hormon (ACTH)
Kleinzelliger Lungenkrebs (Haferzellkarzinom)
Eiweiß
β2-Mikroglobulin (β2-MG)
Malignität, Myelom, Lymphom, Nierenerkrankung
Weil β2-Mikroglobulin
Kommt auf der Oberfläche aller kernhaltigen Zellen vor
Ferritin
bösartige Tumoren, Entzündungen
Protein der Woche (BJP)
Multiples Myelom
Exprimiert das ABO-Blutgruppenantigen
Magenkrebszellen
Das kann nicht sein
Monosaccharid
Immunschwächekrankheit
primäre Immunschwächekrankheit
primärer B-Zell-Mangel
X-chromosomale Agammaglobulinämie
Gammaglobulin = Immunglobulin
Bruton-Syndrom
Fehlen von Mandeln
Häufige klinische Manifestationen
Konzept
Angeborene Agenesie von B-Zellen
Reduzierte oder defekte B-Zellen
Reduzierte oder mangelhafte Antikörper
Schwer im Knochenmark zu finden
Plasma Zelle
Normale Anzahl an T-Zellen
Bei dem Kind traten 6 Monate nach der Geburt (Vorschulkind) wiederkehrende Infektionen auf.
Aktuelle IgG- und sekretorische IgA-Resistenz innerhalb von 6 Monaten
selektiver IgA-Mangel
Die häufigsten humoralen Immundefizienzerkrankungen
Sowohl Serum-IgA als auch sIgA nahmen ab
Häufig begleitet von wiederkehrenden Infektionen des Verdauungstraktes und der Atemwege
in der Schleimhaut
Gammaglobulin-Ersatztherapie
ungültig
häufige variable Immunschwächekrankheit
B-Zell-Immunschwächekrankheit
Aufgrund einer fehlerhaften B-Zell-Funktion und einer abnormalen Signalübertragung
humorale Immunschwächekrankheit
Bruton-Syndrom
Primärer T-Zell-Mangel
angeborenes Thymushypoplasie-Syndrom
zelluläre Immunschwächekrankheit
DiGeorge-Syndrom
Oft begleitet von einer Nebenschilddrüseninsuffizienz
Anfälligkeit für Virus- und Pilzinfektionen
Denn weder die zelluläre noch die humorale Immunität funktionieren
Mangel an zellulärer Immunfunktion
Humorale Immunschwäche
Weil CD4-T-Zellen (Th-Zellen) benötigt werden
Eine embryonale Thymustransplantation ist wirksam
primäre Phagozytenmangelerkrankung
chronisches Granulom
Anomalien in der Anzahl, Bewegung oder Adhäsionsfunktion sowie der bakteriziden Aktivität von Phagozyten
Wiederkehrende Infektionen mit eitrigen Bakterien oder Pilzen
G-6-PD-Mangel kann dazu führen
Aufgrund des Mangels an G-6-PD verfügen Makrophagen über eine unzureichende Energieversorgung und eine verminderte Phagozytose- und Tötungsfähigkeit.
Neutrophile
Die Fähigkeit zur Chemotaxis nahm deutlich ab
Chediak-Higashi-Syndrom
Lasy-Leukozyten-Syndrom
Chronische Haut- und Schleimhautinfektion mit Candida albicans
Hauttest auf Candida albicans
Diabetes
brennen
normales Neugeborenes
Die phagozytische Fähigkeit ist deutlich reduziert
Komplement- oder Antikörpermangel
Verminderter Enzymstoffwechsel
chronisches Granulom
Die positive Rate des NBT-Tests stieg deutlich an
Septikämie
Komplementmangel
Defekt des C1-Hemmmoleküls
hereditäres Angioödem
wiederkehrende bakterielle Infektionen
kein Virus
Bei systemischem Lupus erythematodes und chronischer Nephritis
Nicht unbedingt
Schwerer kombinierter Immundefekt (SCID)
Der Patient entwickelte 6 Monate nach der Geburt Entwicklungsstörungen
Anfällig für schwere Infektionen und Tod
geschlechtsgebundene schwere kombinierte Immunschwächekrankheit
X-SCID
X-chromosomal-rezessive Vererbung
T-Zellen
fehlen oder erheblich reduziert sind
B-Zellen
Normal, aber dysfunktional
Verursacht eine verminderte Ig-Produktion und eine Typumwandlungsstörung
Adenosin-Desaminase-Mangel
Adenosin-Desaminase (ADA)-Mangel
autosomal-rezessive Vererbung
Prinzip
Ein Enzymmangel beeinträchtigt den Abbau von Adenosin und Desoxyadenosin
Verursacht große Mengen an Speicherung der Nukleotidmetaboliten dATP und dGTP
Toxische Wirkungen auf frühe T- und B-Zellen
Verursacht T-Zell- und B-Zell-Defekte
klinische Bedeutung
Nach der Säuglingsimpfung mit BCG-Impfstoff
Es kommt zu einer tödlichen und disseminierten Infektion
sekundäre Immunschwächekrankheit
Erworbenes Immunschwächesyndrom (AIDS)
AIDS
Infizieren
CD4-T-Zellen
hauptsächlich
Makrophagen
Dendritische Zellen
B-Zellen
Mikroglia im Gehirngewebe
Index
HIV-Antikörper positiv
Anfälligkeit für Pneumocystis carinii-Pneumonie
Umkehrung des CD4/CD8-Verhältnisses
Kaposi-Sarkom
Erhöhte B-Zellen und Immunglobuline
vorläufiger Screening-Test
ELISA-Methode
Bestätigungstest
Immunblotting
prüfen
Humoraler Immunoassay
Erkennung von B-Zell-Defekten
Zellulärer Immunoassay
Erkennung von T-Zell-Defekten
Hauttest
Antigen
Stoffe, die durch Kontakt in der natürlichen Umwelt leicht sensibilisiert werden
Tuberkulin
Candida albicans
Trichomycin
Streptokinase-Streptokinase (SK-SD)
Mumps Virus
prüfen
Gleichzeitiger Test mehrerer Antigene
Positiv
Positiver Hauttest für mehr als 3 Antigene
Kinder unter 2 Jahren
ein Antigen-Positiv
Negativ
Positiv für weniger als 2 Antigene
48 Stunden Reaktionsdurchmesser
<10mm
Hinweis
Immunschwäche oder verminderte Reaktionsfähigkeit
PHA-Stimulationstest
unspezifische zelluläre Immunfunktion
PHA-L: Phytohämagglutinin
PHA stimuliert die Lymphozytenproliferation und den Transformationstest
Bestimmen Sie die T-Zellfunktion
Lymphozytenproliferations- und Transformationstest
Neugeborenes eine Woche später
Es kommt zu einer PHA-Reizreaktion
Schließen Sie die Möglichkeit einer schweren zellulären Immunschwäche aus
AIDS
Befällt hauptsächlich CD4-Zellen (Helfer-T-Zellen Th)
gp120 bindet an das CD4-Rezeptorprotein
Vermindertes CD4/CD8-Verhältnis
Mangel an zellulärer Immunfunktion
Phagozytose-Mangelkrankheit
Intrazelluläre bakterizide Fähigkeit von Neutrophilen
Nitroblau-Tetrazolium (NBT)-Reduktionstest
Positiv deutlich erhöht
Septikämie
Chemotaxis-Funktionstest
Boyden-Kammer-Methode
Chemotaxis in einem kleinen Raum
Makrophagen-Phagozytose
Kohlenstoffpartikel-Clearance-Test
immunproliferative Erkrankung
Krankheiten, die durch eine abnormale Proliferation von Lymphozyten verursacht werden
Plasmazellkrankheit
Verursacht durch übermäßige Proliferation von Plasmazellen oder Ig-produzierenden B-Lymphozyten
Übermäßige Mengen im Serum oder Urin
monoklonales Immunglobulin
oder leichte oder schwere Kettenfragmente
Plasmozytom
Reduzierte IL-4-Synthese, Hemmung der B-Zell-Aktivierung und Hemmung der Fähigkeit zur APC-Antigenpräsentation
schwere Kettenkrankheit
Mutationen und abnormale Proliferation von Plasmazellen
kann nur produzieren
Schwere Kette des Immunglobulins oder defekte schwere Kette
Große Mengen im Serum oder Urin
Krankheiten, die durch freie schwere Ketten des Immunglobulins verursacht werden
bösartige Plasmazellerkrankung
Leichtkettenkrankheit
Mutierte Plasmazellen produzieren große Mengen abnormaler Leichtketten
Übermäßige Ablagerungen leichter Ketten in den Nieren und anderen viszeralen Geweben
Verursacht Nierenschäden und Amyloidose
Die Proteintypen der leichten Kette werden in Lambda-Typ und K-Typ unterteilt
Die Nephrotoxizität vom Lambda-Typ ist stärker
K-Typ-M-Proteinämie
K/λ-Typ-Verhältnis im Serum
>4:1
Einstufung
bösartige Plasmazellerkrankung
Multiples Myelom (MM)
Ein bösartiger Tumor, der durch eine abnormale Proliferation einer einzelnen Plasmazelllinie im Knochenmark gekennzeichnet ist
reife B-Zell-Tumoren
primäre Makroglobulinämie
schwere Kettenkrankheit
gutartige Plasmazellerkrankung
Primäre gutartige monoklonale Igämie
Sekundäre monoklonale HyperIgämie
klinische Manifestationen
Überlaufproteinurie/prärenale Proteinurie
=leichte Immunglobulinkette
=Urin-B-J-Protein/BJP/Wochenprotein/Agglutinin/Immunglobulin-Leichtkette
Monoklonale Plasmazellhyperplasie
Monoklonales Immunglobulin (M-Protein)
Hyperviskositätssyndrom
Steigende Blutsenkungsgeschwindigkeit
Harnprotein
Verstopfung der Nierentubuli
was zu einer Niereninsuffizienz führt
Plasmazellen dringen in das Knochenmark ein
Verursacht Zerstörung des Knochenmarks, Knochenschmerzen (am häufigsten) oder Brüche
Hyperkalzämie
Anämie, Infektion, Blutung, Immunschwäche
Weil normale Knochenmarkszellen nicht produzieren können
Labortests
Quantitativer Nachweis von Serum-Immunglobulin (M-Protein)
M-Protein
monoklonale Proliferation von Plasmazellen
Klasse, Unterklasse, Genotyp und Idiotyp homogen
Immunoglobulin
Keine Antikörperaktivität
Keine andere immunologische Aktivität
Häufiger in
Multiples Myelom, Hypergammaglobulinämie, malignes Lymphom, Erkrankung der schweren Kette, Erkrankung der leichten Kette
Erhöhte Gesamtproteinkonzentration und erhöhtes M-Protein
IgG ist am häufigsten
Erhöhtes IgA
vorläufiger Screening-Test
Einweg-Agar-Immundiffusion
Immunturbidimetrie
Nachweis des Leichtkettenproteins im Urin
Protein der Woche (BJP)
Leichte Kette von Immunglobulin (M-Protein).
Kondensin
vorläufiger Screening-Test
Verfahren zur thermischen Fällung und Auflösung
Unter der Bedingung eines PH: 4,9 ± 0,1
Auf 40-60℃ erhitzen
Es kommt zur Koagulation
Auf 90-100℃ erhöhen
wieder auflösen
Auf 56℃ reduzieren
Neu verfestigen
Kann im Blut negativ sein
Denn das Protein dieser Woche hat ein kleines Molekulargewicht
Leicht über die Nieren ausgeschieden
Serumzonenelektrophorese
verwenden
Zelluloseacetatmembran und Agarose-Elektrophorese
M-Proteinband
dichtes schmales Proteinband
in der R-Zone (manchmal in der Beta- oder A-Zone)
Die grundlegendsten, bevorzugten vorläufigen Screening- und qualitativen Testmethoden
Die Art des Immunglobulins kann nicht korrekt bestimmt werden
Immunelektrophorese
Wir können nur abschätzen, um welche Art von Ig es sich handelt.
Kann nicht bestätigt werden
Immunfixierungselektrophorese
Bestätigungstest für M-Protein
am häufigsten verwendete Methode
Qualitative und typisierende Identifizierung monoklonaler Antikörper
Bevorzugte Methode
Identifizierung von M-Protein-Leichtkettentypen
am häufigsten verwendete Methode
Unterthema
Autoimmunerkrankung
Basiskonzept
Immuntoleranz
auf die eigenen Gewebe- und Zellbestandteile
Keine Immunantwort
eine minimale Immunantwort erzeugen
Wirkt immunstabilisierend
Im normalen menschlichen Serum können Spuren von Autoantikörpern und sensibilisierten Lymphozyten vorhanden sein
selbstimmun
Die Immuntoleranz ist gestört
Erzeugen Sie eine Immunantwort auf Selbstkomponenten
Das Vorhandensein von Autoantikörpern oder sensibilisierten T-Lymphozyten
Autoimmunerkrankung
Autoantikörper oder sensibilisierte T-Lymphozyten können Immunantworten mit entsprechenden Eigenkomponenten hervorrufen
Schäden an Geweben und Organen oder Funktionsstörungen aufgrund einer Immunantwort
Einstufung
organspezifische Autoimmunerkrankungen
auf ein bestimmtes Organ oder Gewebe beschränkt
Chronische Thyreoiditis, Hashimoto-Thyreoiditis
Morbus Addison (primäre chronische Nebenniereninsuffizienz)
Myasthenia gravis, atrophische Gastritis
Idiopathische thrombozytopenische Purpura, autoimmunhämolytische Anämie
Spezifische Blutplättchen und rote Blutkörperchen
nicht organspezifische Autoimmunerkrankungen
Eine Gruppe von Krankheiten, die mehrere Gewebe, Organe oder Systeme befallen
Systemischer Lupus erythematodes (SLE), rheumatoide Arthritis (RA), Sjögren-Krankheit (SS)
Gemeinsames Merkmal
Die meisten Ursachen sind unbekannt
Es gibt keinen Anreiz, mehr zu werden
Spontaneität
Idiopathisch
Meistens Frauen
Mehr Frauen als Männer
Mehr alte als junge Menschen
genetisch veranlagt
Sensibilisierte T-Lymphozyten mit Autoantikörpern oder autologen Gewebezellen
Krankheiten können sich überschneiden
unheilbar
Abwechselnde Anfälle und Remissionen
Autoantigen
Freisetzung kryptischer Antigene
Sperma, Augeninhalt, Gehirn usw.
Wer nicht mit dem Immunsystem in Kontakt gekommen ist, weiß es nicht
Sympathische Ophthalmie
Ein Augapfel verletzt, Inhalt freigesetzt
Der Körper wird auch das andere gute Auge angreifen
Veränderungen in der eigenen Zusammensetzung
Denaturiertes IgG
Stimuliert den Körper zur Produktion von antidenaturierten IgG-Antikörpern (Rheumafaktor RF)
rheumatoide Arthritis
Kreuzreaktivität durch häufig vorkommende Antigene
rheumatisches Fieber
M-Protein in hämolysierenden Streptokokken der Gruppe A
Identisch mit Antigenen der endokardialen, Gelenk- und glomerulären Basalmembran
Kreuzreaktionen hervorrufen
akute Glomerulonephritis
rheumatisches Fieber
Häufige Autoimmunerkrankungen
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
II Überempfindlichkeitsreaktion
Myasthenia gravis
Autoantigen
Acetylcholinrezeptor
Mechanismus
Autoantikörper binden an Acetylcholinrezeptoren an der neuromuskulären Verbindung
Verinnerlicht und degradiert
Verursacht eine verminderte Reaktionsfähigkeit der Muskelzellen auf das von Motoneuronen freigesetzte Acetylcholin
Verursacht eine Schwäche der Skelettmuskulatur
Hyperthyreose (Morbus Basedow)
Autoantigen
Schilddrüsenstimulierender Hormonrezeptor (TSHR)
Antikörper gegen TSH-Rezeptoren
Mechanismus
diffuser giftiger Kropf
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ III
Systemischer Lupus erythematodes (SLE)
Autoantigen
Kernantigen
Nukleinsäuren, Nukleoproteine, Histone
Autoantikörper
antinukleäre Antikörper (ANA)
Mechanismus
Immunkomplexe werden darin abgelagert
Herz-Kreislauf-Bindegewebe, glomeruläre Basalmembran, Serosa, Gelenksynovia und kleine Blutgefäßwände von Organen
Komplement aktivieren
Neutrophile Infiltration anziehen
Merkmale
Kommt häufiger bei jungen Frauen vor
Kumulatives Multiorgan, Multisystem
Gesicht
Schmetterlingserythem
Haut
ringförmiges Erythem
Lichtempfindlichkeit, Fieber, Hautausschlag
Nierenschäden (Glomerulonephritis), Herz-Kreislauf-Erkrankungen
Anämie, psychiatrische Symptome
Arthralgie, Serositis
ergänzen
aktive Periode
aufgrund einer Überaktivierung
Pegel sinkt
Nach der Stabilisierung
erhöhte Reaktivität
Autoantikörper
antinukleäre Antikörper (ANA)
Die meisten Autoimmunerkrankungen verlaufen positiv
Wird hauptsächlich bei unbehandeltem SLE gefunden
Hauptsächlich IgG-Typ
Nicht organ- oder artspezifisch
Reagiert mit Zellkernen aller Tiere
Einstufung
Anti-DNA-Antikörper
Anti-Histon-Antikörper
Anti-Nicht-Histon-Antikörper
antinukleoläre Antikörper
Erkennung
indirekte Immunfluoreszenz
Anti-dsDNA-Antikörper
Anti-doppelsträngige DNA-Antikörper
Gehört zu den antinukleären Antikörpern (ANA)
Spezifische, charakteristische Antikörper
Häufiges Auftreten während aktiver Perioden
Methode
Trypanosoma equi oder Greenfly
Antigenmatrix
indirekte Immunfluoreszenz
Die spezifischste, empfindlichste und am häufigsten verwendete Methode
Anti-Sm-Antikörper
Signatur-Autoantikörper
Rheumatoide Arthritis (RA)
Autoantikörper
Typ
Rheumafaktor (RF)
Denaturiertes IgG-Fc-Segment
Autoantikörper gegen Zielantigene
Hauptsächlich IgM-Typ
IgA, IgG, IgE
Ein negatives Ergebnis schließt RA nicht aus
Antikeratin-Antikörper (AKA)
Anzeichen einer Prognose
hoher Titer
Der Zustand ist ernster
Antizyklische citrullinierte Antikörper (Anti-CCP-Antikörper)
Sehr spezifisch
Eine frühzeitige Diagnose kann positiv ausfallen
RF-Erkennungsmethode
Latexpartikel-Agglutinationstest
indirekte Methode
Kann nur IgM überprüfen
ELISA
RF für verschiedene Ig-Typen
Als auf den Festphasenträger aufgetragenes Antigen wird Kaninchen-IgG verwendet
Kombiniert mit der zu testenden Probe
Fügen Sie enzymmarkiertes Anti-Human-IgG, IgM, IgA bzw. IgE hinzu
RF als Brückenantigen
Sjögren-Syndrom (SS)
auch bekannt als
Sjögren-Syndrom
Besonderheit
Funktionsstörung der Sekretdrüsen
Trockenheit von Haut und Schleimhäuten
Am häufigsten sind Tränen- und Speicheldrüsen betroffen
Trockene Augen und Mund
eingeteilt in
primär
Kumulative Gewebe außer exokrinen Drüsen
Sekundär
Flag-Antikörper
Anti-SSA/Ro-Antikörper
Anti-SSB/La-Antikörper
Polymyositis (PM) und Dermatomyositis (DM)
Polymyositis
Hauptsächlich Muskelschäden
Dermatomyositis
Muskelschäden und Hautschäden
Flag-Antikörper
Jo-1
Ich trat mit den Füßen gegen meine Haut.
PM-1
Sklerodermie (Scl)
Systemische Krankheit
Progressive systemische Sklerose (PSS)
Leistung
Die Haut wird straffer und härter
Flag-Antikörper
Anti-Scl-70-Antikörper
Seien Sie hart zu Ihrer Frau (7)
Methode zum Nachweis der gesamten antinukleären Antikörper im Serum (Gesamt-ANA).
Indirekter Immunfluoreszenztest (IIF)
Antigen
HEp2-Zellen
Menschliche Kopfkrebszellen, reich an Kernbestandteilen
Reagiert mit getestetem Serum
Fügen Sie dann FITC-markiertes Anti-Human-IgG (Sekundärantikörper) hinzu.
Der effektivste
Fluoreszenzmuster und klinische Bedeutung
Homogener Typ
Hohe Potenz
Wird bei systemischem Lupus erythematodes (SLE) beobachtet
Peripherer/nuklearer Membrantyp
Hohe Potenz
Nur in SLE zu finden
Besonders während der aktiven SEL-Periode
Schnelle Krankheitsaktivität
Am gebräuchlichsten
gefleckter Typ
Gemischte Bindegewebserkrankung (MCTD)
gemischte Flecken
nukleolärer Typ
Sklerodermie (SCL)
Hartherzige Menschen
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ IV
T-Zell-Reaktionen auf Selbstantigene
durch autoreaktive T-Zellen vermittelt
Diabetes Typ 1
Das Vorhandensein autoreaktiver T-Zellen bei Patienten
CD8 CTL
Th1-Zellen
Gängige Autoantikörpertests
Anti-ENA-Antikörperprofil
ENA
Allgemeine Bezeichnung für extrahierbare zygogene Antigene
Erhältlich in Kochsalzlösung oder Phosphatpuffer
extrahieren Sie es
ANA kann das nicht
ENA-Antikörper
Hauptsächlich IgG
Erkennungsmethode
Immunblotting
klinische Bedeutung
Enthält keine Anti-Doppelstrang-DNA (Anti-dsDNA-Antikörper)
Weil es ANA gehört
Nachweis anderer Autoantikörper
Antineutrophile zytoplasmatische Antikörper (ANCA)
Vaskulitis
Zielantigen perinukleärer (pANCA) Antikörper
Myeloperoxidase (MPO)
Myeloid-spezifisch
Also rund um den Kern
Zielantigen zytoplasmatischer (cANCA) Antikörper
Protease-3 (PR3)
Antimitochondriale Antikörper (AMA)
Primäre biliäre Zirrhose (PBC)
Antiphospholipid-Antikörper (APLA)
Enthält Anticardiolipin-Antikörper (ACLA)
Hyperkoagulierbarer Blutzustand
Thrombose
ACLA
Frauen mit SLE entwickeln häufiger Blutgerinnsel
Während der Schwangerschaft kann es häufig zu Fehlgeburten kommen
Anti-Glattmuskel-Antikörper (ASMA)
Autoimmunhepatitis (AIH)
Indirekter Immunfluoreszenz-Assay (IIF).
als Substrat
Affenleberzellen
Nieren-, Magen- oder Lebergewebe der Ratte
Antithyreoglobulin-Antikörper (ATGA)
Hashimoto-Thyreoiditis (HT)
Anti-Parietalzell-Antikörper (PCA), Anti-Intrinsic-Faktor-Antikörper
atrophische Gastritis
perniziöse Anämie
Überempfindlichkeitserkrankung
Überempfindlichkeitsreaktion
Allergie
Nach erster Reaktion auf Sensibilisierung
antworte nochmal
physiologische Dysfunktion
Verlust von Gewebezellen
Abnormale Immunantwort
Immunabwehr
zu hoch
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
IgE-Antikörper vermittelt
Zytotropismus
bindet an Mastzellen
Sofortige Überempfindlichkeit/Anaphylaxie
ein paar Minuten
Prinzip
Produktion von allergenspezifischem IgE nach primärer Reaktion
Bindet an IgE-Fc-Rezeptoren auf Mastzellen
Sensibilisierung
Sensibilisierte Mastzelldegranulation während der erneuten Reaktion
Setzen Sie bioaktive Mediatoren frei
Histamin, Leukotriene
Ursache
Krampf der glatten Muskulatur
Hauptsächlich verursacht durch Leukotriene
Hauptstoffe, die Asthma bronchiale verursachen
Erhöhte Durchlässigkeit kleiner Blutgefäße
Erhöhte Sekretion der Schleimdrüsen
Empfindliche Nervenenden
Aktivierung von Eosinophilen
Die Hauptkomponenten, die an der Reaktion beteiligt sind
Allergene
bestimmte Medikamente
Penicillin
Inhalationsallergene
Pollen, Milben
Nahrungsmittelallergene
Milch, Garnelen
Erfordert die Beteiligung des Thrombozytenaktivierungsfaktors
Antikörper
IgE-Antikörper
Es können auch IgG-Subklassen auftreten
IgG4
Denn dadurch wird das Komplement nicht aktiviert
Überempfindlichkeit vom Typ I ohne Komplementbeteiligung
teilnehmenden Zellen
Mastzellen
Eosinophile
parasitäre Infektion
Kann erhöht werden
Basophile
Klinische Symptome
Formel
Typ-I-Schockasthma und Allergien
Milliarden:E:IgE
Systemisch
anaphylaktischer Schock
Verursacht durch Medikamente oder Injektion von heterogenem Serum
Wie Tetanus-Antitoxin, Diphtherie-Antitoxin
Penicillin-anaphylaktischer Schock
der Blutdruck sinkt
Verursacht durch vasoaktive Substanzen
Teleangiektasie
parasitäre Infektion
Lokalität
allergische Reaktion der Atemwege
Allergische Rhinitis und allergisches Asthma
Magen-Darm-allergische Reaktion
allergische Gastroenteritis
allergische Hautreaktion
Urtikaria, Ekzem, Angioödem
Verursacht funktionelle Schäden an Effektororganen
aber keine wesentlichen pathologischen Schäden
Überempfindlichkeitsreaktionen vom Typ I verursachen
IL3/IL5, IL4
Testmethode
Spezifitätstest
Intradermaler Allergentest
Zupfen, Kratzen, intradermale Injektion
intradermale Injektion
Hauttest wie Penicillin
Positive Kontrolle
Histaminhydrochlorid
falsch positiv
Eine große Anzahl hormoneller Medikamente
Falsch negativ
Wirkung von Antihistaminika
Verfahren
Mit einer Spritze wird der Allergenextrakt in die Haut injiziert
Antigen sollte entsprechend verdünnt werden
Injektionsvolumen
0,01–0,02 ml
Injektionsstelle
inneren Unterarm
Es ist nicht möglich, zu bluten oder subkutan zu injizieren
mehrere Allergene gleichzeitig
Abstand
2,5–5,0 cm
Äußerst misstrauisch und empfindlich
5,0 cm
20-30 Minuten, um die Ergebnisse zu beobachten
Erröten (Pricktest)
Quaddeln (intradermaler Test)
Spezifischer IgE (sigE)-Nachweis
Radioallergenadsorptionstest (RAST)
Verfahren
Adsorbieren Sie gereinigte Allergene auf festen Trägern
Zu testendes Serum hinzufügen
Geben Sie einen radioaktiv markierten Anti-IgE-Antikörper (Sekundärantikörper) ein.
Quantitativer Nachweis spezifischer IgE-Spiegel im Serum
Wie zum Beispiel eine Serumallergie
Tetanus-Antitoxin-Injektion erforderlich
Kleine und mehrfache Injektionen
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ II
Zytotoxisch oder zytolytisch
Gift vom Typ II, 23mygod
Zielzelloberflächenantigene binden an Antigene der IgG- oder IgM-Klasse
Unter Beteiligung von Komplement, Makrophagen und NK-Zellen
Hauptzutaten
Antikörper
IgG oder IgM
Komplementbeteiligung
Auflösung
teilnehmenden Zellen
Makrophagen
Opsonophagozytose
NK-Zellen
ADCC-Effekt
klinische Krankheit
Formel
Hyperthyreose, Muskelkraft, Hitze und Blutung
Transfusionsreaktion
hämolytische Erkrankung des Neugeborenen
Rh für schwangere Frauen (-), Rh für das erste Kind ( )
Verhindern Sie eine fetale Hämolyse in einer weiteren Schwangerschaft
Innerhalb von 72 Stunden nach Lieferung
Injektion von Anti-Rh-Antikörpern
Egal wie hoch die Geschwindigkeit ist
Autoimmune hämolytische Erkrankung (AIHA)
Arzneimittelallergische Zytopenie
Idiopathische thrombozytopenische Purpura (ITP)
Lungenblutungs-Nephritis-Syndrom (Goodpasture-Syndrom)
Hyperthyreose
(Morbus Basedow)
Myasthenia gravis
(MG)
akutes rheumatisches Fieber
(ARF)
Erkennung
Anti-Blutzell-Antikörpertest
Kann durch ABO-Antigen verursacht werden
Hier erfahren Sie alles über Blut
klinische Bedeutung
Hilft bei der Diagnose einer autoimmunhämolytischen Anämie
Anti-Rh-Antikörper
Hilft bei hämolytischen Erkrankungen bei Neugeborenen, die durch eine Inkompatibilität der Rh-Blutgruppe verursacht werden
Streptolysin O (ASO)
Streptokokken-Zellwand-M-Protein
Im Einklang mit Herz und Glomerulus
Daher werden diese kombiniert, um Schaden zu verursachen.
Streptokokkenbedingte Krankheiten
Pharyngitis
Mandelentzündung
Mittelohrentzündung
Scharlach
akute Glomerulonephritis
akutes rheumatisches Fieber
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ III
Immunkomplex
Mittelgroßer löslicher Immunkomplex (IC: IgG, IgM)
Lokale Ablagerung in der kapillaren Basalmembran oder an mehreren Stellen im Körper
Komplement aktivieren
Komplement verursacht Schäden an den Wänden der Blutgefäße
Und dann die Beteiligung von Blutplättchen, Basophilen und Neutrophilen induzieren
Stauung, Ödeme, lokale Nekrose
Neutrophile Infiltration
Das Hauptmerkmal einer Entzündungsreaktion
Speichermethode
Typ-III-Komplex, 23mygod, Dritte Plenarsitzung
Hauptzutaten
Antikörper
IgG, IgM
teilnehmenden Zellen
Neutrophile
Die stärkste Ursache für Gewebeschäden
Basophile
Mastzellen
Blutplättchen
Immunkomplex (IC), zirkulierender Immunkomplex (CIC)
Mittelgroßer löslicher Antigen-Antikörper-Immunkomplex
Krankheit
lokale Immunkomplexerkrankung
Arthus-Reaktion/Arthur-Reaktion
Experimentelle lokale allergische Reaktion
Mehrere subkutane Injektionen von Pferdeserum in Kaninchen
Nach 4-6 Injektionen
Lokale Ödeme, Blutungen und Nekrosen
Arthus-ähnliche Reaktion
Insulin
Wenn Sie Insulin injizieren, müssen Sie es daher an der Position des Patienten injizieren
Impfstoff
Antiserum-Injektion
systemische Immunkomplexerkrankung
Formel
Fenglang Nieren erfrischend A
A: Arthus-ähnliche Reaktion
Serumkrankheit
Der Beginn erfolgt 1–2 Wochen nach der Injektion von xenogenem Tierserum
Fieber, Hautausschlag, Lymphadenopathie, Gelenkschwellung und -schmerzen sowie vorübergehende Proteinurie
Sofortiger Schock
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ I
Poststreptokokken-Glomerulonephritis
Hämolytische Streptokokkeninfektion der Gruppe A
2-3 Wochen
Ablagerung auf der glomerulären Basalmembran
Immunkomplex-Nephritis
Rheumatoide Arthritis
Denaturiertes IgG
Anti-IgG-Autoantikörper = Rheumafaktor (RF)
Anti-IgG-Autoantikörper
Hauptsächlich IgM-Antikörper
Kommt in kleinen Gelenken vor
rheumatoide Arthritis
Kommt in großen Gelenken vor
systemischer Lupus erythematodes
DNA- und Anti-DNA-Antikörperkomplexe
Basalmembran von Blutgefäßen, die sich in den Nieren, Gelenken und anderen Körperteilen ablagern
Verursacht Glomerulonephritis, Arthritis und andere Schäden an mehreren Organen
Erkennung
Erkennung in der Organisation
Immunhistochemie
Nachweis von Immunkomplexen (CIC)
(CIC)
Einstufung
Antigenspezifische Methoden
Nicht-Antigen-spezifische Methoden
Wird oft klinisch verwendet
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ IV
Überempfindlichkeit vom verzögerten Typ (DTH)
Effektor-T-Zellen (CD4 Th1) (CD8 CTL)
Nach der Bindung an ein spezifisches Antigen
Eine entzündliche Reaktion, die durch die Infiltration mononukleärer Makrophagen und Gewebeschäden gekennzeichnet ist.
Hauptzutaten
Antigen
intrazelluläre Parasiten
Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Salmonella typhi
Es ist so traurig, nicht zu heiraten
Viren, Parasiten
Chemisches Material
Farbstoffe, Lacke, Pestizide, Kosmetika
Arzneimittel
Penicillin
Es kann auch eine Überempfindlichkeit vom Typ I auftreten
Zielzellen
Zellen, die Mycobacterium tuberculosis beherbergen
Transplantierte Zellen oder Organe
Tumorzellen
Protein, an das Hapten gebunden ist
teilnehmenden Zellen
Effektor-T-Zellen
CD4
Do1
CD8
CTL
Einkernige Makrophagen
Krankheit
infektiöse Überempfindlichkeitsreaktion vom verzögerten Typ
Infektion mit intrazellulären parasitären Erregern
Mycobacterium tuberculosis
Kavitäre Tuberkulose
Virus
Protozoon
Kontaktdermatitis
Exposition gegenüber niedermolekularen Haptensubstanzen
Abstoßung einer Transplantation
Wirt-versus-Transplantat-Reaktion
HVGR
Transplantat-gegen-Wirt-Reaktion
GHR
Erkennung
Prinzip des Hauttests
Intradermale Injektion, Hautpflaster
24-48h
Lokale Rötungen, Schwellungen, Verhärtungen, Blasen usw.
Zweck
Erkennung von Überempfindlichkeitsreaktionen vom Typ IV
Status der zellulären Immunfunktion
Tuberkulintest (OT)
Methode
4-8 Wochen nach der Infektion
erscheinen kann
Altes Tuberkulin (OT) oder gereinigtes Proteinderivat (PPD) von Mycobacterium tuberculosis
48-72h Beobachtung
Rötung, Schwellung oder Härte
>5mm
Positiv
Beurteilung der Ergebnisse
<5mm
Negativ
Dies bedeutet nicht, dass der Patient mit Tuberkulose infiziert ist
Weil Mycobacterium tuberculosis spät ausbricht
5-9/10-19mm
Positiv
Wurden mit Mycobacterium tuberculosis infiziert oder mit Bacillus Calmette-Guérin (BCG) geimpft
≥20 mm oder Blasen oder Nekrose
Stark positiv
Hohes Risiko, an Tuberkulose zu erkranken
Zweck
Wählen Sie BCG-Impfstoffempfänger aus
Tuberkulose-Infektion ausschließen
Verstehen Sie die Funktion der zellulären Immunität
Hautpflastertest
Mit Allergenlösung getränkte Gaze, die auf die Innenseite des Unterarms oder Rückens gelegt wird
Mit Zellophan oder Wachspapier abdecken
24-72h
Rötung, Schwellung, Blasen
Unterschied im Hauttest
infiltrative Pneumonie
Lungenfleckiger Schatten
Fieber, Husten, Blut im Auswurf
Diagnose
Säurefeste Bakterienkultur im Sputum
Tuberkulose diagnostizieren
Zusammenfassen
Formel
Typ I mit sofortigem Beginn, Typ II mit Gift, Typ III mit Komplex, IV mit verzögertem Beginn
Antikörper und Zellen
100 Millionen Düngemittel auf Säurebasis, 23mygod, die dritte Plenarsitzung des Zentralkomitees der KP Chinas, 4T-Zellen
Krankheit
Tippe I
Schockasthma und Allergien
Typ II
Hyperthyreose, Muskelkraft, Hitze und Blutung
Typ III
Fenglang Nieren erfrischend
Typ IV
Transplantat-Tuberkulose-Kontaktdermatitis
Infektionskrankheiten
bakterielle Infektion
Strep-Infektion
Grampositive Streptokokken
Streptococcus pyogenes
Gruppe A-beta-hämolytische Streptokokken
Testmethode
Latex-Agglutinationstest
Immunturbidimetrie
Häufig verwendete immunologische Marker
Antistreptolysin „O“
ASO
Höhe erhöhen
Akute Pharyngitis und andere Infektionen der oberen Atemwege
rheumatisches Fieber
Überempfindlichkeitsreaktion vom Typ III
rheumatische Myokarditis
rheumatoide Arthritis
Perikarditis
akute Glomerulonephritis
Salmonella typhi
Klinische Symptome
selbstheilende Gastroenteritis
Tödlicher Typhus (enterisches Fieber)
Testmethode
hypertrophe Reaktion
So fett, so traurig
Enzyme-linked Immunosorbent Assay
ELISA
Mycobacterium tuberculosis
TB
Testmethode
Tuberkulintest
Altes Tuberkulin (OT)
Tuberkulin-gereinigtes Proteinderivat (PPD)
Symbole der Tuberkuloseaktivität
Anti-PPD-Antikörper
Positiv
Virusinfektion
Influenza-Virus
Struktur
Hämagglutinin (HA)
Neuraminidase (NA)
Methode
Hämagglutinationshemmtest
Prinzip
Die Virussuspension wird mit dem zu testenden Serum (Antikörper) vermischt
Über entsprechende Antikörper verfügen
Kann die Bindung von Hämagglutinin auf der Oberfläche des Virus an rote Blutkörperchen hemmen
Wenn Sie rote Blutkörperchen hinzufügen, verbinden sich diese nicht mehr.
Keine Agglutination
Positiv
Coxsackie-Virus
Kann den Körper infizieren und das körpereigene Immunsystem stimulieren
Greifen die Betazellen der Bauchspeicheldrüse an
Diabetes verursachen
Hepatitis A
Erkennungsmethode
ELISA und Chemilumineszenz-Technologie
Nachweis von HAV-IgM und IgG
IgM
Diagnostizieren Sie eine aktuelle Infektion
frühe Infektion
IgG
Spätes Stadium der Infektion
vergangene Infektion
Hepatitis B
HBsAg (Oberflächenantigen)
erschien früher
HBsAb (Anti-HBs-Antikörper)
schützende Antikörper
HBeAg (e-Antigen)
Zeigt an, dass sich HBV in vivo aktiv repliziert
Sehr ansteckend
HBeAb (Anti-HBe-Antikörper)
Reduzierte Fähigkeit zur Replikation
Reduzierte Infektiosität
HBcAg (Kernantigen)
HBV ist vorhanden und repliziert sich aktiv
direkter Indikator
Schwer zu erkennen
HBcAb (Anti-HBc)
IgM
Hepatitis-B-Akutphase und frühe Infektion
IgG
vergangene Infektion
HBV-DNA
am empfindlichsten
am direktesten
chronisch aktive Hepatitis
klinische Manifestationen
Sie haben eine Vorgeschichte von chronischer Hepatitis
HBc-IgM-positiv
abnormale Leberfunktion
Schadensgen
extrahepatische Verletzung
Verursacht durch Ablagerung von Immunkomplexen
Zerstörungsmechanismus
CD8-Zellen verursachen eine Zelllyse, indem sie HBcAg und HLA-I erkennen, die auf der Leberzellmembran exprimiert werden
Fragen Sie nach einem Doppelserum
Zweck
Beobachten Sie, ob der Antikörpertiter in der Erholungsphase höher ist als im Anfangsstadium
angeborene Infektion
Infektionen, die der Fötus im Körper der Mutter erhält
zusammen TORCH genannt
4 Themen aus Eugenik und Bildung
Toxoplasma gondii (TOX)
Rötelnvirus (RUV)
Zytomegalievirus (HCMV)
Herpes-simplex-Virus (HSV)
Klinische Symptome
Abtreibung
Deformität
Geistige Behinderung, Hörbehinderung
parasitäre Infektion
Schistosoma-Infektion
Ring-Ei-Fällungsreaktion
Antigen-Antikörper-Reaktion
Sekretion reifer Miracidia innerhalb der Eier (um die Eier herum)
Bindet an Antikörper im menschlichen Serum
Bildung blasenförmiger, fingerförmiger, streifenförmiger spezifischer Ausscheidungen mit offensichtlichen Brechungseigenschaften
Positiv
Polyethylenglykol
Hybridom-Technologie
Fusionsagent
Immuntrübung
Trübungssteigerndes Mittel
Antigenreinigung
Methode zur Polymerfällung