Unidad estructural básica: aminoácido.

La muestra se calienta y se digiere con ácido sulfúrico concentrado y un catalizador para descomponer la proteína, en el que el carbono y el hidrógeno se oxidan en dióxido de carbono y el agua escapa, mientras que el nitrógeno orgánico de la muestra se convierte en amoníaco y se combina con ácido sulfúrico para formar. sulfato de amonio. Luego agregue álcali para destilar para evaporar el amoníaco, absorberlo con ácido bórico y luego titularlo con ácido estándar. El contenido de proteína en la muestra se puede calcular en función del consumo de ácido estándar.

Digestión: después del pretratamiento de la muestra, agregue ácido sulfúrico concentrado, sulfato de potasio (aumenta el punto de ebullición), sulfato de cobre (catalizador, indicador de punto final)

Destilación y absorción: agregue álcali (NaOH, 400 g/L), elimine el amoníaco con vapor y absorba con ácido bórico (20 g/L).

Titulación: 0,05 mol/L de ácido estándar o ácido sulfúrico (la solución cambia de azul a rojizo)

Procesamiento de datos (proteína cruda)

El resultado es proteína cruda.

Adecuado para valor F

Se debe utilizar exceso de ácido sulfúrico para evitar el exceso de amoníaco.

Se condensan dos partes de urea en biuret a 180°C y reaccionan con sulfato de cobre en un ambiente alcalino para formar un complejo de color rojo púrpura.

Solución de proteína estándar

Coomassie G-520 se une a las proteínas para formar un complejo coloreado con un pico de absorción máximo a 595 nm.

Solución estándar: solución estándar de albúmina sérica bovina

Los aminoácidos contienen -COOH ácido y -NH2 básico, que interactúan para convertir el aminoácido en una sal interna neutra. Cuando se agrega formaldehído, -NH2 se combina con formaldehído y su alcalinidad desaparece, lo que hace que el grupo -COOH muestre acidez. Utilizado Titulación de soluciones estándar.

De acuerdo con el efecto anfótero de los aminoácidos, se agrega formaldehído para fijar la alcalinidad del grupo amino y hacer que el grupo carboxilo muestre acidez. Inserte el electrodo de vidrio y el electrodo de calomel del acidómetro en el líquido a medir al mismo tiempo para formar. una batería Utilice una solución estándar de NaOH para valorar según las instrucciones del acidómetro. El valor del pH determina el punto final.

Ninhidrina → Hidrato de ninhidrina → Hidrato de ninhidrina → Hidrato de ninhidrina → Compuesto azul-violeta