마인드 맵 갤러리 PCR 기술의 원리와 응용
Molecular Biology, Human Health 9th Edition, PCR(Polymerase Chain Reaction): 특정 DNA 단편을 증폭시키는 데 사용되는 분자생물학 기술입니다. 이는 유기체 외부의 특수한 DNA 복제로 간주될 수 있습니다.
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속씨식물 분류 시스템(APG IV)
생태계 조사
RNA 합성
DNA 손상 및 손상 복구
세포 신호 전달의 분자 메커니즘
유전자 진단
유전자 발현 조절
단백질 합성
DNA 복제의 효소학 및 토폴로지
진핵 DNA 복제 과정
PCR 기술의 원리와 응용
개념
PCR(Polymerase Chain Reaction): 특정 DNA 단편을 증폭시키는 데 사용되는 분자생물학 기술로 유기체 외부의 특수한 DNA 복제라고 볼 수 있습니다.
특징
매우 민감함
높은 특이성
높은 수율
반복 가능
빠르고 쉽게
샘플에 대한 낮은 요구 사항
작동 원리
PCR 시스템
템플릿 DNA
특정 프라이머(업스트림 및 다운스트림 프라이머)
dNTP
열안정성 DNA 중합효소(예: taq DNase)
mg² 완충액 함유
증류수
PCR의 기본 반응 단계
①성전환
반응 시스템을 95°C로 가열하여 주형 DNA를 단일 가닥으로 완전히 변성시키는 동시에 프라이머 자체와 프라이머 사이의 국소 이중 가닥도 제거됩니다.
②어닐링
프라이머가 주형 DNA에 결합할 수 있도록 온도를 적절한 온도(일반적으로 Tm보다 5°C 낮음)로 낮추십시오.
③확장
온도를 72°C로 올리고 DNA 중합효소는 dNTP를 기질로 사용하여 DNA 합성 반응을 촉매합니다.
PCR 산물 분석 방법
①전기영동분석
②효소소화분석
③혼성화 분석
④서열분석
⑤ 고성능 액체 크로마토그래피 분석
PCR 기술의 주요 용도
① 목적 유전자 단편을 획득한다
②DNA, RNA의 미세분석
③DNA 염기서열 분석
④ 유전자 돌연변이 분석
⑤유전자의 시험관 내 돌연변이
일반적으로 사용되는 PCR 기술
①역전사 PCR 기술
②In situ PCR 기술
③정량적 PCR(실시간 PCR 기술)