ソース

特徴

ソース

特徴

プラスミド: 真核細胞の核または原核細胞の核様体 DNA から独立しており、自己複製能力を持つ、裸の単純な構造の環状二本鎖 DNA 分子。

濾過後、冷却/遠心分離し、上清を採取します。

95%アルコール溶液を加えると溶液中に白い糸状の物体が現れる → 丸めてガラス棒で遠心分離し、沈殿を取り出し乾燥する

ジフェニルアミン試薬を使用した識別 - 沈殿物/フィラメントが青色に見える

レシピエント細胞の性質を変化させたり、期待される発現産物を得るために使用される遺伝子など。

生物学的ストレス耐性、高品質、医薬品の生産、非毒性分解および工業用酵素に関連

Bt 耐虫性タンパク質遺伝子 - バチルス・チューリンジエンシスによって生成されるバチルス・チューリンジエンシス伴細胞結晶タンパク質に由来し、ワタボウシを殺すことができます。

構造が既知で機能が明らかな関連遺伝子の中から、適切な標的遺伝子をスクリーニング

半保存的DNA複製の原理に基づいて、DNA複製に関わる様々な成分や反応条件を試験管内に提供し、目的遺伝子の塩基配列を大規模に複製する技術。

高温

DNA親鎖

dNTP

DNAポリメラーゼ

プライマー

ATP

ヘリカーゼ

娘鎖の 5' 末端から 3' 末端まで伸ばす

性転換者

復元

伸ばす

RNA ポリメラーゼが認識して結合し、遺伝子を mRNA に転写する部位

希望の位置で転写を停止します

レシピエント細胞に標的遺伝子が含まれているかどうかを識別し、標的遺伝子を含む細胞をスクリーニングします

逆転写によって生成される標的遺伝子にはイントロン、プロモーター、ターミネーターがないため、原核細胞のRNAポリメラーゼは真核遺伝子のプロモーター配列を認識できません。

方法

ステップ

圧縮ガスによって発生する力を利用して、金属粒子の表面に包まれた発現ベクターDNAを受容体に打ち込み、目的の遺伝子を組み込んで発現させます。

マイクロインジェクションは、動物の受精卵にマイクロインジェクターを用いて目的の遺伝子を注入し、メスの動物の卵管や子宮に移植することで、新たな形質を持った動物に成長させます。

細胞を Ca2+ で処理してコンピテントセルにし、周辺環境の DNA 分子を吸収して形質転換を完了します。

PCR技術は、標的遺伝子がレシピエント細胞の染色体に挿入されているかどうかを検出します。

PCR技術は、標的遺伝子がmRNAに転写されたかどうかを検出します

抗原抗体ハイブリダイゼーション技術により、標的遺伝子が特定のタンパク質に翻訳されるかどうかを検出します

遺伝子欠損ウイルスを体内から分離 → 体外で形質転換・増幅 → 体内（リンパ球）に移入

正常な遺伝子を搭載したベクターを患者の組織細胞（肺組織）に直接導入します。