Mediciones microbiológicas
Método de dilución en placa: dilución de la muestra de suelo - agitación - dilución en gradiente - cultivo (vierta el medio de cultivo y extiéndalo - método de recubrimiento; vierta el líquido bacteriano en el medio de agar y mézclelo - método de vertido)
Método de vertido: Se pueden separar bacterias aeróbicas y anaeróbicas.
Método de recubrimiento: Utilice 1 ml de recubrimiento para aislar actinomicetos.
Pregunta: ¿Por qué no se puede utilizar demasiada solución bacteriana en el método de recubrimiento?
Respuesta: Para separar y contar, agregamos demasiado líquido y los mezclamos. Deberíamos usar 0,1 ml.
El método de rayado en placa (rayado de tres zonas) requiere quemar y esterilizar la primera raya, y luego dibujar nuevamente, con el objetivo de formar una sola colonia. Una sola colonia se llama colonia pura.
Problema: Las colonias bacterianas puras parecen tener la misma forma, pero las funciones metabólicas de las bacterias del interior no son muy buenas. En la industria de la fermentación que utiliza colonias individuales, las características metabólicas cambiarán y las bacterias con baja productividad pueden convertirse en bacterias dominantes. . ¿Cómo restablecer una alta productividad en esta situación?
Respuesta: La mayoría de las bacterias de la muestra son bacterias en declive y una pequeña cantidad de bacterias con buenas funciones metabólicas. Utilice cultura selectiva. Si las muestras se degradan esta vez y no hay bacterias buenas, utilice el método de mutagénesis (las condiciones de temperatura, luz, agua y vapor: mutagénesis ultravioleta) para rejuvenecer las bacterias.
Método de separación indirecta: medición de microorganismos, así como métodos de índice fisiológico y métodos turbidimétricos.
Pregunta: ¿En qué situaciones es mejor utilizar el método de turbidez?
Respuesta: Las bacterias translúcidas (bacterias, levaduras) que se hunden hasta el fondo no son fáciles de usar. Las bacterias que se dispersan después del crecimiento son fáciles de usar, las bacterias que mueren después del crecimiento no son fáciles de usar y las bacterias que crecen formando aglomerados no son fáciles de usar. Si es moho, mirar la cantidad de micelio, secar el micelio y medir el peso.
El patrón de crecimiento de los microorganismos.
periodo lento
Características: La tasa de crecimiento constante es cero, las bacterias son espesas, el contenido de ARN aumenta, la actividad metabólica es fuerte y la resistencia a ambientes adversos se reduce.
Causa: El microorganismo acaba de ser inoculado en el medio de cultivo y su sistema metabólico necesita adaptarse al nuevo entorno y sintetizar enzimas, coenzimas y otros metabolitos metabólicos intermedios, por lo que el número de células no aumenta durante este período.
Periodo logarítmico
Características: la tasa de crecimiento más rápida, el metabolismo vigoroso, el sistema enzimático activo, la cantidad de bacterias viables y la cantidad total de bacterias son aproximadamente similares, y la composición química, la morfología y las propiedades físicas y químicas de las células son básicamente las mismas.
Causa: Después de la preparación del período de adaptación, se proporciona suficiente base material para el crecimiento de microorganismos durante este período y el ambiente externo también está en las mejores condiciones.
periodo estable
Características: La cantidad de bacterias viables permanece relativamente estable, la cantidad total de bacterias alcanza el nivel más alto, la acumulación de metabolitos celulares alcanza el pico más alto, es el período de cosecha de producción y Bacillus comienza a formar esporas.
Causa: El consumo de nutrientes provoca proporciones de nutrientes desequilibradas, acumulación de metabolitos nocivos y condiciones físicas y químicas inadecuadas, como el valor de PH y el valor de EH.
período de declive
Características: La tasa de mortalidad de las bacterias es mayor que la tasa de nueva generación, toda la población experimenta un crecimiento negativo, las células comienzan a deformarse y la muerte celular se produce con autólisis.
Causa: La razón principal es que el ambiente externo se vuelve cada vez más desfavorable para el crecimiento continuo y el catabolismo de las células es mayor que el anabolismo, lo que a su vez conduce a la muerte de una gran cantidad de bacterias.
Fermentación láctica y fermentación alcohólica.
La fermentación del ácido láctico se produce tanto en microorganismos animales como en la fermentación alcohólica vegetal. Cuando corremos como locos, producimos una gran cantidad de ácido láctico, y la tolerancia al ácido láctico de una persona determina qué tan rápido o lento corre. El ácido láctico y el piruvato se convierten entre sí. El chucrut del noreste, el kimchi coreano y el repollo picante contienen lactobacilos. Bacterias de ácido láctico resistentes a los ácidos y a la bilis. Los hongos producen ácido láctico y tienen lactato deshidrogenasa, y algunas células cancerosas pueden usar ácido láctico. Si la lactato deshidrogenasa de una persona no es buena, el ácido láctico no se degradará y se producirá acidosis láctica. Análisis: La lactosa se convierte en ácido láctico mediante la β-galactosidasa. E. coli tiene esta enzima en el intestino. Esta enzima en humanos es inducida. Además de las enzimas inducibles, también existen genes de mantenimiento: las enzimas constitutivas.
Pregunta: ¿Por qué un compañero de clase podía beber leche cuando era niño, pero de repente no podía beberla en la escuela secundaria?
Respuesta: Los oligosacáridos de la leche humana eliminarán las bacterias beneficiosas cuando el cuerpo se ha adaptado a otras fuentes nutricionales, por lo que puedes hacerlo todos los días.
Pregunta: ¿Por qué el chucrut no se pudre?
Respuesta: Las bacterias del ácido láctico sólo descomponen el azúcar y no la celulosa.
Pregunta: ¿Cuáles son las cepas bacterianas del yogur, como Bifidobacterium, etc., cuáles son las diferencias entre estas bacterias?
Curva de crecimiento, tome un ejemplo, diseñe un experimento, ¿cómo dibujar una curva de crecimiento? Si puedes diseñar experimentos de esta manera, podrás convertirte en un estudiante de posgrado.
La curva de crecimiento es el logaritmo de la cantidad de bacterias, porque las bacterias crecen exponencialmente. El primer paso es adaptarse al medio ambiente: la fase de retraso, y luego ingresar a la fase de crecimiento logarítmico después de la adaptación (el ciclo de crecimiento bacteriano es el mismo, lo cual es muy raro, y existe un cierto mecanismo entre las bacterias para informarse entre sí) ¿Por qué entra en la fase estable después de la fórmula de espera?
Después de 10 vacunaciones y un retraso de 1 hora, se detectaron 320. ¿Cuánto tiempo llevará? El número de bacterias no aumenta durante el período de retraso y al final se reduce en 1.
Pregunta: Si obtenemos una cepa de bacteria del ácido láctico que puede resistir el oxígeno y sobrevivir en el cuerpo humano durante mucho tiempo, ¿qué debemos hacer si la empresa nos pide que consigamos esta cepa de bacteria, que involucra las leyes de crecimiento y reproducción? ?
Pregunta: El jefe preguntó en qué punto de la curva de crecimiento recolectar esta bacteria.
Respuesta: El punto antes del período estacionario y después del período logarítmico.
Pregunta: ¿La empresa quiere producir medicamentos o enzimas?
Respuesta: Tiene que ser un punto después del período estable y antes del período de declive.
Pregunta: Si se diluye hasta cierto nivel y las bacterias ya no crecen, pero el examen microscópico muestra que las bacterias todavía están allí, ¿seguirán creciendo las bacterias si el medio se reemplaza con un medio particularmente bueno? Generando dudas, ¿significa que si se diluye en una célula, ya no crecerá?
Respuesta: Subestimamos la cantidad de bacterias examinadas.
Pregunta: Si se cultivan microorganismos, ¿cómo realizar investigaciones relevantes y cómo medir el número y el tamaño? ¿Cómo se mide la reproducción microbiana?
Respuesta: recuento directo (microscopio, recuento de levaduras viables con tinción de Meilan), recuento indirecto (las especies puras que se pueden cultivar pueden utilizar el método de placa de dilución y la muestra es una mezcla de bacterias), método gravimétrico.
Combinar teoría con práctica: ¿una tarea, detectar qué microorganismos del suelo están relacionados con secretos nacionales?
Respuesta: Hay centros de recolección de cepas en el mundo y el comercio entre instituciones no implica secretos de estado. Si vas a Xinjiang y al Tíbet en mi país para pedir muestras de suelo, no hay unidades de investigación científica, por lo que puede ser espionaje. El 99% de los recursos microbianos del suelo tienen funciones poco claras. Si se utilizan correctamente, son recursos muy grandes.
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