Misure microbiologiche
Metodo della piastra di diluizione: diluizione del campione di terreno - agitazione - diluizione con gradiente - coltura (versare il terreno di coltura e distribuirlo - metodo di rivestimento; versare il liquido batterico nel terreno di agar e miscelarlo - metodo di versamento)
Metodo di versamento: è possibile separare sia i batteri aerobici che quelli anaerobici.
Metodo di rivestimento: utilizzare 1 ml di rivestimento per isolare gli attinomiceti.
Domanda: Perché non è possibile utilizzare troppa soluzione batterica nel metodo di rivestimento?
Risposta: Per separare e contare, abbiamo aggiunto troppo liquido e li abbiamo mescolati insieme. Dovremmo usare 0,1 ml.
Il metodo dello striscio su piastra (striscio a tre zone) richiede la masterizzazione e la sterilizzazione della prima striscia, quindi il successivo prelievo, con l'obiettivo di formare un'unica colonia. Una singola colonia è detta colonia pura.
Problema: le colonie batteriche pure sembrano avere la stessa forma, ma le funzioni metaboliche dei batteri all'interno non sono molto buone. Nell'industria della fermentazione che utilizza colonie singole, le caratteristiche metaboliche cambieranno e i batteri con bassa produttività potrebbero diventare batteri dominanti . Come ripristinare un'elevata produttività in questa situazione?
Risposta: La maggior parte dei batteri presenti nel campione sono batteri in declino e un piccolo numero di batteri con buone funzioni metaboliche. Usa la cultura selettiva. Se questa volta i campioni sono degradati e non sono presenti batteri buoni, utilizzare il metodo della mutagenesi (le condizioni di temperatura, luce, acqua e vapore: mutagenesi ultravioletta) per ringiovanire i batteri.
Metodo di separazione indiretto: misurazione dei microrganismi, nonché metodi con indicatori fisiologici e metodi turbidimetrici.
Domanda: In quali situazioni è meglio utilizzare il metodo della torbidità?
Risposta: Traslucidi (batteri, lieviti), i batteri che affondano sul fondo non sono facili da usare. I batteri che si disperdono dopo la crescita sono facili da usare, i batteri che muoiono dopo la crescita non sono facili da usare e i batteri che crescono formando agglomerati non sono facili da usare. Se è muffa, guarda la quantità di micelio, asciuga il micelio e misura il peso.
Il modello di crescita dei microrganismi
periodo lento
Caratteristiche: la costante del tasso di crescita è zero, i batteri sono spessi, il contenuto di RNA è aumentato, l'attività metabolica è forte e la resistenza agli ambienti avversi è ridotta.
Causa: il microrganismo è stato appena inoculato nel terreno di coltura e il suo sistema metabolico deve adattarsi al nuovo ambiente e sintetizzare enzimi, coenzimi e altri metaboliti metabolici intermedi, quindi il numero di cellule non aumenta durante questo periodo.
Periodo logaritmico
Caratteristiche: il tasso di crescita più rapido, il metabolismo vigoroso, il sistema enzimatico attivo, il numero di batteri vitali e il numero totale di batteri sono più o meno vicini e la composizione chimica, la morfologia e le proprietà fisiche e chimiche delle cellule sono sostanzialmente le stesse.
Causa: Dopo la preparazione del periodo di adattamento, durante questo periodo viene fornita una base materiale sufficiente per la crescita dei microrganismi e anche l'ambiente esterno è nelle migliori condizioni.
periodo stabile
Caratteristiche: il numero di batteri vitali rimane relativamente stabile, il numero totale di batteri raggiunge il livello più alto, l'accumulo di metaboliti cellulari raggiunge il picco più alto, è il periodo di raccolta della produzione e il bacillo inizia a formare spore.
Causa: il consumo di sostanze nutritive porta a proporzioni squilibrate dei nutrienti, accumulo di metaboliti dannosi, condizioni fisiche e chimiche inadeguate come valore PH e valore EH.
periodo di declino
Caratteristiche: il tasso di morte dei batteri è maggiore del tasso di nuova generazione, l'intera popolazione sperimenta una crescita negativa, le cellule iniziano a deformarsi e la morte cellulare avviene con l'autolisi.
Causa: Il motivo principale è che l'ambiente esterno diventa sempre più sfavorevole alla crescita continua e il catabolismo delle cellule è maggiore dell'anabolismo, che a sua volta porta alla morte di un gran numero di batteri.
Fermentazione lattica e fermentazione alcolica
La fermentazione dell'acido lattico avviene sia nei microrganismi animali che nella fermentazione alcolica vegetale. Quando corriamo come un matto, produciamo molto acido lattico e la tolleranza all'acido lattico di una persona determina quanto velocemente o lentamente corre. L'acido lattico e il piruvato vengono convertiti l'uno nell'altro. I crauti nordorientali, il kimchi coreano e il cavolo piccante contengono tutti batteri lattici. Batteri lattici acido-resistenti e bile-resistenti. I funghi producono acido lattico e hanno lattato deidrogenasi e alcune cellule tumorali possono utilizzare acido lattico. Se la lattato deidrogenasi di una persona non è buona, l'acido lattico non verrà degradato e si verificherà acidosi lattica. Analisi: il lattosio viene convertito in acido lattico utilizzando la β-galattosidasi nell'intestino. Questo enzima negli esseri umani è indotto. Oltre agli enzimi inducibili, esistono anche i geni housekeeping: gli enzimi costitutivi.
Domanda: Perché un compagno di classe era in grado di bere il latte da bambino, ma improvvisamente non poteva più berlo al liceo?
Risposta: Gli oligosaccaridi del latte umano eliminano i batteri benefici. L'intolleranza al lattosio si verifica quando il corpo si è adattato ad altre fonti nutrizionali, quindi puoi farlo ogni giorno.
Domanda: perché i crauti non marciscono?
Risposta: i batteri lattici decompongono solo lo zucchero e non la cellulosa.
Domanda: Quali sono i ceppi batterici presenti nello yogurt, come il Bifidobacterium, ecc., quali sono le differenze tra questi batteri?
Curva di crescita, fai un esempio, progetta un esperimento, come disegnare una curva di crescita? Se riesci a progettare esperimenti in questo modo, puoi diventare uno studente laureato.
La curva di crescita è il logaritmo della quantità di batteri, perché i batteri crescono in modo esponenziale. Il primo passo è adattarsi all'ambiente - la fase di latenza, e poi entrare nella fase di crescita logaritmica dopo l'adattamento (il ciclo di crescita batterica è lo stesso, il che è molto raro, e c'è un certo meccanismo tra i batteri per informarsi a vicenda) Perché entra nella fase stabile dopo la formula di attesa?
Dopo 10 vaccinazioni e un periodo di ritardo di 1 ora ne sono state rilevate 320. Quanto tempo ci vorrà? Il numero di batteri non aumenta durante il periodo di ritardo e alla fine viene ridotto di 1.
Domanda: Se otteniamo un ceppo di batteri lattici in grado di resistere all'ossigeno e sopravvivere a lungo nel corpo umano, cosa dovremmo fare se l'azienda ci chiede di ottenere questo ceppo di batteri, che coinvolge le leggi della crescita e della riproduzione ?
Domanda: Il capo ha chiesto in quale punto della curva di crescita raccogliere questo batterio?
Risposta: Il punto prima del periodo stazionario e dopo il periodo logaritmico.
Domanda: L'azienda vuole produrre farmaci o enzimi?
Risposta: deve essere un punto dopo il periodo di stabilità e prima del periodo di declino.
Domanda: Se viene diluito ad un certo livello e i batteri non crescono più, ma l'esame microscopico mostra che i batteri sono ancora presenti, i batteri cresceranno ancora se il terreno viene sostituito con un terreno particolarmente buono? Sollevando dubbi, significa che se viene diluito in una cellula non crescerà più?
Risposta: Abbiamo sottostimato il numero di batteri esaminati.
Domanda: Se i microrganismi vengono coltivati, come condurre ricerche pertinenti e come misurarne il numero e le dimensioni? Come viene misurata la riproduzione microbica?
Risposta: conteggio diretto (microscopio, conteggio del lievito vitale con colorazione Meilan), conteggio indiretto (le specie pure che possono essere coltivate possono utilizzare il metodo della piastra di diluizione e il campione è un batterio misto), metodo gravimetrico.
Combinare la teoria con la pratica: un compito, individuare quali microrganismi del suolo sono legati ai segreti nazionali?
Risposta: Ci sono centri di raccolta di ceppi nel mondo e il commercio tra istituzioni non implica segreti di stato. Se vai nello Xinjiang e in Tibet nel mio paese per chiedere campioni di terreno, non ci sono unità di ricerca scientifica, quindi potrebbe trattarsi di spionaggio. Il 99% delle risorse microbiche del suolo hanno funzioni poco chiare. Se utilizzate correttamente, sono risorse molto grandi.
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