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マインドマップギャラリー 臨床免疫学
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臨床免疫学
医学検定中級専門試験の知識ポイントとしては、モノクローナル抗体、凝集反応、自己免疫疾患、免疫増殖性疾患、沈殿反応などが挙げられます。
2024-01-14 00:56:14 に編集されました
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臨床免疫学
導入
導入
免疫機能
防衛
病原微生物の除去
強化する
過敏反応
弱める
免疫不全疾患
外国
自己安定化
損傷した細胞または老化した細胞を除去する
強化する
自己免疫疾患
自分では使えない
モニター
突然変異または異常な悪性細胞を除去する
弱める
悪性腫瘍
抗腫瘍
細胞
リンパ前駆細胞に由来する細胞
NK細胞
急性炎症において重要な役割を果たす細胞
好中球
急性アレルギー反応を引き起こす可能性のある細胞
好塩基球
血液循環から免疫複合体を協力して除去する機能を持つ細胞
赤血球
免疫反応
抗原の刺激によって起こる一連の反応
抗原を排泄または分解する目的
特徴
自己と非自己を識別する
特異性
メモリ
多様性、寛容、自主規制
分類
先天性免疫
自然免疫、非特異的免疫とも呼ばれます
防衛の第一線
組織バリア
皮膚と粘膜
特徴
初期
速い
先天的な
非特定的な
適応免疫
獲得免疫、特異的免疫とも呼ばれます
プロセス
識別する
抗原提示細胞 (APC)
認識、摂取、分解
識別する
摂取する
胃に飲み込む
劣化
抗原ペプチドに分解される
提出する
分解後に放出される
現在の抗原情報
ヘルパーT細胞と関連リンパ球に
アクティベーション
T細胞とB細胞
抗原刺激シグナルを受けて活性化、増殖、分化する過程
直接刺激
APC プレゼンテーション後の刺激
B細胞
形質細胞
体液性免疫
食細胞の助けによる完全な体液性免疫
T細胞
エフェクター細胞（キラーT細胞）
細胞性免疫
エフェクトステージ
形質細胞
抗体を分泌する
胸腺依存性細胞
B細胞を活性化するとき
ヘルパーT細胞の助けが必要
T細胞
ヘルパーT細胞（Th細胞）
サイトカインを分泌する
キラーT細胞（CTL）
細胞毒性効果を実行する
標的細胞
腫瘍細胞
細菌に感染した細胞
移植された臓器
メモリセル
増殖と分化の後、少数の T 細胞と B 細胞が
エフェクター機能を直接実行しない
に基づいて行動する
再び免疫反応が起こる
アクティベーションステージは必要ありません
抗体を直接生成する
一次免疫反応
抗体産生の特徴
低親和性抗体
人工能動免疫と人工受動免疫
人工的な能動免疫
ワクチン（抗原）によるワクチン接種
人工受動免疫
免疫血清（抗体）、リンホカイン
破傷風などの
刺激する必要はありません
すぐに免疫が得られる
免疫組織と器官
システム
免疫器官
免疫細胞
免疫分子
免疫器官
中枢免疫器官
免疫細胞が生成、分化、成熟する場所
骨髄
重要な造血器官
血球とリンパ球の発祥の地（T、B）
B細胞
成熟した場所
体液も骨髄から来ます。
胸腺
T細胞
成熟した場所
末梢免疫器官
免疫反応の部位
識別とアクティベーションの場所
リンパ球の再循環
帰省の出発地・中間駅・目的地
末梢免疫器官
血
末梢免疫器官
器官
リンパ節
最大の金額
脾臓
最大
粘膜関連リンパ組織
扁桃腺、小腸リンパ節、虫垂
免疫細胞
分類
リンパ球
T細胞とB細胞
NK細胞
単核貪食細胞
サポート役
体液性免疫の後期段階
細胞性免疫の初期段階
抗原提示細胞
単球が組織に侵入する
それは食細胞です
リンパ球
T細胞
関数
細胞性免疫
末梢血リンパ球総数
60%-80%
表面マーキング
CD28
で表現される
T細胞表面
B細胞表面のCD80と相互作用できる
T細胞の活性化を刺激する
CD45RO
メモリーT細胞表面特異的CD抗原
部分母集団
Th
関数
免疫反応を促進および強化する
Th1
IL-2、IFN-r（インターフェロン-r）、TNF-β（腫瘍壊死因子β）を分泌
細胞免疫を促進する
Th2
IL-4、5、6、10を分泌
体液性免疫を促進する
細胞性免疫反応を負に制御する
TCF-β
細胞性免疫の負の制御
CTL
具体的な認識
内因性抗原ペプチド-MHCクラスI分子複合体
腫瘍細胞が死滅する条件
MHC クラス I 因子を発現します
標的細胞の特異的死滅
B細胞
関数
体液性免疫
末梢血リンパ球総数
8%-15%
表面マーキング
mIgM=u鎖Ig
CD80
で表現される
活性化されたB細胞表面
T細胞表面のCD28と相互作用します。
T細胞の活性化を刺激する
CD21
成熟B細胞表面のCD分子
エプスタイン・バーウイルスに結合する可能性がある
B2細胞
末梢血中の主なB細胞
体液性免疫を行う初代細胞
B1細胞
体の免疫調節に関与する自己免疫疾患とB細胞由来の腫瘍は密接に関連しています
認識される抗原の種類
多糖類
ナチュラルキラー細胞（NK細胞）
特徴
非特定的な
抗原刺激は必要ありません
アクティベートする必要はありません
標的細胞を直接殺す
MHC分子に制限されない
細胞質にはアズール親和性顆粒が含まれています
表面マーキング
CD56、CD16
CD56 CD3-CD16
2人の老人が刺激なしで直接セックスする
活性のある標的細胞の決定
ヒトNK細胞活性
K562細胞株
マウスNK細胞活性
YAC細胞株
抗体依存性細胞媒介性細胞毒性
細胞媒介性: NK 細胞
ADCC
NK細胞の殺傷機能には抗体の助けも必要です
必要な抗体
IgG
プロセス
IgG は標的細胞の対応する抗原決定基に結合します
NK細胞はIgGのFcセグメントに結合します
NK細胞を活性化する
パーフォリン、グランザイムなどを放出して標的細胞を殺す
標的細胞のアポトーシス
検出
NK細胞殺傷活性
細胞毒性試験
免疫ヘルパー細胞
用語集
リンパ球
特にT細胞
活性化には非リンパ球の参加が必要です
分類
単核貪食細胞
樹状細胞
単核貪食細胞
大きな食細胞
血液中の単球
組織内のマクロファージ
表面にはスカベンジャー受容体、TcrR、TLR、補体受容体が含まれています
抗原認識受容体がない
マクロファージは非特異的であるため、
小さな食細胞
好中球
表面のマーキング
単核貪食細胞
CD14
好中球
CD33
樹状細胞
貪食能力がない
強力な抗原提示能力を持っています
抗原提示細胞 (APC)
重要な表面マーキング
MHCクラスII抗原
マクロファージが活性化された後、高レベルの
静止状態のマクロファージでは発現レベルが低い
フルタイム
単核貪食細胞
樹状細胞
一次免疫応答の一次提示細胞
B細胞
アクティベーションは必要ありません
免疫応答の主な提示細胞が再び
パートタイム
内皮細胞
上皮細胞
活性化されたT細胞
有効化する必要があります
免疫細胞の分離と保存
分離
単核球の分離
フィコール分離液
単一密度勾配遠心分離法
密度は 1 つだけ、遠心分離後の層は 1 つだけ（中間層）
シングルコアも登場
単核細胞を分離する
リンパ球
シングルコア
層状の
血小板、血漿層
単核球層（Ficoll分離媒体）
顆粒球、赤血球層
比重範囲
単核細胞
1.075～1.090
多核顆粒球
1.092程度
血小板
1.030～1.035
リンパ球の分離
付着法、吸着カラム濾過法
原理
単核細胞はガラス、プラスチック、ナイロンウール、綿繊維、デキストランゲルに活発に接着します。
懸濁液から単球を除去します
純粋なリンパ球集団の取得
磁石吸着方式
単核は鉄粒子を貪食することができる
パーコール分離法
連続密度勾配遠心分離
層状の
死んだ細胞、血小板、血漿
単球（上層）
リンパ球（下層）
顆粒球、赤血球層
T 細胞と B 細胞の分離
Eロゼット沈降法
T細胞は羊赤血球受容体（E受容体/CD2受容体）を持っています
T細胞
EAロゼット沈降法
B細胞はIgG Fc受容体を持っています
免疫グロブリン IgG の Fc セグメントに結合可能
B細胞
T細胞サブセットの分離
原理
対応する細胞とさまざまな表面マーカーの特性に応じて
Th
CD4
CTL
CD8
アフィニティープレートの結合および分離方法
磁性微小球の分離方法
蛍光活性化細胞分離装置による分離方法
保存
長期保存
液体窒素極低温学
-196
保護剤
ジメチルスルホキシド
単離された細胞の生存率アッセイ
何か機能があるか見てみる
保存する前に機能を確認する
トリパンブルー染色
精子の生死確認も含む
トリパンブルー
生細胞に対して不透過性の無傷の細胞膜
生きた細胞は染まらない
死細胞染色
青
表面マークの検出
抗体感作細胞ロゼット法
E ガーランド
EA ガーランド
免疫細胞化学
酵素標識された抗体は細胞上の特定の受容体に結合します
通常の顕微鏡で観察された染色細胞の割合
免疫蛍光
フルオレセイン標識抗体は細胞上の特定の受容体に結合します
蛍光細胞の割合を蛍光顕微鏡で観察
フローサイトメトリー
リンパ球の機能検査
T細胞機能検査
Tリンパ球増殖試験・リンパ芽球形質転換（in vitro試験）（PHAリンパ球形質転換試験）
原理
T 細胞が in vitro でマイトジェンまたは抗原によって刺激された後
細胞内タンパク質および核酸合成の増加
サイズの増加、核内の DNA および細胞質内の RNA の合成の増加
細胞質の増加
キャビテーションが発生する
緩んだ核クロマチン
核小体が一目瞭然
リンパ芽球に戻る
母細胞化
増殖するために母に戻った
刺激物
非特異的マイトジェン
フィトヘマグルチニン (PHA)
コンカナバリン A (ConA)
フィトラッカ・アメリカーナ (PWM)
特定の抗原
結核菌の精製タンパク質誘導体 (PPD)
破傷風トキソイド
T細胞の増殖を刺激する
腫瘍抗原
同種細胞
フィトヘマグルチニン (PHA)
B細胞の増殖を刺激する
エプスタイン・バーウイルス
T細胞とB細胞の増殖を同時に刺激します
結核菌の精製タンパク質誘導体 (PPD)
検出方法
形態検査
3H-TdR取り込み法（放射性核種法）
活性化されたリンパ球はDNA合成の前駆体を取り込みます
3H標識チミジン
混ぜる量に応じて
T細胞媒介細胞毒性アッセイ
原理
感作されたT細胞が対応する標的細胞抗原に再び遭遇するとき
標的細胞の破壊と溶解を実証
臨床応用
体細胞の免疫レベルを評価する
特に、腫瘍患者のCTLが腫瘍細胞を殺す能力を測定する
予後を判定し、治療効果を観察する
インビボ試験
原理
正常な身体が特定の抗原に対する細胞性免疫を確立した後、
同じ抗原を使った皮膚テストを行う
陽性の遅延型過敏反応
方法
ツベルクリン検査（OT/PPD）
皮下ワクチン接種
2～3日後
赤み、腫れ、水疱
>20mm
結核感染の証明
患者が結核と診断された場合
PPD陰性
細胞免疫機能の低下を示します
臨床応用
特定の抗原に対する特異的な細胞性免疫応答能力を有するかどうか
細胞免疫状態
特定の病原性微生物感染症（結核、ハンセン病）の診断
細胞性免疫不全疾患の診断
病気の予後を決定する
B細胞の機能検査
B細胞増殖アッセイ
原理
T細胞増殖アッセイと同じ
刺激物
マウスB細胞
細菌性リポ多糖類 (LPS)
ヒトB細胞
SPA を使用した黄色ブドウ球菌および抗 IgM 抗体
スパ
ブドウ球菌プロテインA
溶血性プラーク検査
B細胞が抗体を産生する能力
原理
羊赤血球（SRBC）を使用する
免疫化マウス
マウスの脾臓を摘出します
脾細胞懸濁液の調製
中には形質細胞が入っている
SRBCを含む寒天プレートの調製
脾臓細胞懸濁液をプレートに加えます
抗SRBC抗体が産生されると周囲が感作される
補完者の参加により
SRBCを溶解する
肉眼で見える溶血性プラークの形成
プロセス
臨床的な意義
各プラークの中心には抗体形成細胞が含まれています
プラークの数
抗体産生細胞の数
プラークサイズ
各細胞は何個の抗体を産生しますか?
逆溶血性プラーク検査
抗体産生細胞の数を決定する
酵素結合免疫スポット検査 (ELISPOT)
ポット
スポットの意味
応用
インビトロ試験
特異的抗体B細胞
抗体分泌量
サイトカイン分泌T細胞
抗体分泌細胞を検出可能
分泌された抗体の量も検出できます
食細胞機能検査
好中球機能検査
走化性機能検査
フィルター膜透過法（ボイデンチャンバー法）
スキンウィンドウテスト
細胞内殺菌力
ニトロブルーテトラゾリウム（NBT）還元試験
健常者の陽性率
5%-10%
陽性率が大幅に上昇
全身性細菌感染症
食作用と代謝活動
化学発光法
発光効率を高める物質
ルミノール
マクロファージ機能検査
カーボン粒子クリアランス試験
食細胞は炭素粒子を飲み込むことができる
免疫分子
免疫活性細胞または関連細胞
体の免疫反応または免疫調節に参加するために分泌されます。
タンパク質およびポリペプチド物質
分類
免疫グロブリン
抗体
補体
サイトカイン
細胞接着分子
ヒト白血球分化抗原
免疫グロブリン
免疫グロブリン (Ig)
抗体分子と類似した化学構造を持つグロブリン
Y字型
抗体（Ab）
抗原刺激を受けると増殖して形質細胞に分化する B 細胞によって産生されるグロブリン。
体液性免疫機能の発揮
副作用が最小限に抑えられた抗体
小分子抗体
治療薬の最も効果的な担体
モノクローナル抗体
すべての抗体は免疫グロブリンです
すべての免疫グロブリンが抗体であるわけではありません
多発性骨髄腫など
分類
分泌型 (sIg)
主に体液に含まれる
抗体のさまざまな機能をもつ
モデル(mIg)
抗原受容体としてB細胞の表面に発現
膜表面免疫グロブリン
化学構造
Ig分子は4つのペプチド鎖で構成されています
2 つの同一の重鎖 (H)
γ、α、μ、δ、ε鎖
異なる重鎖、異なる種類の免疫グロブリン
2 つの同一の軽鎖 (L)
K、Lチェーン
K:L 約2:1
2 つの重いものと 2 つの軽いもの、上部の変化と下部の一定、重いものと一定の分類、軽いものと一定の分類、軽いものと重い可変ノット抗原
免疫グロブリンの分類
重鎖定常領域
免疫グロブリンのタイピング
軽鎖定常領域
重鎖定常領域抗原性 (CH)
IgG (γ) > IgA (α) > IgM (μ) > IgD (δ) > IgE (ε)
FCセグメント
定常領域（VH領域）
免疫グロブリン アイソタイプ エピトープ
定常領域（CH、CL）
免疫グロブリン抗原結合部位
重鎖 (H) および軽鎖 (L) の変動 (V 領域)
超可変領域 (HVR)
抗体可変領域（V領域）内
抗原エピトープに結合する部位
相補性決定領域 (CDR) としても知られています。
実際に抗原に結合する部位は 6 つあります。
分類
IgG
主力
最高の内容
胎盤を通過できる唯一の抗体
免疫学的検査における自己抗体、過敏性II型抗体、二次抗体（二次抗体）
IgG1、IgG2、IgG3、IgG4
IgG1含有量が最も多い
IgG4は補体を活性化できない
対流免疫電気泳動
IgG1 と IgG2
電気浸透によるもの
カソードに向かって移動します
IgG3 と IgG4
電流のせいで
ポジティブな方向へ進む
長い潜伏期間
高い親和性
二次免疫応答の一次抗体
効果
IgM
3月1日
五量体
分子量が大きい
マクログロブリン
個体発生中に合成および分泌された最も初期の抗体
新生児の臍帯血中のIgMの増加
子宮内感染症
抗原刺激後に初めて産生される抗体
感染中に血清IgMレベルが上昇する
最近の感染症
生理食塩水培地中で赤血球の凝集を引き起こす可能性がある
血液型判定（スライド法）
低い親和性
補体を活性化する最強の能力
天然レクチン
寒冷凝集素
寒冷凝集素症候群
IgM免疫グロブリンによって引き起こされる自己免疫疾患
IgA
国境警備隊
分泌型 (sIgA)
二量体構造
Jチェーンと分泌パッチが含まれています
局所粘膜免疫に参加する
一次抗体
消化管、気管支分泌物、初乳、唾液、涙の存在
母乳中の sIgA は生後 4 ～ 6 か月の乳児の局所免疫障壁を改善します
局所抗体
IgE
最低限の内容
細胞指向性抗体
マスト細胞と好塩基球の親和性
I型過敏症反応
増加
I型過敏症反応
気管支喘息、アレルギー性鼻炎
非アレルギー疾患
IgE骨髄腫
寄生虫感染症
免疫グロブリン断片の調製
酵素法
パパイン感受性
IgG は 2 つの Fab フラグメントと 1 つの Fc フラグメントに切断されます。
免疫グロブリンの Fc フラグメントを作成するために使用される酵素
ペプシン
IgG は F(ab)2 といくつかの小さな断片に切断されます
サブトピック
体液免疫グロブリン測定
IgG、IgA、IgMの測定
含有量g/Lレベル
一方向循環免疫拡散法
免疫比濁法
最も使用
酵素免疫測定法
IgG サブクラスの決定
最低感度
補体
概要
補体(C)
酵素様活性を持ち、熱に不安定な血清中の糖タンパク質のグループ（主にβグロブリン）
でも酵素ではない
肝細胞とマクロファージによって合成される
抗原が体を刺激する
生産しません
補体系
構成
固有成分
C1、C2、C3、C4、C5
補体調節タンパク質
補体受容体の構成
C3
最高の内容
C2
最低の内容
D ファクター (C2 なし)
最低の内容
最小分子量
Cq1
最大の分子量
C1の断片
化学的特性
凍結乾燥
アクティブに保ちます
補体不活化
56℃
30分
強酸および強塩基
強い衝撃
特定の添加物
エーテル
エタノール
プロテアーゼ
紫外線照射
活性化経路
C9はNです
識別段階
免疫グロブリンの関与が必要
IgM または IgG が抗原に結合します
C1q と C1s をアクティブにする
活性化段階
C1s は C4 と C2 を切断します
C3転換酵素（C4b2b）の形成
C3 コンバターゼは C3 を切断します
C5 転換酵素 (C4bC2bC3b) の形式
MACフィルム攻撃段階
C5 コンバターゼは C5 を切断します
C5b67複合体形成
細胞膜に埋め込まれたC5b678
N C9 入力
膜貫通孔を形成する
外部からの水が細胞内に侵入する可能性がある
細胞溶解を引き起こす
補体は活性化中に複数の断片に切断されます
より小さな断片
ある
より大きな断片
b
C2例外
より大きな断片
C2a
より小さな断片
C2b
古典的な道における唯一の小さな断片
効果
ヘルパー抗体は細胞溶解効果を発揮します
身体の防御効果と自己安定化に関与する
免疫病理学的反応を引き起こす
C3aとC5a
マスト細胞の核と好塩基球の細胞膜に作用します。
細胞を脱核してヒスタミンとロイコトリエンを放出します
アナフィラキシー様反応に対する医療記録の変更
アナフィラトキシン
ラジ細胞
表面には多数の C3b、C1q、C3d 受容体が存在します。
にやにやしない
これらの受容体を利用して、補体と結合する循環免疫複合体に結合します。
次に、放射性核種標識抗ヒト IgG を追加します。
検出可能な循環免疫複合体
総補体活性アッセイ
補体50％溶血検査（CH50測定）
原理
SRBC (羊赤血球) 抗体は SRBC 表面抗原に結合します
補体を活性化する（古典的経路）
50%溶血のための最小血清量
総補体活性を反映します
100%溶血よりも
より高感度で観察しやすくなりました
溶血反応の補体投与量への依存性
特殊なS字カーブ
溶血素が主に使用されます
2台(2U)
ユニット
U/ml
影響
溶血活性の低下
PH
緩衝液とイオン強度
身長を伸ばす
イオン
緩衝カルシウム、マグネシウムイオン
過剰
溶血活性を阻害する
臨床的な意義
身長を伸ばす
悪性腫瘍
C3とC4も増加
補体固定試験
原理
抗原抗体複合体は補体と結合します
遊離の抗原または抗体は補体に結合できません
希釈バッファー
塩化ナトリウム 適量
少量のカルシウムイオンとマグネシウムイオン
特定のpH値を持っている
検出
抗原または抗体
表示システム
溶血素
赤血球を溶解する抗体
羊の赤血球
抗原抗体システム
効果
補体が結合しているかどうかを示します
検査対象の抗原または抗体の存在を検出します。
分類
反応系
補体系
試薬です
一般用途
新鮮なモルモット血清
テストされていない
表示システム
溶血素
羊の赤血球
プロセス
試薬 1 を追加します
既知の抗原/既知の抗体
血清を追加します (抗体を確認/抗原を確認)
試薬 2 を追加します
補足を追加する
試薬 3 を追加します
指導システムに参加する
血清中に抗体が存在する場合、補体は最初のステップですでに結合しており、試薬 3 は結合できなくなります。
溶血性ではない
溶血性ではない
ポジティブ
検査対象の抗原/抗体の存在
投与単位
ユーティリティユニット
最小限の完全な溶血
投与量
抗原、抗体、溶血素、羊赤血球
各0.1ml
補体
0.2ml
合計0.6ml
正式な治験補体投与量
式
最小限の完全な溶血
1:60希釈
Y
Y*2：60=0.2：X
X: 希釈倍率
2: 2 補数ユニット
0.2: 補体投与量
臨床的な意義
減らす
消費の増加
RA（リウマチ）、SLE（全身性エリテマトーデス）、活動性自己免疫性溶血（II型過敏症）、移植拒絶反応
細菌感染症
特にグラム陰性細胞感染症
最も敏感な微生物
血清補体レベルの低下は、多くの場合補体副経路の活性化によって引き起こされます。
リポ多糖類 (LPS) の刺激
合成が不十分
重度の肝臓病
栄養失調
巨額の損失
広範囲の火傷
大量出血
ネフローゼ症候群
臨床的な意義
補体欠乏症の遺伝性疾患
C1阻害分子の欠損
C1が足りないわけではない
遺伝性血管浮腫
C3欠陥
重度の感染症
サイトカイン
活性化された免疫細胞と特定の間質細胞
分泌された活性物質
化学的性質
タンパク質または低分子ペプチド
主に糖タンパク質
ほとんどが低分子量タンパク質
ほとんどが単一の形式で存在します
MHC による制限なし
生物学的機能
免疫反応と炎症反応を仲介および調節する
さまざまな細胞の生理機能を調節する
B細胞だけでは抗体を産生するように刺激することはできません
B細胞の活性化と増殖
二重シグナル、二重認識、サイトカインが必要
検出
最も一般的に使用される方法
免疫学的検査
エリサ
好ましい方法
免疫反応性のみを測定する
免疫活性についてはテストされていません
フローサイトメトリー
酵素免疫スポット検査 (ELISAPOT)
サイトカインの前駆体分子を測定できない方法
生物活性測定
含む
インターロイキン (イリノイ州)
IL-2
T細胞の生産
長期的な T 細胞培養を促進および維持する
T細胞増殖因子
移植拒絶反応
活性化後、IL-2 が分泌されてエフェクター T 細胞 (CTL) の移植片への侵入を促進し、B 細胞の抗体産生を促進します。
遅発性過敏症（DTH）において
抗原活性化T細胞の増殖を引き起こすだけではありません
「傍観者」T 細胞の増殖を引き起こす可能性もあります
NK細胞を活性化できる
検出
細胞増殖促進アッセイ
減らす
慢性B型肝炎
慢性B型肝炎
LPSで刺激された単核細胞
IL-1とIL-2の分泌能力は正常な人に比べて著しく低下しています。
IL-4
Th2細胞の生産
免疫グロブリンのクラススイッチを促進する
マイコバクテリア抗原で刺激された結核患者の末梢血単核球
明らかに増えます
静止状態の B 細胞を開始して DNA 合成段階に入る
I型過敏症反応
特定の B 細胞の増殖と形質細胞への分化を刺激します。
特徴的な IgE を生成する
増加
活動性肺結核
IL-3、IL-5
I型過敏症反応
好酸球表面受容体に結合した後
その活性化を刺激する
好酸球性顆粒と生理活性物質を放出します
IL-5
好酸球の増殖、分化、走化性を促進します。
IL-6
多発性骨髄腫、骨髄腫患者
破骨細胞の数を増やす重要な要素
形質細胞の増殖と分化を促進する重要な因子
B細胞ハイブリドーマ細胞の増殖を刺激するために最も一般的に使用されます。
臓器移植後に慢性拒絶反応が起こる
患者のサイトカインレベル
大幅に増加した
IL-6
IL-6、IL-1
肝細胞を刺激して急性期タンパク質を分泌させる
IL-8
好中球に対する走化性効果
IL-10
負の免疫調節因子
IL-2およびIL-1の合成を阻害することができます
IL-18
走化性活性がある
方法
走化性活性アッセイ
インターフェロン (IFN)
I型インターフェロン
αインターフェロン
ヒト白血球の生産
ベータインターフェロン
ヒト線維芽細胞によって生成される
強力な抗ウイルス効果
II型インターフェロン
リンインターフェロン
T細胞の生産
Th1細胞の生産
効果
免疫調節効果
最強
抗ウイルス効果
Th0細胞からTh2細胞への形質転換を阻害する
Th1プロデュースなのでもちろん母に向けたものです
つまり、Th2細胞の活性化と増殖を阻害するということです。
NK細胞を活性化できる
IFN-αとIFN-rは異なる受容体に作用します
抗原による刺激後に生成される
検出方法
抗ウイルス活性アッセイ
成長因子
トランスフォーミング成長因子 (TGF)
TCF-β
細胞性免疫の負の制御
ケモカインファミリー
腫瘍壊死因子 (TNF)
TNF-α
悪液質
悪液質を引き起こす主なサイトカイン
標的細胞の生成を刺激する
IL-1、IL-6
NK細胞を活性化できる
検出
細胞傷害活性がある
利用可能な細胞傷害活性アッセイ
TNF-β
T細胞による
Th1細胞の生産
コロニー刺激因子 (CSF)
NK細胞の機能を活性化する因子
IL-2、IFN-r、TNF-α
細胞接着因子 (CAM)
細胞間、または細胞と細胞外マトリックスとの相互結合・接着によって得られる
低分子ペプチドまたは糖タンパク質
機能の形態
受容体リガンドの結合
効果
免疫反応、炎症、凝固、創傷治癒、腫瘍転移などに関与します。
分子基盤
分類
カルシウムイオン依存ファミリー/ムコカジンファミリー
インテグリンファミリー
免疫グロブリンスーパーファミリー
ムチン様ファミリー
セレクチンファミリー
炎症因子ファミリーを含まない
主な測定方法
ELISA法
特徴
パフォーマンス
多面発現性
重なり合う
抵抗効果
相乗効果
標的細胞上の高親和性受容体に特異的に結合する必要がある
生物学的効果を発揮する
インスリンと同じ
非常に強い生物学的影響を持っています
微量のサイトカインのみが必要です
傍分泌、自己分泌、または内分泌的に作用する可能性がある
ホルモンと同じ
臨床効果
体の免疫状態と細胞免疫機能の評価
最も使用
特定の病気の診断支援
特定の
あくまで補助的なもの
病気の治療効果の検出と服薬指導
病気の予防
病気の治療
現在、多くのサイトカインが医薬品として開発されています。
他の
T細胞が産生するサイトカインについて
B細胞に影響を与える可能性のある抗体の種類
抗原抗体反応
原理
抗原決定基（エピトープ）と抗体の超可変領域の構造相補性と親和性
抗原結合能
非共有結合
共有結合を形成しない
静電気引力
ファンデルワールス力
最弱
水素結合力
疎水力
最強
これは、抗原と抗体の水和膜を押しのけて結合部位を露出させる必要があるためです。
だから最強なんです
アフィニティ
抗体分子上の抗原結合部位と応答する抗原エピトープ間の結合強度
に応じて
空間構成の相補性の度合い
反映する
抗原抗体の相補関係
急行
平衡定数 K
K 値が大きいほど親和性が強くなります。
抗原との結合が強くなる
アフィニティ
抗体分子上の抗原結合部位と対応する抗原決定基間の適応的結合強度
抗原と抗体間の固有の結合力
反映する
抗原と抗体の結合力
特徴
特異性
可逆性
比例性
ステージ
特異性
抗原決定基と抗体の超可変領域間の相補性
交差反応性
2 つの異なる抗原分子
部分的に同一または類似した構造を持つ抗原エピトープ
それぞれの対応する抗血清と交差反応する可能性があります
ワイフェイの反応
ミュータンス菌とクレブシエラ菌は同じ抗原エピトープを持っています
クリソティティス属のミュータンスによる置換
発疹チフス（発疹チフス）の診断
外で仕事を終えてすぐに戻ってきます
外側: 骨端 側面: 変態 クラス: 黄斑 直接: リケッチア
可逆性
特定の条件下では解離が起こる可能性がある
アフィニティークロマトグラフィー
溶液のpHとイオン強度を変化させると、抗原抗体複合体の解離が促進されます。
それにより抗原または抗体を精製します
解離後も生物学的に活性を維持
比例性
形成される結合体の量は反応物の濃度に関係します
最適比率（当量点）
最も迅速に目に見える反応を引き起こす抗原と抗体の濃度比
等価ゾーン
抗原抗体分子の比率の適切な範囲
最大の沈殿反応も次の場所で発生します。
バンド現象
沈殿を伴わない過剰な抗原および抗体
フロントストラップ
抗体の過剰摂取
バックストラップ
抗原過剰
前も無地、後ろも無地
抗体は比較的フラットです
ステージ
最初のステージ
抗原と抗体の特異的結合
高速、目に見えない
数秒から数分
第2段
凝集、沈殿、細胞溶解
応答が遅い、目に見える
数分から数時間
影響を与える要因
電解質
抗原と抗体の電荷の一部を失う
凝集または沈殿が起こりやすい
0.85% 塩化ナトリウム
免疫複合体の形成を促進する
遅いものから速いものまで
SCN-、CLO4-、NO3-、SO4-、H2PO4-
最も速いのは
CL-
pH
抗原抗体反応は適切な pH 環境で実行する必要があります
最適pH6～9
人間のpHは7.35～7.45だから
温度
温度上昇
分子運動を加速できる
抗原抗体衝突の可能性の増加
反応加速
気温：37℃
免疫原および抗血清の調製
免疫原の調製
免疫原
体内での抗体または感作リンパ球の生成を誘導することができます
特定の反応を引き起こす物質
特性
免疫原性
免疫反応が起こる
抗体または感作リンパ球の発生を誘導する能力
免疫反応性（抗原性）
特異的結合能の特徴
分類
完全な抗原
免疫反応性
免疫原性の
ハプテン
免疫反応性
非免疫原性
免疫反応なし
抗体を産生したり、リンパ球を感作したりしません
ペプチド、ステロイドホルモン、ヌクレオシド、特定の薬物（ペニシリン）
非免疫原性
担体とのみ組み合わせます（牛血清アルブミンが最も一般的に使用されます）
免疫原性があること
胸腺依存性抗原
労働者である私は頼りにならない
準備
生または-40℃で保存
粒子抗原
大きい
細胞抗原、細菌抗原、寄生虫抗原
静脈内予防接種
可溶性抗原
低分子
タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、酵素、補体、細菌毒素、免疫グロブリン断片、核酸
粗抽出
単一細胞の取得
機械的粉砕
酵素処理
細胞破砕法
凍結融解を繰り返す方法
超音波破壊
自己分解法
酵素処理
界面活性剤処理法
抽出と精製
塩析法
硫安塩析法
オクタン酸硫酸アンモニウム抽出方法
硫酸ナトリウム塩析法
中性塩（33～50％飽和硫酸アンモニウム）
水和膜を破壊する可能性がある
電荷を中和する
タンパク質を凝集させて沈殿させる
最も古典的な
最も粗い
タンパク質の分離精製技術
活動には影響しない
ポリマー沈殿法（CIC）
循環免疫複合体の検出
PEG沈殿法
免疫複合体を循環する小分子の状況を反映できない
抗原非特異的免疫複合体の測定
特徴
単純
特異性が低い
温度の影響を受けやすい
ポリエチレングリコール (PEG)
分子量
6000
タンパク質の分子量が大きいほど
沈殿に必要なPEG濃度が低いほど
3%-4%PEG
沈殿性免疫複合体
>5%
析出CICを選択する機能がなくなる
8%-12%
IgGを沈殿させる
補体関与技術でCICを検出
方法
C1q固相法
抗体C3-CIC-ELISA法
IgAクラス抗体によって形成される循環免疫複合体を検出できない
IgAは補体と結合できないため、
アルデヒド化赤血球
特徴
60℃の加熱に耐える能力
冷凍・解凍を繰り返しても壊れにくい
血液凝固反応は新鮮な赤血球よりも強い
長い保管時間
複数のウイルスを同時に精製可能
ウイルスへの適用性が高い
免疫アジュバント
免疫反応の生成を助ける
抗原の前または同時に体内に注射される
非特定的な場合もあります
免疫反応を強化する
免疫反応の種類を変える
タイプ
免疫原性の
サイトカイン、リポ多糖、百日咳菌、BCGワクチン
細胞と細菌
非免疫原性
水酸化アルミニウム、流動パラフィン、ラノリン、ミョウバン
動物の免疫化のためのアジュバント
フロイントのアジュバント
フロイントの完全アジュバント
流動パラフィン、ラノリン、BCGワクチン
BCGワクチンをもう1つ
フロイントの不完全アジュバント
流動パラフィン、ラノリン
機構
抗原の物理的性質を変更する
免疫原性を高める
抗原の分解と除去を遅らせる
免疫システムを効果的に刺激します
単球-貪食細胞系を刺激します。
抗原を処理して提示する能力を強化する
リンパ球の増殖と分化を刺激する
体の免疫反応の抗体力価を増加させます
抗体の種類を変更する
より多くのIgGを生成する
遅延型過敏反応の誘発
タイプ IV
抗原特異性は変更できません
特異性が変更されると、このワクチンは同じではなくなります。
抗血清の調製（抗体の調製）
抗血清：抗体を含む血清
体内の複数の B 細胞が活性化し、特定の抗原に対する抗体を産生します
ポリクローナル抗体
各B細胞は抗体を産生します
複数の B 細胞はポリクローナル抗体です
タイプ
タイプR
ウサギやその他の小動物
親和性が強く解離しにくい
幅広い範囲に対応
診断試薬用
H型
馬やその他の大型動物
親和性が弱く、解離しやすい
狭い範囲に適しています
免疫療法用
破傷風ワクチン
選ぶ
プログラム
時間
1回目と2回目
10～20日
3回目以降
7～10日
予防接種後の採血
5～7日
5.7.10.20
採血会場
頸動脈採血
大型および中型動物
目の除去または断尾
ねずみ
抗血清の精製
ヘテロ抗体吸着物の除去
特異抗原を含まない抗原溶液
アフィニティークロマトグラフィー
特異的親和性（特異性）
抗体、酵素、受容体タンパク質を精製します
最高の、最も効果的な
高純度の特異的IgGの抽出など
アフィニティ結合 十分に献身的
ゲル濾過
分子量に応じてタンパク質を分離する
大きな分子が最初に通過します
ゲルビアホール サイズを見てください
塩析法
最もクラシックでラフな
タンパク質の活性に影響を与えない
カプリル酸抽出法
粗抽出物の塩析 とてもクラシックな
イオン交換クロマトグラフィー
タンパク質が持つ電荷に応じて
イオンの帯電は異なります
アフィニティークロマトグラフィー
プロセス
抗血清がカラムを通過するとき
分離物質に対する固相担体の特異的親和性
IgGはクロマトグラフィーカラムに吸着されます
次に、移動相を変更して目的物質の特異吸着を消失させます。
IgG がカラムから解離する
浄化の目的を達成するために
ゲル濾過
ゲルクロマトグラフィー/モレキュラーシーブ濾過
タンパク質の分子量に応じて
大きなタンパク質
ゲル間の隙間を直接通過
最初に洗い流されました
小さなタンパク質
ジェルの中に入ります
後で溶出した
塩析法
硫安塩析法
オクタン酸硫酸アンモニウム抽出方法
硫酸ナトリウム塩析法
中性塩（33～50％飽和硫酸アンモニウム）
水和膜を破壊する可能性がある
電荷を中和する
タンパク質を凝集させて沈殿させる
最も古典的な
最も粗い
タンパク質の分離精製技術
活動には影響しない
イオン交換クロマトグラフィー
異なる料金
正に帯電した
陰イオン交換樹脂
交換したいのはマイナスイオンだから
マイナスに帯電した
陽イオン交換樹脂
交換したいのは陽イオンだから
抗血清の同定と保存
識別
抗体の特異性
二方向免疫拡散
抗体価の測定
市松滴定（四角滴定法）
二方向免疫拡散
最適な作業濃度
判断基準
抗原と抗体
強いポジティブ
最高希釈率
最低濃度
保存
短期保管
2～8℃
5年間保管
一般的な方法
繰り返しの凍結融解を避ける
冷凍保存
5～10年保存可能
真空乾燥
モノクローナル抗体
ハイブリドーマ技術の基本原理
モノクローナル抗体の作成
保護剤
ジメチルスルホキシド
モノクローナル抗体
単離された単一の B 細胞
増殖後に形成されたクローンのコロニー
単一エピトープ
同じ構造
機能的に均一な抗体
融合細胞を希釈する
それぞれのカルチャーウェル
実は
0 - セルの数
理論は
1セル
ハイブリドーマ細胞によって産生される抗原分子
単一の抗原決定基
抗体の
特異性
に応じて
クローン細胞のスクリーニング
陽性ハイブリドーマ細胞のクローン培養
限界希釈法
最も使用
顕微鏡検査
直感的で信頼性の高い
稼働時間が長く、汚れがつきやすい
蛍光活性化セルソーター
高効率かつ高価
軟寒天平板法
マスターするのが難しい
基本的
脾細胞
感作されたB細胞
抗体分泌機能
骨髄腫細胞
非分泌型
免疫グロブリンを生成しない
無限に分割可能で不死性もある
レントバックを防ぐ
8-アザグアニン
ヒポキサンチン-グアニンホスホリボース転換酵素（HGPRT）を欠く骨髄腫細胞株を増殖できる薬剤
保存
-196℃の液体窒素
細胞融合剤
ポリエチレングリコール (PEG)
HAT中
ヒポキサンチン(H)、アミノプテリン(A)、チミジン(T)
アミノプテリン(A)
細胞内のDNA合成の主要経路をブロックする葉酸アンタゴニスト
融合していない細胞死
ハイブリドーマ細胞の生存
タイプ
Bリンパ球ハイブリドーマ技術
モノクローナル抗体の調製
Tリンパ球ハイブリドーマ技術
各種リンホカインの調製
準備
生体内誘導法
BALB/c マウスを例に挙げます。
0.5 mlの流動パラフィンとその後のフィタンの腹腔内注射
誘導剤
腹水を誘発する
1週間後
ハイブリドーマ細胞の腹腔内接種
マウスの腹腔内で増殖する
モノクローナル抗体の産生と分泌
ワクチン接種後10～14日後
腹水を吸引する
腹膜細胞
フィーダー細胞
大量のモノクローナル抗体を入手する
特性
非常に具体的
対応するエピトープにのみ結合します
1 つのエピトープのみをターゲットにする
高い均一性
再現性
弱い凝集反応
沈殿しない
沈殿後は免疫比濁測定を行うことができません。
環境に非常に敏感
精製方法
塩析法
カプリル酸抽出法
ゲル濾過
イオン交換クロマトグラフィー
アフィニティークロマトグラフィー
最も効果的なのは
抗血清の精製と同じ
保存
真空乾燥
遺伝子工学
原理
DNA組換え・タンパク質工学技術
さまざまなニーズに応じて抗体をコードする遺伝子を改変および構築します
適切なレシピエントセルをインポートする
再発現された抗体
アドバンテージ
体の抗体拒絶反応を軽減、または排除します
ヒト化抗体
親抗体の親和性と特異性を保持
抗体の不均一性を低減する
人体への応用に役立つ
タイプ
キメラ抗体
機能的可変領域遺伝子ヒト Ig 承認済みデジーン
マウス-ヒトキメラ抗体
特徴
異質性を減らす
親抗体の特異性と親和性を保持
拒否反応を減らす
修飾抗体
ヒト抗体可変領域（超可変領域）の相補性決定基（CDR）
マウスソースシーケンスに変更
特徴
マウス由来のモノクローナル抗体の特異性を持ちます。
抗体結合力を維持する
ヒト抗体
完全ヒト抗体
最も理想的な治療用抗体の形
二重特異性抗体/二機能性抗体
2 つの抗原結合部位は異なる特異性を持っています
2 つの異なる抗原分子を組み合わせる
コンビナトリアル抗体ライブラリー技術
軽鎖および重鎖の可変領域
ランダムな組み合わせ
新たな軽鎖・重鎖ペアリング法技術の創出
凝集反応
概要
粒子抗原
細菌、赤血球
または可溶性抗原または抗体で覆われた表面
粒子状物質
可溶性抗原は粒子状物質をコーティングする必要がある
それ以外の場合は見えません
対応する抗体または抗原に結合します
目に見える血栓
分類
直接凝集反応
粒子抗原
間接凝集反応
可溶性抗原
運送業者のサポートが必要です
特徴
定性
半定量的
希釈後
力価または力価として最も高い希釈係数を使用します。
便利でシンプル
特別な機器は必要ありません
2段階
抗原と抗体の特異的結合
目に見える粒子の凝集が発生する
影響
凝集を促進する
電解質またはタンパク質を増やす
試験液の粘度を上げる
シスチナーゼ処理
ノイラミニダーゼ治療
直接凝集反応
粒子抗原
凝集原
抗原（粒子状）
レクチン
抗体
方法
スライド方式
既知の抗体
試験抗原
血液型判定では血液が抗原となるため、既知の抗体が使用されます。
抗原と抗体の両方を検出可能
応用
菌株の同定
両方の抗原を検出可能
抗体検査もできる
血清学的タイピング
ABO式血液型の識別
試験管法
半定量的
既知の抗原
抗体の検査
ワイフェイテスト、クロスマッチ、フェイダテスト
ヒント: 外交官は血が出るほど太っています。
ワイフェイテスト
プロテオバクテリアとクレブシエラの同じエピトープを使用
発疹チフスの検査
フェイダテスト
腸チフス凝集検査
とても太って、とても悲しい
抗体の決定
異好性物質凝集試験
エプスタイン・バーウイルス
IgM抗体が出現する
羊の赤血球と馬の赤血球を非特異的に凝集させることができます
異好性抗体
表面受容体
C3d受容体
感染性単核球症の診断
間接凝集試験
可溶性抗原または抗体
検出できません
AFP抗原
順方向間接凝集試験
既知の抗原
抗体の検査
凝集は陽性です
先に進むと、最初に抗原があるので、それは既知の抗原です
抗原感作担体
逆間接凝集試験
既知の抗体
試験抗原
凝集は陽性です
抗体感作キャリア
応用
ラテックス妊娠診断
モットー：物事を正しくし、物事を正しくする
抗体は比較的フラットです
違い：抗原または抗体感作担体
順方向間接阻害凝集試験
順番に
既知の抗体
試験抗原
凝集は陰性です
結果の解釈も逆になります。
しかし、抗体はキャリアを感作しないことが知られています。
もう 1 つのアレルゲン物質 2
プロセス
応用
炭疽菌のアスコリ検査
逆間接阻害凝集試験
順番に
既知の抗原
抗体の検査
凝集は陰性です
結果の解釈も逆になります。
しかし、既知の抗原は感作担体ではない
もう 1 つのアレルゲン物質 2
相乗的凝集試験
キャリアとしての黄色ブドウ球菌プロテイン A (SPA)
IgGのFcセグメント（感作粒子担体）への非特異的結合
検査抗原（不明）
可溶性抗原の場合
細菌ウイルスの直接検出
間接的血球凝集検査
キャリア
赤血球
よく使われる
羊、ウサギ、鶏
O 型ヒト赤血球
O型表面には抗原がないため
赤血球上の抗原または抗体のコーティング
形態感作ベクター
単純な赤血球は感作キャリアではありません
赤血球が受動的に凝集しているかどうかを確認する
結果
ポジティブ
凝集
穴の底のあたり
ネガティブ
沈降穴の底
小さな点
梅毒のTPPA検査のようなもの
ラテックス凝集試験
間接凝集試験
ラテックス粒子
吸着性タンパク質
原理
吸着された抗原
抗体の検出
抗原
変性 IgG
リウマチ因子（RF）
リウマチ因子とも呼ばれる
溶血素「O」
抗溶血素「O」（ASO）
使用されるベクトル
ポリスチレンラテックス
直径
0.8um
特徴
試験管法
スライド方式
接着の強さ
違い
凝固検査より感度が低い
ゼラチン凝集試験
間接凝集試験
ピンク色のゼラチンに抗原を吸着させたもの
抗体の検出
テスト可能なウイルス
抗グロブリン検査（クームス検査）
クームズテスト
自己免疫性溶血の検出
赤血球に対する不完全な抗体を検出する方法
抗体の分類
完全抗体
IgM
五量体なので
赤血球同士がくっつき、架橋結合を起こす可能性がある
肉眼で見える
不完全な抗体
特徴
抗原に結合することができる（感作）
目に見える凝集反応が発生してはなりません
IgG抗体の断片
免疫抗体はほとんどが不完全な抗体です
タイプ
直接抗グロブリン検査
表面境界の決定
新生児 Rh 溶血性疾患の診断価値があります。
細胞が感作されているかどうかを検出するためです
間接抗グロブリン検査
無料を決定する
母体の Rh(D) 抗体 (抗 D 抗体) の検出
応用
血液適合検査
抗D抗体
新生児溶血性貧血症の診断
細菌に対する不完全な抗体の検出
冷結露試験
寒冷凝集素症候群
自己免疫性溶血の検出
IgM/マクログロブリン/寒冷凝集素が原因
に分け
単一植物型
ハイブリッド
プロセス
より低い温度で
抗体と自己赤血球凝集
手と足のチアノーゼの症状
気温も20～25℃まで上がります
補体が活性化されて溶血が起こる
気温も37℃も上がりました
完全に可逆的な分離
症状が消える
冷結露試験
試験管内で
最適温度 0～4℃
37℃で解離
結果の判定
ネガティブ
寒冷凝集素力価 <1:32
ポジティブ
寒冷凝集素力価＞1:64
診断
原発性非定型肺炎
沈殿反応
循環免疫複合体
最適降水温度
4℃
液体中での沈殿反応
免疫比濁法
意味
バッファ
リン酸塩溶液
濁度増加剤
ポリエチレングリコール (PEG)
免疫複合体 (IC) 粒子を迅速に形成できる
抗体が若干過剰で固定化されている場合
ICは測定する抗原の量に比例します
原理
自動分析システムと組み合わせた光学測定機器
免疫濁度の分類
免疫比濁法
透過光
複合体 (IC) に光が当たらない
複合体（IC）に当たる光は吸収されます
吸光度値（光を吸収する量）とIC量
正の相関
ICが多いほど吸光度は高くなります
免疫比濁法
散乱光
複合体（IC）に当たった後に屈折する光
粒子径が入射光の波長よりも著しく小さい場合
散乱光分布は比較的均一です
レイリー・スキャッターになる
散乱光強度の検出
正の相関
ICの数が多いほど散乱光が強くなる
分類
終点散乱比濁度測定
抗原抗体が平衡状態に達した後
複合体の量を決定する
速度散乱比濁度測定
免疫グロブリンアッセイ
最も敏感な
最も適切なアプローチ
酵素活性測定用
より正確な
速度論的決定方法
応用
2 番目のピーク信号が表示されます
最初のピークシグナルは、検査対象のすべての抗原によって生成されます。
2 番目のピーク信号が表示されない
検査された抗原の量が多すぎる
前提
抗体の過剰摂取
抗体過剰摂取検出システム
過剰な抗体を確実にするために開発された検出システム
フック効果を防ぐ
抗原の過剰摂取（アフターゾーン現象）を防ぐ
抗原過剰の閾値限界
影響を与える要因
抗体の品質
強い特異性、高い効力、および強い親和性
R型抗体を使用する
検出試薬
臨床応用
テスト免疫療法の内容
最も一般的に使用される方法
血清アポリポタンパク質を検査する
最も一般的に使用される方法
免疫グロブリンの検出
IgG、IgA、IgM
高含有量
免疫グロブリンサブクラスの検出
補体C3、C4
尿中の微量タンパク質
治療薬濃度
ゲル内沈降試験
一方向寒天拡散試験
手動で行うことができます
抗原検査のみ可能
原理
定量的な量の抗体を寒天ゲルに混合します。
寒天プレート
プラスチック板にドリルで穴を開けます
血清（抗原）をウェルに注入します
プレート法
0.9%寒天ゲル中
37℃、自由膨張
リング拡散
試験管法
0.7%アガロース溶液
50℃での拡散
目に見える降水リングの形成
正の相関
抗原含有量が多いほど
降水リングが大きいほど
標準曲線を作成する必要がある
異なる濃度の 5 ～ 7 種類の抗原標準を同時に追加します
沈降リングの直径を決定する
横軸
抗原標準濃度
Y軸
沈降リング直径
多型抗原を測定するためのモノクローナル抗体の応用
測定値
低い側
独身でさらに低い
ポリクローナル抗体を用いたMタンパク質の測定
測定値
ハイサイド
どのくらいの高さ
方法
試験管法
プレート法
計算方法
マンチーニ曲線
大きな分子の抗原および長時間の拡散（48 時間以上）に適しています
沈降リング直径の二乗 d2 は抗原濃度 c と線形関係があります。
c/d2=k
k: 定数
フェイヒーカーブ
低分子抗原と短い拡散時間に適しています
logc/d=k
c: 抗原濃度
d: 沈降リング直径
k: 定数
臨床的な意義
基幹病院で利用されている
IgG、IgA、IgM、補体C3およびC4含量の測定
ポリクローナル抗体を用いてMタンパク質を測定する場合
沈降の輪が広がる
方法論的評価
あまり敏感ではない
検出時間
48～72時間
2～3日
標準曲線も同時に作成する必要があります
定量用
二元寒天拡散試験
形状
試験管法
まず、抗体を含む寒天を試験管に加えます。
固まったら、真ん中に普通の寒天を入れます。
冷却後、抗原溶液を上層に加える
配置後、抗原と抗体は中間寒天層に自由に拡散します。
プレート法
二つの穴
抗原
銀
抗体
アブ
結果の判定
抗原ウェルに近い
高レベルの抗体
抗体ウェルの近く
高い抗原含有量
遠ざかった人はそうなる可能性が高くなります
アークが出現
分子量が小さいので
すぐに広がる
遅い拡散円が小さいため、局所濃度が大きい
沈殿線は分子量が大きい側に曲がります。
誰の頭が小さいですか?
抗体力価測定
チェッカーボード滴定（ファウンダー滴定法）
二相性免疫拡散検査
目的
最適な作業濃度を選択してください
強い陽性を示した最高希釈率
強い陽性を示す最低濃度
免疫電気泳動
原理
直流電界
電気泳動解析とゲル拡散（沈殿反応）を組み合わせたもの
よく使われるジェル
アガロース
集中
0.8%-1.0%
一般に、ゲル中のタンパク質分子の電気泳動は、自由電気泳動とほぼ同じです。
ゲル中の緩衝液の比率により、
99%
原理
抗原と抗体はマイナスに帯電しています
抗原はよりマイナスに帯電しているため、
陰極をつける
陽極に向かって泳ぐ
抗体はマイナスに帯電しにくいため
陽極をつけます
電気浸透力の作用下で
電気浸透力: 水は陽極から陰極へ泳ぐ
カソードに向かって泳ぐ
対流免疫電気泳動
IgG1 と IgG2
電気浸透によるもの
カソードに向かって移動します
IgG3 と IgG4
マイナス電荷のせいで
ポジティブな方向へ進む
分類
対流免疫電気泳動 (CIEP)
電気泳動と組み合わせた二相免疫拡散
抗原陰極
抗体陽極
IgG抗体
電気浸透によるもの
抗原と抗体の最適な比率で乳白色の沈殿ラインが形成されます。
逆負極回帰と呼ばれる現象
影響
電気浸透
抗体の電気泳動力は電気浸透力より低い
だから陰極に向かって泳いでください
pH
分子はどれくらいの電荷を持っていますか?
緩衝液のpHに依存します
緩衝液のpH値が等電点から遠ざかるほど
課金すればするほど
より速く泳ぐ
等電点
タンパク質が等しい正電荷と負電荷に解離するときの溶液の pH 値
ロケット免疫電気泳動 (RIE)
測定範囲
μg/ml以上
電気泳動と組み合わせた単相免疫拡散
ピークの高さは抗原の量に比例します
山頂はぼんやりとした雲の形をしている
電気泳動が終点に達していない
オートラジオグラフィーとの組み合わせなど
感度の向上
1000回
免疫電気泳動 (IEP)
ゾーン電気泳動と組み合わせた二相免疫拡散
プロセス
まずはゾーンテクノロジー
未使用のゾーンを検出する
電気泳動停止後
次に血清（抗体）を並列抗体タンクに入れます。
一つ穴を開けて美容液を入れるだけ
弧状の沈降ラインを見てください
結果
測定可能な
Mプロテイン
臨床的な意義
定性試験
多発性骨髄腫およびマクログロブリン血症の血清タンパク質分析
Mプロテイン
γとβの間
抗原成分の同定
モノクローナルガンマ抗体の同定
免疫グロブリンの種類を大まかに反映できる
大まかにしか反映できない
正確ではありません
IgG
αと遅いγの間
IgA
βとγ1
IgM
β2またはγ
IgD
βまたはγ
IgE
βからγを遅くする
免疫固定電気泳動 (IFE)
最初に報告する人
アルフォンソ
ゾーン電気泳動と組み合わせた免疫化学的手法（抗原抗体結合反応）
原理
まずはゾーンテクノロジー
さまざまなゾーンを検出する
次に、カッパ軽鎖とラムダ軽鎖を抗体（カッパ軽鎖とラムダ軽鎖に対する抗体）または重鎖抗血清（重鎖に対する抗体）で覆います。
複雑な沈殿物の形成
洗い流して染める
カラーゾーンをレンダリングします
臨床的な意義
Mプロテイン
最も一般的に使用される方法
モノクローナル抗体
定性的および型別（軽鎖および重鎖の種類）の同定
好ましい方法
免疫グロブリン軽鎖の同定、尿中の毎週のタンパク質の検出、κおよびλのタイピング
結果グラフ
G、A、M、カッパ、ラムダ鎖
SPは総血清タンパク質の略です
ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）
原理
ゾーン電気泳動
ゲルはネットワーク構造を持っています
モレキュラーシーブ効果がある
分子量が小さいほど
もっと早く動け
複数のバンドを分離可能
欠点がある
分子量が近いタンパク質は分離できない
プロセス
別々のバンド
分離効果は肉眼では見えません
電気泳動バンドは染色後にのみ表示されます
ゲルの上層にスタッキングゲルを追加し、分離効果を向上させます。
泳ぎを促すコンパクトプロテイン
血清タンパク質を分離すると、
20以上の成分
等電点電気泳動
原理
特別なバッファーがゲル内に pH 勾配を作成します
よく使われるジェル
ポリアクリルアミドゲル
SDSと同じ
特徴
単離された分子量は類似している
異なる等電点を持つタンパク質
ラジオイムノアッセイ
ラジオイムノアッセイ
一般的に使用される放射性核種
125I（ヨウ素125）
125I（ヨウ素125）標識法
直接表記
ペプチド、タンパク質、酵素のヨウ素化標識
方法
クロラミンT(ch-T)法
ラクトパーオキシダーゼの標識方法
間接的なラベル付け
適用対象
ヨウ素標識基を持たない小分子化合物
方法
接続表記法（ボルトン・ハンター法）
必要とする
放射化学的純度
＞95%
免疫活動の要件
＞80%
放射性核種マーカーの溶出液に安定剤を添加
同量の卵白1%
特定の放射能
マーカーの単位化学量に含まれる放射能の強度
放射化学的純度
テスト方法
トリクロロ酢酸を使用して、テストするサンプル内のすべてのタンパク質を沈殿させます。
インスリン標準品
125I インスリンの抗血清への最大結合を 50% 減少させます。
投与量X
プロインスリン投与量 Y
交差反応率=X/Y
力価
抗血清の段階希釈後
標識抗原と反応する
方法論
高感度
サンプルと試薬
投与量を減らす
強い特異性
良好な再現性
使いやすい
標準化が簡単
欠点がある
放射能汚染
臨床応用
ホルモン（hCG、インスリンなど）、薬物（ジゴキシン、モルヒネ、バルビツール酸塩）、腫瘍マーカー（AFP、CEA）、微量タンパク質
それらはすべて微量物質です
ラジオイムノアッセイ (RIA)
リア
原理
競合阻害反応
競争がある
それで速度が遅くなる
測定のみ可能
抗原
ユニット
cpmまたはcps
に反比例
検査する抗原の数が増えるほど
放射性物質が少ないほど
プロセス
標識抗原と既知の抗体
全て限定です
標識抗原抗体複合体 (B) と結合していない標識抗原 (F) を分離します。
方法
二次抗体沈殿法
ポリエチレングリコール（PEG）沈殿法
PEG は、抗原抗体複合体などの高分子タンパク質を非特異的に沈殿させることができます。
小分子抗原を沈殿させない
欠点がある
より多くの非特異的な沈殿
温度が30℃を超えると沈殿物が再溶解しやすくなります。
PR試薬法
二次抗体とPEGの利点を保持
投与量を節約し、素早く簡単に分離
活性炭吸着法
免疫放射分析 (IRMA)
イルマ
原理
非競合的結合反応
抗原を検出できる
抗体検査もできる
シングルポイントIRMA
反応系
標識抗体
検査対象の抗原または抗体
固相上にコーティングされた抗原
違い
原理
まず過剰な標識抗体を使用して検査対象の抗原と反応させます。
フォームコンプレックス
上清中に
上清中の放射線量を測定する
次に、固相抗原を使用して未結合の標識抗体を結合します。
そしてそれを分離します
抗原を検出できる
抗体検査もできる
2 サイト IRMA
ダブル抗体サンドイッチ法
反応系
標識抗体
検査対象の抗原
固相上にコーティングされた抗体
違い
原理
ダブル抗体サンドイッチ法
残った標識抗体を洗い流す必要がある
固相放射能の測定
抗原検査のみ可能
比較した
応用
ラジ細胞
表面には多数の C3b、C1q、C3d 受容体が存在します。
にやにやしない
これらの受容体を利用して、補体と結合する循環免疫複合体に結合します。
次に、放射性核種標識抗ヒト IgG を追加します。
検出可能な循環免疫複合体
蛍光免疫技術
概要
最も初期に確立されたマーキング技術
定量的な測定には使用できません
コンセプト
フルオレセイン
発光に直接関与するマーカー
蛍光
基底状態分子 (安定、低エネルギー)
特定の波長の光を吸収した後
励起一重項状態（より高いエネルギー）
素早く基底状態に戻す場合
特定の励起発光プラントから光を放射します
蛍光効率
吸収された光エネルギーを蛍光に変換するフルオレセインの割合
蛍光の消光
特定の物理的および化学的要因の下では、蛍光が弱くなったり、消失したりすることがあります。
紫外線照射
高温
蛍光消光剤を使用して非特異的な蛍光を除去します
メチレンブルー
エバンスブルー
基本的なフクシン
ヨウ素溶液
蛍光物質
蛍光顔料
フルオレセインイソチオシアネート (FITC)
黄緑色
分子量
389.4kDa
最大吸収光（励起波長）
490～495nm
最大発光光量
520～530nm
最も広く使用されている
アドバンテージ
人間の目は黄緑色に敏感です
通常、切片標本では赤色蛍光よりも緑色蛍光が少なくなります。
テトラエチルローダミン (RB200)
オレンジ
最大吸収光（励起波長）
570nm
最大発光光量
595～600nm
水に不溶
エタノール、アセトンに可溶
長期保存可能
テトラメチルローダミン イソチオシアネート
オレンジレッド
最大吸収光（励起波長）
550nm
最大発光光量
620nm
FITCとの二重ラベルが可能
フィコエリトリン (R-RE)/(PE)
オレンジ色
最大吸収（励起波長）
565nm
488nm
最大発光光量
620nm
575nm
水に不溶
エタノール、アセトンに可溶
FITCとの二重ラベルが可能
広く使われています
488nm励起光を共有
その他の蛍光物質
ランタニドキレート
ユウロピウム (Eu3)
最も広く使用されている
適用対象
時間分解蛍光免疫測定法
酵素作用後に蛍光を発生
蛍光効果自体はありません
酵素の作用により蛍光を発生させることができる
蛍光抗体の調製
抗体のフルオレセイン標識
方法
撹拌方法
透析
標識抗体の精製
方法
透析
クロマトグラフィー分離
抗体の同定
抗体価
二相性免疫拡散検査
抗原含有量が1g/Lの場合
力価>1:16
影響を与える要因
温度
気温が低いほど
より高い効率とより高い強度
pH
蛍光色素に依存する
例えば、FITCは酸性下では減少します。
ランタニドキレートは酸性度で強化される
集中
濃度が高すぎる
自己消火現象
高すぎるので分子が激しく衝突するはずです
エネルギーを失う
溶媒
エタノール溶液中の蛍光不純物
加工が必要です
エンハンサー
染色のスピードアップ
着色効果には影響しません
蛍光顕微鏡
光源
励起光源
高圧水銀ランプ
キセノンランプ
ハロゲンランプ
フィルター
サーマルフィルター
ライトルームのコンデンサーの前
赤外線の通過を遮断し、熱を遮断します。
励起フィルター
光源と対物レンズの間
紫外可視波長範囲の光を選択的に透過します。
分類
UVフィルター（UG）
275～400nmの紫外線を透過します
最大透過率
365nm
ブルーUVフィルター(BG)
325～500nmの青色紫外線を透過します。
最大透過率
410nm
吸収フィルター
対物レンズと接眼レンズの間
励起光を遮断し、発せられた蛍光を透過させます。
暗い背景
蛍光を表示する
観察しやすい
強い刺激から目を守る
透過率範囲
410～650nm
分類
OG
オレンジイエロー
GG
薄緑がかった黄色
他の
FITCを見る
励起フィルター
BG12
吸収フィルター
OG4 または GG9
時計RB200
励起フィルター
BG12
吸収フィルター
OG5
蛍光抗体技術
としても知られている
蛍光免疫組織化学
組織または細胞の反応に必要
蛍光顕微鏡検査
顕微鏡で見る必要がある
プロセス
標識抗体
標識できるのは抗体のみです
セクション内の組織または細胞抗原と反応します
洗浄・分離後
顕微鏡で複合体や部品を観察する
臨床的な意義
組織細胞抗原の特徴付けまたは位置特定
位置
どの部分が光るのか（核、細胞質、エンベロープなど）
抗原局在検査が可能
蛍光抗体技術
酵素組織免疫化学
標本の準備
セルが必要です
血清と血漿は受け入れられません
ソース
組織切片、組織捺染物、細胞塗抹標本、微生物塗抹標本、剥離細胞塗抹標本、濃縮体液標本（胸水および腹水の沈殿物）
種類
直接法
抗原と直接反応する
抗体に標識されている
抗原のみ確認可能
特徴
最高の特異性
非特異的染色が最も少ない方法
高い直接特異性
感度が悪い
非特異的な蛍光染色因子が少ない
間接法
既知の抗原を使用して未知の抗体をテストする
一次抗体
ヒトIg
二次抗体
ホタルまたは酵素標識されたヒツジ/ウサギ Ig
抗体のELISA検査についても同様です。
二次抗体あり
二次抗体に標識されています
一次抗体に結合したフルオレセイン標識二次抗体
抗原を検出できる
抗体検査もできる
直接法と比較したメリット
さまざまな抗原を検出する
蛍光抗体を準備するだけ
フルオレセインは二次抗体に標識されているため
検出
抗核抗体
最も効果的なのは
二重ラベル法
異なる抗体をそれぞれFITCとローダミンで標識します
同じ標本を染色する
臨床応用
他の日常的なテストの代替にはなりません
自己抗体検査
血清中の抗核抗体 (ANA)
病原体の検出
病原体を特定する
血清中の特異的抗体レベル
免疫病理学的検査
表面抗原および受容体の検出
リンパ球と部分集団の同定
フローサイトメトリー
蛍光免疫測定法の種類
時間分解蛍光免疫測定法 (TRFIA)
原理
ランタニド元素を含む
抗原または抗体を標識する
時間分解技術を使用して決定
時間分解能
非特異的蛍光
蛍光寿命が短い
ランタニドキレート
長い蛍光寿命
非特異的な蛍光減衰後
蛍光シグナルを再度検出する
ストークス変位
励起スペクトルと発光スペクトルの波長差
ストークス変位が小さい場合
励起スペクトルと発光スペクトルは重なり合うことが多い
互いに干渉し合う
ランタニドキレートは大きな変位を持ちます
励起光の散乱干渉を簡単に除去
シグナル強度
蛍光は酸性増強溶液で増強できます
臨床応用
ラジオイムノアッセイに似たもの
微量物質の検出
検出するタンパク質がもう 1 つ増えました
蛍光偏光免疫測定法 (FPIA)
原理
抗原抗体競合反応を利用する
標識抗原と複合体の蛍光偏光度の違い
応用
血液または尿中に
小分子の測定
薬物濃度
最初の方法
蛍光酵素免疫測定法
原理
酵素反応の蛍光基質を利用し、抗原と抗体の反応を利用する
前のものは二重抗体サンドイッチ法です。
基質を追加する
プロセス
基質 4-MUP は蛍光を発しません
ALPの刺激を受けると蛍光を発します。
フローサイトメトリーアナライザー (FCM)
概要
集積光学、流体力学、電子計算機技術、およびフルオレセインの特性を利用して蛍光を生成
細胞ごとのマルチパラメータ定量測定・選別技術
一般的に使用される光源
放射される光
フルオレセインによって吸収される光
レーザ
構造
液体流動システム
光・信号変換試験システム
信号処理および増幅用のコンピュータ システム
原理
特定の蛍光燃料で標識された単細胞懸濁液およびシース液
フロールームに入る
細胞懸濁液をシース液に封入した単細胞液柱の形成
液柱と水平レーザー光（励起光源）
垂直交差点
データ
前方散乱光 (FS)
粒子サイズ
側方散乱光（SS）
粒子内部の複雑さ
表面平滑度
5つのカテゴリーと同じです
蛍光（FL）
粒子によって染色された蛍光部分の数
PI染色
細胞周期
一般的に使用される DNA マーカー
PI（ヨウ化プロピジウム）
一般的に使用される励起波長
488nm
一般的に使用される発光波長
620nm
仕分け収穫率
収穫率と純度の間には対応関係があります
高純度の細胞選別
収穫率は比較的低い
シース液
効果
サンプルストリームをラップアラウンドする
サンプルの流れをノズルの中心に置く
精度保証
細胞がノズルの壁に近づき、穴を塞ぐのを防ぎます。
応用
T細胞サブセット
最高の検出感度
抗 Ig 蛍光抗体で染色された B 細胞
表面は時間の経過とともに蛍光変化を示します
リング、スポット、キャップ、消える
酵素免疫測定法
酵素免疫測定法
酵素の効率的かつ特異的な触媒活性を利用する
酵素複合体
酵素標識された抗原または抗体
触媒基質の生物濃縮
少量の酵素で大量の物質を反射できる
マーキング技術
抗原または抗体
ポジショニング、定性的、定量的
特徴
酵素と基質
酵素の必要量
活発な活動
高純度
抗原や抗体と結合しやすい
標識後の活性は安定しています
抗原や抗体の免疫反応性に影響を与えません
特異性
検査対象のサンプルには、標識酵素と同一の内因性酵素または阻害剤が存在しません。
酵素触媒作用によって生成される製品
判断や測定が簡単
よく使われる酵素
ホースラディッシュペルオキシダーゼ (HRP)
基板
テトラメチルベンジジン (TMB)
最も一般的に使用される
青
良い安定性
光を避ける必要がなく、変異原性の影響もありません
欠点がある
水溶性が悪い
O-フェニレンジアミン (OPD)
最も感度の高い色原体基質の 1 つ
オレンジイエロー
不安定な
錠剤または粉末として入手可能
使用前に戻す
コンセプト
野菜由来
糖タンパク質
糖度18%
構成
無色の糖タンパク質
主な酵素
酵素活性に依存しない
最大吸収ピーク
275nm
鉄の血のような赤
補酵素
酵素の活性基
最大吸収ピーク
403nm
最も一般的に使用される
アルカリホスファターゼ (AP/ALP)
基板
p-ニトロフェニルホスフェート (p-NPP)
色
黄色
コンセプト
大腸菌または子牛の腸粘膜から抽出
分類
細菌性
腸粘膜
高い活性
β-ガラクトシダーゼ (β-Gal)
基板
4-メチルウンベラノイル-R-D ガラクトピラノシド (4-MUU)
特徴
HRPよりも高感度
30～50回
ただし、測定するときに必要なのは、
蛍光光度計
コンセプト
大腸菌抽出
人間の血液にはこの酵素が欠如しています
測定中に内因性酵素による干渉がない
酵素マーカー
マーキング方法
グルタルアルデヒド架橋法
改良過ヨウ素酸ナトリウム法
HRP (西洋わさびペルオキシダーゼ) 標識抗原および抗体
最も一般的に使用される方法
固相担体
ELISA で最も一般的に使用される固相担体
ポリスチレン
覆われた
抗原または抗体を固体支持体に結合させるプロセス
バッファ
PH9.6
炭酸緩衝液
閉まっている
1% ～ 5% のウシ血清アルブミンまたは 5% ～ 20% の子ウシ血清
またまたカバーされました
非特異的な発色を排除する
血清中の不純物タンパク質の侵入を防ぎ、結果を妨げます。
分類
酵素免疫組織化学
病理学で使用される
組織切片または他の標本における抗原の局在
抗原のみ
ただ位置決めするだけ
酵素免疫測定法 (EIA)
液体中の抗原または抗体の定性または定量
均一系酵素免疫測定法
酵素増幅免疫測定技術 (EMIT)
クロナーゼドナーイムノアッセイ (CEDIA)
抗原に標識された酵素は不活性です 特定のバインド後にのみアクティブになります
不均一酵素免疫測定法
固相酵素免疫測定法
液相酵素免疫測定法
必要かどうかに応じて結合酵素マーカーと遊離酵素マーカーを分離して区別します
不均一相に分離
離婚には別居が必要
均一系酵素免疫測定法
分離せず均一
キャリア不要
酵素免疫測定法
競争法
原理
結合した酵素は活性を失います
酵素活性をテストする
足りないのは結合酵素です
アドバンテージ
低分子抗原（ホルモン）またはハプテン（薬物）の測定用
不均一酵素免疫測定法
不均一な相分離
原理
結合した酵素は活性を維持します
基板を洗うだけでいい
違うフェーズだよ
分類
液相酵素免疫測定法
極微量の短いペプチドホルモンの測定
薬物およびその他の小分子ハプテン
感度
ngからページへ
固相酵素免疫測定法
キャリアとして固体支持体を使用する
一般
酵素結合免疫吸着検定法 (ELISA)
酵素結合免疫吸着検定法 (ELISA)
抗原を検出する方法
二重抗体サンドイッチ法（二段階法）
プロセス
固相抗体
まず特異抗体を固相担体に接続します
抗原抗体反応
検査する抗原を追加します
固相抗体抗原複合体の形成
最初の洗濯
酵素標識抗体
酵素標識抗体を追加する
固相抗体-抗原-酵素標識抗体複合体の形成（試験対象の抗原の2つの異なるエピトープ上）
二度目の洗濯
発色
基材を加えて発色させる
着色産物の量は検査する抗原に比例します
適用対象
最も一般的に使用される方法
少なくとも 2 つのエピトープを持つ多価抗原
高分子抗原
B型肝炎表面抗原、α-フェトプロテイン、hCGなど
細胞外可溶性接着分子
可溶性抗原
2サイト（ワンステップ法）
プロセス
検査対象の抗原と酵素標識抗体を組み合わせます。
同時に反応に参加する
2 つの抗体は互いに干渉しません
1回洗濯した後
基材を加えて発色させる
欠点がある
検査する抗原の濃度が高すぎる場合
フック効果（バックバンド現象）
演色性の低下
偽陰性
サンプルは希釈して再検査可能
競争法
に反比例
測定する抗原の量が多いほど
色の少ない商品ほど
プロセス
固相抗体
まず特定の抗体を固相担体に接続します（数量限定）
抗原抗体反応
検査対象の抗原と酵素標識抗原を加えます（数量限定）
競合する結合特異的抗体
洗浄
発色
基材を加えて発色させる
適用対象
単一のエピトープのみを持つ小分子抗原
薬、ホルモンなど
抗体を検出する方法
間接法
C型肝炎ウイルス抗体
プロセス
固相抗原
抗原を固相担体にコーティングする
抗原抗体反応
テストする抗体を追加します
検査対象となる固相抗原抗体複合体の形成
最初の洗濯
酵素標識二次抗体
酵素標識二次抗体（ヤギ抗ヒトIgG）を追加
固相抗原・検出対象抗体・酵素標識二次抗体複合体の形成
二度目の洗濯
1 つのマーカーで複数の分析物を検出
酵素標識二次抗体はあらゆる抗原抗体複合体を検出可能
発色
正比例します
競争法
B型肝炎ウイルスコア抗体（HBcAb）、B型肝炎ウイルスe抗体（HBeAb）
に反比例
測定する抗体の量が多いほど
色の少ない商品ほど
プロセス
固相抗原
抗原を固相担体にコーティングする
限定版
抗原抗体反応
検査対象の抗体と酵素標識抗体を追加（数量限定）
競合する結合特異的抗体
洗浄
発色
基材を加えて発色させる
影響を与える要因
検体の遠心分離が不十分
フィブリンの存在
酵素ラベルはフィブリンにくっつきます。
結果的に洗い流せなくなる
暗色
偽陰性
溶血
溶血は色が濃いので
偽陰性
ダブル抗原サンドイッチ法
感度と特異度
間接法より高い
応用
B型肝炎表面抗体の検出
捕獲方法
逆間接法とも呼ばれる
プロセス
固相担体上にコーティングされたIgMに対する二次抗体
検査する検体の追加
IgMは固相担体によって捕捉されます
特定の抗原を追加する
酵素標識抗体を特定の抗原に追加
固相二次抗体-IgM-抗原-酵素標識抗体複合体の形成
応用
IgM型抗体
応用
細胞外可溶性接着因子
エリサ
主な測定方法
化学発光免疫測定技術
原理
発光分析の高感度と抗原および抗体の高い特異性の組み合わせ
微量の抗原または抗体を検出するための標識イムノアッセイ技術
ラジオイムノアッセイと同じ
マーキング方法
カルボジイミド縮合法
縮合剤
カルボジイミド
過ヨウ素酸ナトリウム酸化法
標識された糖タンパク質は優れた安定性を持っています
落ちにくい
ジアゾニウム塩カップリング法
シンプル、低コスト、優れた再現性
N-ヒドロキシスクシンイミド活性化法
輝き
基底状態
光を吸収する
興奮状態にジャンプする
基底状態に戻る
光子を放出するプロセス
蛍光と同じ原理
化学発光剤
タイプ
直接化学発光イムノアッセイ
アクリジニウムエステルを使用
アルカリ環境下では
抗原（抗体）の直接標識
抗原抗体反応が起こる
化学発光酵素免疫測定法
触媒反応またはエネルギー移動を介して発光に関与する酵素マーカー
ホースラディッシュペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼを使用する
抗原または抗体を標識する
抗原抗体反応が起こる
微粒子化学発光免疫測定法
マーク
アルカリホスファターゼ
電気化学発光イムノアッセイ
エネルギー伝達を通じて酸化反応に参加する
ルテニウムテルピリジン標識抗体（抗原）
トリプロピルアミン
電子供与体（電子受容体）
電場では、電子の移動により電極表面で特定の化学発光反応が発生します。
電気化学と化学発光の 2 つのプロセスを含む
アドバンテージ
ラジオイムノアッセイに似ている
でも汚染は無し
高い感度と強い特異性
NG またはページ
広い直線範囲
マーカーは安定しています
試薬の有効期間が長く、無毒です。
高度な自動化
応用
ホルモン、腫瘍マーカー、薬物濃度、心筋マーカー、ウイルス抗体およびその他の微量生物活性
検出
少量の
ビオチン・アビジン増幅技術
活性化ビオチン
ビオチンのカルボキシル基を利用
化学修飾を使用してさまざまな反応性基の誘導体を作成します
アクティベーション後
さまざまな抗原、抗体、酵素、核酸分子の対応する基に簡単に結合
ビオチン化マーカー
構造
鳴ります
イミダゾール銅リング
アビジン：トリプトファン
IIリング
チオフェン環
結合抗体およびその他の大きな分子
ビオチン(B)
アビジン(A)
高い親和性
迅速性、特異性、安定性を兼ね備えた
アビジン
十字形
ビオチン
三角形
アビジンには 4 つの部位があり、4 つのビオチンに結合できます。
つまり増幅反応が起こるのです
さまざまな種類の活性化ビオチンを標識する
活性化ビオチン
カルボキシル基をラベルできません
彼が化学修飾したものだから
ビオチン-アビジン システム (BAS) の応用
B: ビオチン、A: アビジン、S: 増幅
アビジン標識法
過ヨウ素酸ナトリウム法
ABC法
原理
C：酵素の意味
ビオチン標識酵素
ビオチン結合アビジン
ビオチン化抗体結合アビジン
標識酵素と抗体
それはすべてビオチンです
アビジンはビオチンに結合するためにのみ使用されます
ELISAと併用
ELISAの感度が大幅に向上
酵素には次のようなラベルが付けられています。
ビオチンについて
固相膜免疫測定法
一般的に使用される固相膜
ニトロセルロース膜(NC)
金コロイド
抗原抗体複合体を金粒子で標識
顕微鏡下で
暗褐色の粒子
肉眼
赤またはピンクの斑点
hCG
hCGの検出
モノクローナル抗体金コロイド検査
最高の感度
排卵時のhCG検査
交差反応を避けるために
モノクローナル二点酵素免疫測定法
8～10週間
ピークに達する
血清中のhCGは尿中よりわずかに高い
胎盤の重量が増加しても分泌量が増加しない唯一のホルモン
奇胎妊娠と正常妊娠の区別
hCG濃度定量検査
分類
点状金免疫濾過試験
NCフィルムについて
液体は垂直に下向きに流れます
肺の衣服のような金コロイド
ドットゴールドイムノクロマトグラフィーアッセイ
NCフィルムについて
液体の水平流
妊娠検査薬のようなもの
酵素結合免疫スポット検査 (ELISPOT)
測定可能なB細胞
特異的な抗体を分泌する
抗体分泌量も測定可能
測定可能なT細胞
サイトカイン分泌T細胞
ウェスタンブロット/WB
プロセス
三段階
SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）
ゾーン電気泳動
電気転写
転写電気泳動条件下で
ニトロセルロース膜（NC膜）への転写
タンパク質を固相メンブレンにブロットする
まだ肉眼では見えない
酵素反応検出
ブロットタンパク質（抗原をコーティングした固相担体に相当）
特定の抗体および酵素標識二次抗体と反応します
基材を加えて発色させる
包括的な SDS-PAGE および ELISA
臨床応用
HIV
確認検査
抗体成分の検出
gp41/gp120/gp160が表示されます
2つのストリップが入っています
彼が死んだら、120番に電話しても治りません。
gp120はCD4に結合します
CD4 T細胞を破壊する
CD4/CD8
比率が減少する
抗抽出抗原抗体測定法（ENA抗体）
サザンブロット
核酸を検出するためのブロッティング方法
免疫組織化学
概要
免疫組織化学
標識された特異的抗体
抗原の位置を特定し、定量化し、定性的に同定するための検査
抗原検査のみ可能
検体源
生体組織
組織切片
各種体液、穿刺液（血清、血漿は細胞がないため不可）
汚れやプリント
培養細胞
生細胞スライド
標本固定の目的
凝固タンパク質
細胞内酵素の働きを止める
自己消化を防ぐ
細胞の形状と構造を維持する
細胞の抗原性を維持する
細胞層の脱落を防ぐ
抗体の結合を妨げる脂質を除去する
細菌の増殖を抑制する
防食
免疫組織化学プロセス
抗原の抽出と精製
検査対象の抗原
動物の免疫化と細胞融合
特異的抗体の調製
ハイブリドーマ技術
抗体の精製
マーカーを抗体に結合させる
標識抗体を形成する
検体の取り扱いと準備
一次試薬
抗体
モノクローナル抗体
組織のみを検出できるため、抗原である必要があるため、抗原のみを検出できます
重要なステップ
免疫染色
免疫蛍光組織化学
フルオレセイン標識抗体
抗原検査のみ可能
特徴
検体中の複数の抗原を同時に検出可能
酵素免疫組織化学法と比較した利点
蛍光顕微鏡観察時
予防
染色直後の標本を観察する
一つの視野を長時間観察することはお勧めできません
無蛍光レンズオイルを使用する
暗室観察
間違い
37℃で観察が最適
酵素免疫組織化学
酵素標識された抗体（抗原）を使用する
抗体や抗原の測定が可能
分類
酵素標識抗体免疫組織化学技術
酵素免疫測定法と同じ
非標識抗体免疫酵素組織化学染色・酵素架橋法
酵素は抗体上で標識されていません
三次抗体としての抗酵素抗体
二次抗体として架橋抗体を有する
試験抗原特異的な抗体-架橋抗体-抗酵素抗体複合体の形成
非標識抗体酵素染色-PAP法（ペルオキシダーゼ-抗ペルオキシダーゼ法）
三次抗体は違います
3次抗体（抗酵素抗体）と酵素は可溶性複合体（PAP複合体）を形成します。
この複合体は 2 つの抗酵素抗体と 3 つのペルオキシダーゼ酵素で構成されています。
五角形構造
非常に安定した
移植免疫
分類
自家移植
移植片は宿主自体に由来します
拒絶反応なし
同系移植
遺伝的に同一の個体間の移植
一卵性双生児
拒絶反応は通常は起こらない
同種移植
同じ種だが遺伝子型が異なる個体間の移植
拒絶反応を引き起こす標的抗原
主要組織適合性抗原 (MHA)
6 番染色体上の主要組織適合性複合体 (MHC) の主要組織適合性抗原 (MHA)
ヒト白血球抗原 (HLA) としても知られています。
ヒトMHC=HLA
分類
HLA I
HLA-A、HLA-B、HLA-C
すべての有核細胞表面
ほとんどのリンパ球
神経細胞
核がない
HLA-C
移植免疫プロセスに重大な影響を及ぼさない
HLA II
HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP
プロフェッショナルAPC細胞、活性化T細胞、胸腺上皮細胞に分布
免疫グロブリン様ドメイン
α2およびβ2機能ドメイン
抗原ポリペプチド結合領域
α1およびβ1機能ドメイン
CD4結合領域
β2機能領域
HLA-DR
最も免疫原性の高い
移植拒絶反応にとって最も重要なこと
HLA-DR抗原を検出するCDC法
検査対象の細胞
精製されたB細胞
クラス II タンパク質は B 細胞とマクロファージ (プロフェッショナル APC) の表面に存在するため
HLA-I クラスの干渉は排除されていない
精製されたB細胞を含む
生物学的タイピング
PCR-RFLP
PCR-SSO
クラス II HLA タイピングに最も広く使用されている方法
PCR/SSP
原理
HLA 対立遺伝子用の配列特異的プライマー (SSP) のセットを設計する
検査対象のDNAのPCR増幅
得る
対立遺伝子特異的増幅産物
PCR-SSCP
ミナミマグロ
最も正確で直感的な方法
しなければならない
検査対象の細胞の DNA 分離
遺伝子座、グループ、または対立遺伝子特異的なプライマーを使用した PCR 増幅
増幅産物の精製と配列決定
測定された遺伝子配列とジーンバンクの既知の DNA 配列の比較
HLAタイピング細胞学
ネガティブタイピング
標準セル
表面に LD 抗原を 1 つだけ持つホモ接合型細胞
ポジティブタイピング
標準セル
前感作リンパ球
MHC分子の構造と機能
MHC
主要組織適合性抗原をコードする染色体上の密接に関連した遺伝子のグループ
MHC-I
腫瘍細胞は、Tc 細胞が MHC-I を発現している場合にのみ、Tc 細胞によって殺されます。
血小板はMHC-1のみを発現します
MHC-Ⅱ
提示細胞の重要な表面マーカー (APC)
B細胞はMHCクラスIおよびクラスIIを発現できます
ヘルパーCD4 T細胞によって認識される
リボン
アロタイプエピトープ (HLA クラス II 分子の多型部分)
抗原ペプチド結合領域
CD4 および CD8 分子を認識する
Igサンプルエリア
免疫グロブリン様領域：β2ドメイン
HLA分子を細胞膜に固定する
膜貫通領域
および細胞内シグナル伝達
細胞内領域（細胞質領域）
HLA-Ⅱ
抗原ポリペプチド結合領域
α1およびβ1機能ドメイン
免疫グロブリン様ドメイン
α2およびβ2機能ドメイン
CD4結合領域
β2機能領域
MHC多型を決定する要因
MHC遺伝子は複数の対立遺伝子である
共同優勢です
識別経路
直接識別経路
ドナーAPC
ドナー移植抗原 (MHC)
レシピエントのT細胞に提示される
間接的な識別経路
受信者APC
ドナー移植抗原 (MHC)
レシピエントのT細胞に提示される
T細胞によるドナーMHCの認識
認識された分子
加工されたアロタイプ MHC 分子に由来するペプチドです
ドナーとレシピエントの間に1つのアミノ酸の違いがある限り
拒絶反応が起こる可能性がある
タイプ
宿主対移植片反応 (HVGR)
レシピエントによるドナーの拒否
移植片対宿主反応 (GVHR)
ドナーによるレシピエントの拒否
宿主対移植片反応 (HVGR)
分類
超急性拒絶反応
数分以内から 1 ～ 2 日以内
不可逆的な体液性拒絶反応が起こる
速く、強く、不可逆的
体液性免疫反応
主な物質を媒介する
細胞傷害性抗体（細胞傷害性T細胞/キラーT細胞/Tc細胞）
理由
ABOとその他の血液型、Rh血液型の不適合、多胎妊娠、輸血を繰り返している方、臓器移植歴のある方
移植臓器の灌流不良または過度の虚血時間
移植片の不適切な保存と取り扱い
急性拒絶反応
数週間から数か月
最も一般的なタイプ
診断
sIL-2Rと血清クレアチニン値が同時に上昇
3H-TdR 4時間組み込み法
3H-TdR 4 時間細胞形質転換アッセイ
レシピエントの感作された T 細胞を検出する方法
急性拒絶反応危機を予測するための満足のいく検査
急性拒絶反応とウイルス感染の区別
臨床症状が現れる1～5日前
CD4/CD8比の増加
>1.2
急性拒絶反応が起こりつつあることを示します
サイトメガロウイルス感染症
CD4/CD8の減少
<1.08
感染の可能性が高い
慢性拒絶反応
何か月、あるいは何年も
病気はゆっくりと進行します
移植片対宿主反応 (GVHR)
骨髄移植
免疫抑制治療を受けていない場合
HLA-DRに依存
治療前に、骨髄内のすべての細胞を殺すために高線量の放射線療法と化学療法が必要です。
免疫不全を示す
これを表示
ABO 血液型の一致のみが必要です。
レシピエントの体内に入る骨髄には、多数の免疫細胞が存在します。
レシピエントの臓器や組織に対して免疫応答を実行できる
HLA血清学的タイピング
微小補体依存性細胞毒性試験（CDC）/微リンパ細胞毒性試験
HLA-I および HLA-II のタイピング方法
補体依存性細胞毒性試験
遺伝的になりやすい
身元不明
HLA-DP
識別には細胞学的HLAタイピングが必要です
細胞タイピングによる前感作細胞の同定
既知の特異的抗 HLA 標準タイピング血清
既知の抗体
抗 HLA-DR または DQ として特徴づけられる場合
血小板を使用した HLA-I 抗体の吸着
検査対象のリンパ球と組み合わせる
検査対象の抗原
補足を追加する
細胞学的HLAタイピング
識別可能なHLA-DP
使用する標準セル
ネガティブタイピング
表面に LD 抗原を 1 つだけ持つホモ接合型細胞
ポジティブタイピング
前感作リンパ球
二元混合リンパ球検査/混合リンパ球検査
ドナーとレシピエントの HLA 抗原が適合するかどうかを確認します
浸潤量と形質転換細胞の量が最も多い場合
強いMLC陽性を示します
D 抗原の完全な不一致を示します
HLA タイプを決定できません
予防と治療
HLAクロスマッチ
リンパ球交差適合試験（リンパ球交差毒性試験）
リンパ球交差毒性試験
目的
レシピエントの血清中にドナーリンパ球に対する抗体があるかどうか
ドナーリンパ球
レシピエント血清中の抗体
ロミセチン C で処理したレシピエントの細胞とドナーの細胞間の単相混合リンパ球反応
そしてクロスマッチング
メイン側と同じ
扱う
同種抗CD3抗体療法
最も重要な合併症
血清病
腫瘍免疫
マクロファージ
腫瘍病変における浸潤マクロファージ
腫瘍の広がりと転移
負の相関
抗腫瘍作用機序
ADCC経路を通じて腫瘍細胞を殺す
腫瘍抗原
腫瘍の発生および発達中に新たに出現または過剰発現
抗原物質
特定の分類
腫瘍特異抗原 (TSA)
腫瘍細胞に特異的なネオアンチゲン
腫瘍細胞でのみ発現します
欠損および正常な組織細胞
黒色腫関連拒絶抗原
マラ
前立腺特異抗原
PSA
腫瘍関連抗原
腫瘍細胞に特異的ではない
正常な組織や細胞でも発現します
がんが発生すると
内容が大幅に増えました
アルファフェトプロテイン
ＡＦＰ
抗腫瘍効果のメカニズム
細胞性免疫
最も重要な役割
T細胞、NK細胞、マクロファージ
体液性免疫機構
補体の細胞溶解効果
抗体効果
抗体依存性細胞媒介性細胞毒性 (ADCC)
抗体の免疫調節性貪食作用
抗体は腫瘍細胞の表面にある特定の受容体をブロックします
抗体は受容体に結合し、腫瘍細胞内のシグナル伝達をブロックします
抗体は腫瘍細胞の接着を妨げます
一般的な腫瘍マーカー
胎児抗原
アルファフェトプロテイン (AFP)
原発性肝がん
AFP＞300ug/L
上昇
妊娠中の女性
新生児
急性肝炎
原発性肝がん
AFP および ALT ダイナミック カーブ
肝臓がんと良性肝疾患（活動性肝炎）の鑑別
ダイナミックカーブフォロア
良性肝疾患
好きなだけ高く
ダイナミックカーブセパレーター
高いAFP
ALTの減少
肝臓がんについて考えてみましょう
癌胎児性抗原 (CEA)
複数のアイソフォームを持つ
CEA-A、CEA-P、CEA-Mなど
複雑な抗原決定基と複数の異性体糖タンパク質が含まれています
喫煙者
緩やかな増加
腸腫瘍
結腸がん、直腸がん、膵臓がん
糖鎖抗原
CA153
乳癌
触れてほしい
触れる胸
CA125
卵巣がん
ご用ですか
もうすぐ息子が生まれるので、卵巣の中で
ヒト精巣上体タンパク質 4 (HE4)
新しい腫瘍マーカー
卵巣がん
CA199
消化器腫瘍
99が欲しい
消化できない、99かかる
膵臓癌
9 横から見ると膵臓のように見える
膵臓がん、胆嚢がん、結腸がん、胃がん
扁平上皮癌抗原 (SCCA)
扁平上皮癌
食道扁平上皮癌
子宮頸癌
酵素とイソ酵素
前立腺特異抗原 (PSA)
前立腺がん
臓器特異的腫瘍マーカー
f-PSA および f-PSA/t-PSA 比
前立腺がんと前立腺良性疾患の区別
t-PSAとf-PSAの両方が上昇しています
f-PSA/t-PSA比
<10%
前立腺がんの可能性が高い
前立腺酸性ホスファターゼ (PAP)
前立腺がん
ニューロン特異的エノラーゼ (NSE)
小細胞肺がん（エンバク細胞がん）
α-L-フコシダーゼ (AFU)
原発性肝がん
AFPとは関係ありません
相補効果
AFUの上昇はAFP陰性でも見られる
ホルモン
バニリルマンデル酸 (VMA)
褐色細胞腫
ヒト絨毛性ゴナドトロピン
栄養膜細胞腫瘍と胚細胞腫瘍
胞状奇胎、びらん性奇胎、絨毛癌
カルシトニン
甲状腺髄様がん
副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）
小細胞肺がん（エンバク細胞がん）
タンパク質
β2-ミクログロブリン (β2-MG)
悪性腫瘍、骨髄腫、リンパ腫、腎臓病
β2ミクログロブリンだから
すべての有核細胞の表面に存在します
フェリチン
悪性腫瘍、炎症
今週のプロテイン (BJP)
多発性骨髄腫
ABO血液型抗原を発現します
胃がん細胞
ありえない
単糖類
免疫不全疾患
原発性免疫不全症
原発性B細胞欠損症
X連鎖無ガンマグロブリン血症
ガンマグロブリン = 免疫グロブリン
ブルートン症候群
扁桃腺の欠如
一般的な臨床症状
コンセプト
B細胞の先天的無形成
B細胞の減少または欠損
抗体の減少または欠損
骨髄から見つけるのは難しい
形質細胞
正常なT細胞数
生後6か月の子供（未就学児）に再発感染症が発生した
6か月以内の現在のIgGおよび分泌型IgA耐性
選択的IgA欠損症
最も一般的な体液性免疫不全疾患
血清IgAとsIgAの両方が減少しました
消化管や気道の再発性感染症を伴うことが多い
粘膜の中で
ガンマグロブリン補充療法
無効
一般的な可変性免疫不全疾患
B細胞免疫不全症
B細胞機能の欠陥とシグナル伝達の異常によるもの
体液性免疫不全症
ブルートン症候群
原発性T細胞欠損症
先天性胸腺低形成症候群
細胞性免疫不全症
ディジョージ症候群
副甲状腺機能不全を伴うことが多い
ウイルスや真菌感染症に対する感受性
細胞性免疫も体液性免疫も機能しないため
細胞免疫機能不全
体液性免疫不全
CD4 T細胞（Th細胞）が必要なため
胚性胸腺移植が効果的
原発性食細胞欠損症
慢性肉芽腫
食細胞の数、運動または接着機能、殺菌活性の異常
化膿性細菌や真菌による再発性感染症
G-6-PD 欠乏症により引き起こされる可能性があるのは、
G-6-PD が欠如しているため、マクロファージのエネルギー供給が不十分となり、食作用と殺傷能力が低下します。
好中球
走化性能力が大幅に低下
チェディアック・ヒガシ症候群
怠惰な白血球症候群
慢性皮膚および粘膜カンジダ・アルビカンス感染症
カンジダ・アルビカンス皮膚検査
糖尿病
やけど
正常な新生児
貪食能力が大幅に低下する
補体または抗体の欠損
酵素代謝の低下
慢性肉芽腫
NBT検査の陽性率が大幅に上昇
敗血症
補体欠乏症
C1阻害分子の欠損
遺伝性血管浮腫
繰り返す細菌感染症
ウイルスではありません
全身性エリテマトーデスおよび慢性腎炎を伴う
必ずしも
重度複合免疫不全症 (SCID)
患者さんは生後6か月で発達障害を発症しました
重度の感染症や死に至る可能性がある
性別に関連した重度複合免疫不全症
X-SCID
X連鎖劣性遺伝
T細胞
不足しているか大幅に減少している
B細胞
正常だが機能不全に陥っている
Ig産生の低下と型変換障害を引き起こす
アデノシンデアミナーゼ欠損症
アデノシンデアミナーゼ（ADA）欠損症
常染色体劣性遺伝
原理
酵素欠損によりアデノシンとデオキシアデノシンの分解が阻害される
ヌクレオチド代謝産物 dATP および dGTP の大量の貯蔵を引き起こす
初期のT細胞およびB細胞に対する毒性効果
T細胞とB細胞の欠陥を引き起こす
臨床的な意義
乳児にBCGワクチンを接種した後
致死的かつ播種性感染症が発生する
続発性免疫不全症
後天性免疫不全症候群（AIDS）
エイズ
感染する
CD4 T細胞
主要
マクロファージ
樹状細胞
B細胞
脳組織内のミクログリア
索引
HIV抗体陽性
ニューモシスチス・カリニ肺炎に対する感受性
CD4/CD8 比率の反転
カポジ肉腫
B細胞と免疫グロブリンの増加
予備スクリーニングテスト
ELISA法
確認テスト
イムノブロッティング
テスト
体液性免疫測定法
B細胞欠陥の検出
細胞免疫測定法
T細胞欠陥の検出
皮膚テスト
抗原
自然環境中の接触により感作されやすい物質
ツベルクリン
カンジダ・アルビカンス
トリコマイシン
ストレプトキナーゼ-ストレプトキナーゼ (SK-SD)
おたふく風邪ウイルス
テスト
複数の抗原を同時に検査
ポジティブ
3つ以上の抗原に対する皮膚検査陽性
2歳未満のお子様
抗原陽性
ネガティブ
2 つ未満の抗原に対して陽性
48時間反応直径
<10mm
ヒント
免疫不全または反応性の低下
PHA刺激試験
非特異的細胞免疫機能
PHA-L: フィトヘマグルチニン
PHA 刺激リンパ球増殖および形質転換試験
T細胞の機能を決定する
リンパ球増殖・形質転換試験
1週間後の新生児
PHA刺激反応が起こる
重度の細胞性免疫不全症の可能性を除外する
エイズ
主にCD4細胞（ヘルパーT細胞Th）に侵入します。
gp120はCD4受容体タンパク質に結合します
CD4/CD8比の低下
細胞免疫機能不全
食作用欠損症
好中球の細胞内殺菌力
ニトロブルーテトラゾリウム（NBT）還元試験
ポジティブ大幅増加
敗血症
走化性機能検査
ボイデンチャンバー法
小さな部屋での走化性
マクロファージの貪食作用
カーボン粒子クリアランス試験
免疫増殖性疾患
リンパ球の異常増殖によって引き起こされる病気
形質細胞疾患
形質細胞または Ig 産生 B リンパ球の過剰な増殖によって引き起こされます。
血清または尿中の過剰量
モノクローナル免疫グロブリン
または軽鎖または重鎖の断片
形質細胞腫
IL-4合成の低下、B細胞活性化の阻害、APC抗原提示能の阻害
重鎖疾患
形質細胞の突然変異と異常増殖
生産することしかできない
免疫グロブリン重鎖または欠陥のある重鎖
血清または尿中に多量に含まれる
遊離免疫グロブリン重鎖によって引き起こされる疾患
悪性形質細胞疾患
軽鎖疾患
変異した形質細胞は大量の異常な軽鎖を生成する
腎臓および他の内臓組織における過剰な軽鎖の沈着
腎臓障害やアミロイドーシスを引き起こす
軽鎖タンパク質の種類はラムダ型とk型に分けられます
ラムダ型腎毒性が強い
K型Mタンパク血症
血清中のK/λ型比
>4:1
分類
悪性形質細胞疾患
多発性骨髄腫 (MM)
骨髄における単一の形質細胞株の異常な増殖を特徴とする悪性腫瘍
成熟B細胞腫瘍
原発性マクログロブリン血症
重鎖疾患
良性形質細胞疾患
原発性良性モノクローナル血症
続発性モノクローナル高Ig血症
臨床症状
オーバーフロー蛋白尿/腎前蛋白尿
=免疫グロブリン軽鎖
=尿中B-Jタンパク質/BJP/週間タンパク質/凝集素/免疫グロブリン軽鎖
モノクローナル形質細胞過形成
モノクローナル免疫グロブリン (M タンパク質)
過粘稠度症候群
赤血球沈降速度の上昇
尿タンパク
腎尿細管の閉塞
腎不全を引き起こす
形質細胞が骨髄に侵入する
骨髄破壊、骨痛（最も一般的）、骨折を引き起こす
高カルシウム血症
貧血、感染症、出血、免疫機能不全
正常な骨髄細胞は生成できないため、
臨床検査
血清免疫グロブリン（Mタンパク質）の定量検出
Mプロテイン
形質細胞のモノクローナル増殖
クラス、サブクラス、遺伝子型およびイディオタイプの均一性
免疫グロブリン
抗体活性なし
他の免疫学的活性なし
より一般的なのは
多発性骨髄腫、高ガンマグロブリン血症、悪性リンパ腫、重鎖疾患、軽鎖疾患
総タンパク質濃度の増加とMタンパク質の増加
IgGが最も一般的です
IgAの増加
予備スクリーニングテスト
一方向寒天免疫拡散
免疫比濁法
尿中の軽鎖タンパク質の検出
今週のプロテイン (BJP)
免疫グロブリン (M タンパク質) 軽鎖
コンデンシン
予備スクリーニングテスト
熱沈殿溶解法
PH:4.9±0.1の条件下
40～60℃に加熱する
凝固が起こる
90～100℃に上げる
再溶解する
56℃まで下げる
再凝固
血液中では陰性になる可能性がある
今週のプロテインは分子量が小さいので
腎臓から排泄されやすい
血清ゾーン電気泳動
使用
酢酸セルロース膜とアガロース電気泳動
Mタンパク質バンド
緻密で狭いタンパク質バンド
r ゾーン内 (場合によってはベータまたは a ゾーン内)
最も基本的で推奨される予備スクリーニングおよび定性的テスト方法
免疫グロブリンの種類を正確に判断できない
免疫電気泳動
それがどのタイプの Ig であるかを推定することしかできません。
確認できません
免疫固定電気泳動
Mタンパク質の確認検査
最も一般的に使用される方法
モノクローナル抗体の定性的および型別同定
好ましい方法
Mタンパク質軽鎖タイプの同定
最も一般的に使用される方法
サブトピック
自己免疫疾患
基本的な考え方
免疫寛容
自分自身の組織や細胞成分に
免疫反応なし
最小限の免疫反応を生成する
免疫安定効果がある
正常なヒト血清中には微量の自己抗体と感作リンパ球が存在する可能性がある
自己免疫
免疫寛容が破壊される
自己の構成要素に対する免疫応答を生成する
自己抗体または感作Tリンパ球の存在
自己免疫疾患
自己抗体または感作された T リンパ球は、対応する自己成分による免疫応答を引き起こす可能性があります
組織や臓器の損傷、または免疫反応による機能障害の原因
分類
臓器特異的自己免疫疾患
特定の器官または組織に限定される
慢性甲状腺炎、橋本甲状腺炎
アジソン病（原発性慢性副腎不全）
重症筋無力症、萎縮性胃炎
特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性溶血性貧血
特定の血小板と赤血球
非臓器特異的自己免疫疾患
複数の組織、器官、または系に侵入する一連の疾患
全身性エリテマトーデス（SLE）、関節リウマチ（RA）、シェーグレン病（SS）
共通機能
ほとんどの原因は不明です
誘導なしで何度も
自発性
特発性
ほとんどが女性
男性よりも女性の方が多い
若者よりも高齢者の方が多い
遺伝的になりやすい
自己抗体または自己組織細胞を持つ感作された T リンパ球
病気が重なることもある
不治の
攻撃と寛解を交互に繰り返す
自己抗原
不可解な抗原の放出
精子、目の内容物、脳など
免疫システムと接触したことのない人には、免疫システムはわかりません。
交感神経性眼炎
片方の眼球を負傷し、内容物が放出された
体はもう一方の良い目も攻撃します
自分自身の構成の変化
変性 IgG
身体を刺激して抗変性 IgG 抗体 (リウマチ因子 RF) を生成します。
関節リウマチ
共通の抗原によって引き起こされる交差反応性
リウマチ熱
A 群溶血性レンサ球菌の M タンパク質
心内膜、関節、糸球体基底膜抗原と同じ
交差反応を引き起こす
急性糸球体腎炎
リウマチ熱
一般的な自己免疫疾患
I型過敏症反応
II 過敏反応
重症筋無力症
自己抗原
アセチルコリン受容体
機構
自己抗体は神経筋接合部のアセチルコリン受容体に結合します
内部化され劣化した
運動ニューロンによって放出されるアセチルコリンに対する筋細胞の反応性の低下を引き起こす
骨格筋の衰弱を引き起こす
甲状腺機能亢進症（バセドウ病）
自己抗原
甲状腺刺激ホルモン受容体 (TSHR)
TSH受容体に対する抗体
機構
びまん性有毒甲状腺腫
III型過敏症反応
全身性エリテマトーデス (SLE)
自己抗原
核抗原
核酸、核タンパク質、ヒストン
自己抗体
抗核抗体（ANA）
機構
免疫複合体は次のように蓄積されます。
心臓血管の結合組織、糸球体基底膜、漿膜、関節滑膜、臓器の小血管壁
補体を活性化する
好中球の浸潤を誘引する
特徴
若い女性に多い
多臓器、多系統の累積
顔
蝶形紅斑
肌
輪状紅斑
光線過敏症、発熱、発疹
腎臓損傷（糸球体腎炎）、心血管疾患
貧血、精神症状
関節痛、漿膜炎
補体
活動期
過剰活性化のせいで
レベルが下がる
安定化後
反応性の増加
自己抗体
抗核抗体（ANA）
ほとんどの自己免疫疾患は陽性です
主に未治療のSLEに見られます
主にIgG型
臓器や種に固有ではない
すべての動物の細胞核と反応します
分類
抗DNA抗体
抗ヒストン抗体
抗非ヒストン抗体
抗核小体抗体
検出
間接免疫蛍光法
抗dsDNA抗体
抗二本鎖 DNA 抗体
抗核抗体（ANA）に所属
特異的で特徴的な抗体
活動期に多発
方法
トリパノソーマ エクイまたはグリーンフライ
抗原マトリックス
間接免疫蛍光法
最も具体的で感度が高く、一般的に使用される方法
抗Sm抗体
特徴的な自己抗体
関節リウマチ（RA）
自己抗体
タイプ
リウマチ因子（RF）
変性 IgG Fc セグメント
標的抗原に対する自己抗体
主にIgM型
IgA、IgG、IgE
陰性結果でも関節リウマチが除外されるわけではない
抗ケラチン抗体 (AKA)
予後の兆候
高力価
状態はさらに深刻です
抗環状シトルリン化抗体（抗CCP抗体）
非常に具体的
早期診断で陽性反応が出る可能性もある
RF検出方式
ラテックス粒子凝集試験
間接法
IgMのみチェック可能
エリサ
さまざまな Ig タイプの RF
固相担体にコーティングされた抗原としてウサギIgGを使用
検査対象のサンプルと組み合わせる
酵素標識抗ヒト IgG、IgM、IgA、IgE をそれぞれ追加します。
架橋抗原としてのRF
シェーグレン症候群 (SS)
としても知られている
シェーグレン症候群
特徴
分泌腺機能不全
皮膚や粘膜の乾燥
涙腺と唾液腺が最もよく影響を受けます
目と口が乾燥する
に分け
主要な
外分泌腺以外の蓄積組織
二次
フラグ抗体
抗SSA/Ro抗体
抗SSB/La抗体
多発性筋炎 (PM) および皮膚筋炎 (DM)
多発性筋炎
主に筋肉の損傷
皮膚筋炎
筋肉のダメージと皮膚のダメージ
フラグ抗体
ジョー-1
足で皮膚を蹴ってしまいました。
PM-1
強皮症 (Scl)
全身疾患
進行性全身性硬化症 (PSS)
パフォーマンス
皮膚が固くなり、硬くなる
フラグ抗体
抗Scl-70抗体
妻に厳しくしてください (7)
血清総抗核抗体（トータルANA）検出法
間接免疫蛍光アッセイ (IIF)
抗原
HEp2細胞
核成分が豊富なヒト頭部がん細胞
検査済みの血清と反応する
次に、FITC 標識抗ヒト IgG (二次抗体) を追加します。
最も効果的なのは
蛍光パターンと臨床的意義
ホモジニアスタイプ
高い効力
全身性エリテマトーデス（SLE）に見られる
末梢膜・核膜タイプ
高い効力
SLEでのみ見られる
特にアクティブ期間SEL中
迅速な疾患活動性
ごくありふれた
斑点のあるタイプ
混合性結合組織病 (MCTD)
混合スポット
核小体型
強皮症 (SCL)
心の狭い人たち
IV 型過敏症反応
自己抗原に対する T 細胞の応答
自己反応性 T 細胞媒介性
1型糖尿病
患者内の自己反応性 T 細胞の存在
CD8 CTL
Th1細胞
一般的な自己抗体検査
抗ENA抗体プロファイル
恵那
抽出可能な接合性抗原の総称
生理食塩水またはリン酸緩衝液で利用可能
それを抽出します
ANAではできません
ENA抗体
主にIgG
検出方法
イムノブロッティング
臨床的な意義
抗二本鎖 DNA (抗 dsDNA 抗体) は含まれません
ANAのものなので
他の自己抗体の検出
抗好中球細胞質抗体 (ANCA)
血管炎
核周囲（pANCA）抗体の標的抗原
ミエロペルオキシダーゼ (MPO)
骨髄特異的
それでコアの周りに
細胞質抗体（cANCA）の標的抗原
プロテアーゼ-3 (PR3)
抗ミトコンドリア抗体 (AMA)
原発性胆汁性肝硬変（PBC）
抗リン脂質抗体（APLA）
抗カルジオリピン抗体 (ACLA) を含む
血液の凝固亢進状態
血栓症
アクラ
SLEの女性は血栓を発症する可能性が高い
妊娠中は流産が起こりやすい
抗平滑筋抗体（ASMA）
自己免疫性肝炎 (AIH)
間接免疫蛍光 (IIF) アッセイ
基板として
サルの肝細胞
ラットの腎臓、胃、肝臓組織
抗サイログロブリン抗体 (ATGA)
橋本甲状腺炎 (HT)
抗壁細胞抗体（PCA）、抗内因子抗体
萎縮性胃炎
悪性貧血
過敏症
過敏反応
アレルギー
感作に対する初期反応後
もう一度答えてください
生理機能障害
組織細胞の損失
異常な免疫反応
免疫防御
高すぎる
I型過敏症反応
IgE抗体媒介性
細胞指向性
マスト細胞に結合する
即時型過敏症/アナフィラキシー
数分
原理
一次反応後のアレルゲン特異的 IgE の産生
マスト細胞上の IgE Fc 受容体に結合します
感作
再反応時の感作された肥満細胞の脱顆粒
生理活性メディエーターを放出する
ヒスタミン、ロイコトリエン
原因
平滑筋けいれん
主にロイコトリエンが原因
気管支喘息の主な原因物質
小血管の透過性の増加
粘膜腺の分泌の増加
敏感な神経終末
好酸球の活性化
反応に関与する主な成分
アレルゲン
特定の薬
ペニシリン
吸入性アレルゲン
花粉、ダニ
食物アレルゲン
牛乳、エビ
血小板活性化因子の関与が必要です
抗体
IgE抗体
IgG サブクラスも発生する可能性があります
IgG4
これでは補体が活性化されないため、
補体の関与を伴わない I 型過敏症
参加しているセル
肥満細胞
好酸球
寄生虫感染症
増やすことができます
好塩基球
臨床症状
式
I型急速発症、10億の酸塩基、I型ショック喘息およびアレルギー
ビリオン:E:IgE
全身性
アナフィラキシーショック
投薬または異種血清の注射が原因
破傷風抗毒素、ジフテリア抗毒素など
ペニシリンアナフィラキシーショック
血圧が下がります
血管作動性物質が原因
毛細血管拡張症
寄生虫感染症
地域性
呼吸器アレルギー反応
アレルギー性鼻炎およびアレルギー性喘息
胃腸アレルギー反応
アレルギー性胃腸炎
アレルギー性皮膚反応
蕁麻疹、湿疹、血管浮腫
効果器官に機能的損傷を引き起こす
しかし重大な病理学的損傷はない
I型過敏症反応を引き起こす
IL3/IL5、IL4
試験方法
特異性試験
アレルゲン皮内検査
摘む・掻く・皮内注射
皮内注射
ペニシリンなどの皮膚検査
ポジティブコントロール
塩酸ヒスタミン
偽陽性
大量のホルモン剤
偽陰性
抗ヒスタミン薬の効果
プロセス
注射器でアレルゲン抽出物を皮膚に注入します
抗原は適切に希釈する必要があります
注入量
0.01～0.02ml
注射部位
前腕の内側
出血や皮下注射ができない
複数のアレルゲンを同時に摂取する
間隔
2.5～5.0cm
非常に猜疑的で敏感
5.0cm
結果を観察するのに 20 ～ 30 分
赤面症（プリックテスト）
膨疹（皮内テスト）
特異的 IgE (sigE) の検出
放射性アレルゲン吸着試験（RAST）
プロセス
精製されたアレルゲンを固体担体に吸着させます
検査する血清を追加します
放射性標識した抗IgE抗体（二次抗体）を入れる
血清中の特定の IgE レベルの定量的検出
血清アレルギーなど
破傷風抗毒素注射が必要
少量の複数回の注射
II型過敏症反応
細胞毒性または細胞溶解性
II型毒、23mygod
標的細胞表面抗原は IgG または IgM クラス抗原に結合します
補体、マクロファージ、NK細胞の関与により
主要成分
抗体
IgG または IgM
補体の関与
解散
参加しているセル
マクロファージ
オプソニン貪食症
NK細胞
ADCC効果
臨床疾患
式
甲状腺機能亢進症、筋力、熱、出血
輸血反応
新生児の溶血性疾患
妊婦用 Rh (-)、第一子用 Rh ( )
別の妊娠での胎児の溶血を防ぐ
お届け後72時間以内
抗Rh抗体の注射
どんなにスピードが速くても
自己免疫性溶血性疾患 (AIHA)
薬物アレルギー性血球減少症
特発性血小板減少性紫斑病（ITP）
肺出血腎炎症候群（グッドパスチャー症候群）
甲状腺機能亢進症
(バセドウ病)
重症筋無力症
(MG)
急性リウマチ熱
(ARF)
検出
抗血球抗体検査
ABO抗原によって引き起こされる可能性があります
血液に関するすべてはここにあります
臨床的な意義
自己免疫性溶血性貧血の診断に役立ちます
抗Rh抗体
Rh血液型の不適合によって引き起こされる新生児の溶血性疾患を助けます
ストレプトリジン O (ASO)
レンサ球菌細胞壁 M タンパク質
心臓および糸球体と一致
したがって、これらが複合してダメージを与えることになります。
連鎖球菌関連疾患
咽頭炎
扁桃炎
中耳炎
猩紅熱
急性糸球体腎炎
急性リウマチ熱
III型過敏症反応
免疫複合体
中サイズの可溶性免疫複合体 (IC: IgG、IgM)
体全体の局所的または複数の場所の毛細血管基底膜に沈着します
補体を活性化する
補体は血管壁にダメージを与える
そして、血小板、好塩基球、好中球の参加を誘導します。
うっ血、浮腫、局所壊死
好中球の浸潤
炎症反応の主な特徴
記憶法
タイプ III 化合物、23mygod、第 3 回全体会議
主要成分
抗体
IgG、IgM
参加しているセル
好中球
組織損傷の最も強力な原因
好塩基球
肥満細胞
血小板
免疫複合体 (IC)、循環免疫複合体 (CIC)
中型の可溶性抗原抗体免疫複合体
病気
局所免疫複合体疾患
アルサス反応/アーサー反応
局所アレルギー反応の実験
ウサギへの馬血清の複数回皮下注射
4～6回の注射後
局所的な浮腫、出血、壊死
アルサスのような反応
インスリン
したがって、インスリンを注射するときは、患者のいる場所で注射する必要があります。
ワクチン
抗血清注射
全身性免疫複合体疾患
式
鳳朗腎すっきりA
A: アルサスのような反応
血清病
異種動物血清注射後1～2週間で発症
発熱、発疹、リンパ節腫脹、関節の腫れと痛み、一過性の蛋白尿
即時ショック
I型過敏症反応
連鎖球菌後糸球体腎炎
グループA溶血性レンサ球菌感染症
2～3週間
糸球体基底膜に沈着
免疫複合体腎炎
関節リウマチ
変性 IgG
抗 IgG 自己抗体 = リウマチ因子 (RF)
抗 IgG 自己抗体
主にIgM抗体
小さな関節に発生します
関節リウマチ
大きな関節に発生する
全身性エリテマトーデス
DNA および抗 DNA 抗体複合体
腎臓、関節、および体の他の部分に沈着した血管の基底膜
糸球体腎炎、関節炎、その他の多臓器損傷を引き起こす
検出
組織内での検出
免疫組織化学
免疫複合体の検出 (CIC)
(CIC)
分類
抗原特異的方法
非抗原特異的方法
臨床でよく使われる
IV 型過敏症反応
遅延型過敏症（DTH）
エフェクター T 細胞 (CD4 Th1) (CD8 CTL)
特定の抗原に結合した後
単核マクロファージの浸潤と組織損傷を特徴とする炎症反応。
主要成分
抗原
細胞内寄生虫
ブルセラ菌、結核菌、チフス菌
結婚しないのはとても悲しい
ウイルス、寄生虫
化学物質
染料、塗料、殺虫剤、化粧品
薬
ペニシリン
I 型過敏症も発生する可能性があります
標的細胞
結核菌を保有する細胞
移植された細胞または臓器
腫瘍細胞
ハプテンが結合したタンパク質
参加しているセル
エフェクターT細胞
CD4
Th1
CD8
CTL
単核マクロファージ
病気
感染性遅延型過敏症反応
細胞内寄生性病原体による感染
結核菌
空洞結核
ウイルス
原虫
接触性皮膚炎
低分子ハプテン物質への曝露
移植拒絶反応
宿主対移植片反応
HVGR
移植片対宿主反応
GHR
検出
皮膚検査の原理
皮内注射剤、貼付剤
24～48時間
局所の発赤、腫れ、硬結、水疱等。
目的
IV 型過敏反応の検出
細胞免疫機能の状態
ツベルクリン検査（OT）
方法
感染後4～8週間
現れることができる
古いツベルクリン (OT) または結核菌の精製タンパク質誘導体 (PPD)
48～72時間の観察
赤み、腫れ、硬さ
>5mm
ポジティブ
結果の判定
<5mm
ネガティブ
患者が結核に感染していることを意味するものではありません
結核菌は遅発性なので
5-9/10-19mm
ポジティブ
結核菌に感染しているか、カルメットゲラン桿菌（BCG）のワクチン接種を受けている
20mm以上または水疱または壊死
強いポジティブ
結核にかかるリスクが高い
目的
BCGワクチン接種者を選択してください
結核感染を除外する
細胞性免疫の働きを理解する
皮膚パッチテスト
アレルゲン溶液に浸したガーゼを前腕または背中の内側に置きます
セロファンまたはワックスペーパーで覆う
24～72時間
赤み、腫れ、水疱
皮膚テストの違い
浸潤性肺炎
肺のまだらな影
発熱、咳、血痰
診断
喀痰抗酸菌培養
結核を診断する
要約する
式
I型即時型、II型毒、III型複合体、IV型遅発型
抗体と細胞
酸塩基肥料1億個、23mygod、中国共産党中央委員会第3回総会、4Tセル
病気
タイプI
ショック喘息とアレルギー
タイプⅡ
甲状腺機能亢進症、筋力、熱、出血
タイプⅢ
鳳朗の腎臓をすっきりさせます
タイプ IV
移植結核接触皮膚炎
感染症
細菌感染
溶連菌感染症
グラム陽性連鎖球菌
化膿レンサ球菌
A 群β溶血性連鎖球菌
試験方法
ラテックス凝集試験
免疫比濁法
一般的に使用される免疫学的マーカー
アンチストレプトリシン「O」
そう
身長を伸ばす
急性咽頭炎およびその他の上気道感染症
リウマチ熱
III型過敏症反応
リウマチ性心筋炎
関節リウマチ
心膜炎
急性糸球体腎炎
腸チフス菌
臨床症状
自然治癒する胃腸炎
致死性腸チフス（腸熱）
試験方法
肥大反応
とても太って、とても悲しい
酵素免疫測定法
エリサ
結核菌
結核
試験方法
ツベルクリン検査
古いツベルクリン (OT)
ツベルクリン精製タンパク質誘導体（PPD）
結核活動の象徴
抗PPD抗体
ポジティブ
ウイルス感染
インフルエンザウイルス
構造
ヘマグルチニン (HA)
ノイラミニダーゼ (NA)
方法
赤血球凝集抑制試験
原理
ウイルス懸濁液を検査対象の血清（抗体）と混合します。
対応する抗体を持っている
ウイルス表面の赤血球凝集素と赤血球の結合を阻害することができる
赤血球を加えると結合しなくなります。
凝集なし
ポジティブ
コクサッキーウイルス
体に感染し、体の免疫システムを刺激する可能性があります
膵臓のベータ細胞を攻撃する
糖尿病を引き起こす
A型肝炎
検出方法
ELISAと化学発光技術
HAV-IgM および IgG の検出
IgM
現在の感染症を診断する
初期感染
IgG
感染後期
過去の感染症
B型肝炎
HBsAg（表面抗原）
先に現れた
HBsAb（抗HBs抗体）
防御抗体
HBeAg (e抗原)
HBV が生体内で活発に複製することを示します
非常に伝染性が高い
HBeAb (抗HBe抗体)
複製能力の低下
感染力の低下
HBcAg（コア抗原）
HBV が存在し、活発に複製しています
直接指標
検出が困難
HBcAb (抗HBc)
IgM
B型肝炎の急性期および感染初期
IgG
過去の感染症
HBVDNA
最も敏感な
最も直接的な
慢性活動性肝炎
臨床症状
慢性肝炎の既往歴がある
HBc IgM陽性
肝機能異常
ダメージ遺伝子
肝外損傷
免疫複合体の沈着が原因
破壊メカニズム
CD8細胞は肝細胞膜上に発現するHBcAgとHLA-Iを認識して細胞溶解を引き起こす
ダブルセラムを頼む
目的
回復期の抗体価が初期よりも高いかどうかを観察する
先天性感染症
母体内の胎児が受ける感染症
トーチと総称される
優生思想と教育の4項目
トキソプラズマ・ゴンディ (TOX)
風疹ウイルス（RUV）
サイトメガロウイルス (HCMV)
単純ヘルペスウイルス（HSV）
臨床症状
中絶
変形
精神薄弱、聴覚障害
寄生虫感染症
住血吸虫感染症
リング卵沈殿反応
抗原抗体反応
卵内（卵周囲）の成熟ミラシジウムの分泌
ヒト血清内の抗体に結合します
明らかな屈折特性を持つ泡状、指状、帯状の特定の析出物の形成
ポジティブ
ポリエチレングリコール
ハイブリドーマ技術
融合剤
免疫濁度
濁度増加剤
抗原の精製
ポリマー沈殿法