心智圖資源庫 實驗室診斷學的緒論、血液學檢查
實驗室診斷是以實驗室檢查結果或數據 為依據,結合其他臨床資料,經過綜合分析,應用於臨床診斷、鑑別診斷、病情觀察、療效監測和預後判斷的一種臨床診斷方法。
編輯於2023-12-26 09:47:51This is a mind map about bacteria, and its main contents include: overview, morphology, types, structure, reproduction, distribution, application, and expansion. The summary is comprehensive and meticulous, suitable as review materials.
This is a mind map about plant asexual reproduction, and its main contents include: concept, spore reproduction, vegetative reproduction, tissue culture, and buds. The summary is comprehensive and meticulous, suitable as review materials.
This is a mind map about the reproductive development of animals, and its main contents include: insects, frogs, birds, sexual reproduction, and asexual reproduction. The summary is comprehensive and meticulous, suitable as review materials.
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實驗診斷
第一章 概論
一、實驗診斷的概念
實驗診斷(laboratory diagnosis)
是以實驗室檢查結果或數據為依據,結合其他臨床資料,經過綜合分析,應用於臨床診斷、鑑別診斷、病情觀察、療效監測和預後判斷的一種臨床診斷方法。
地位
是聯繫基礎醫學與臨床醫學的重要橋樑
主要內容和應用範圍
實驗診斷主要內容
臨床血液學檢查
臨床生物化學檢查
臨床免疫學檢查
臨床病原學檢查
體液與排泄物檢查
其他檢查:遺傳疾病染色體檢查,基因檢查
實驗診斷的應用範圍
(1)為臨床醫療工作服務
疾病診斷與鑑別診斷,療效的觀察與預後判斷
(2)為進行預防工作提供依據
(3)進行社會普查
(4)開展健康諮詢
二、實驗診斷的品質系統及影響因素
完善的品質保證體系
目的:檢測分析過程的誤差, 把控分析的相關環節,確保結果準確可信。
分類
室內品質管制
室間品質控制
實驗室品質體系
影響實驗診斷的因素
1.實驗室前因素
檢驗結果出錯的原因60%以上來自實驗室前,主要是標本的採集與處理。
2.實驗室因素
標本的品質與處理、儀器與試劑、人員的技能與學識、操作技術與方法、品管與標準品、安全性與成本等。
3.實驗室後因素
檢查記錄、結果書寫、資訊輸入與傳輸、實驗室與臨床的溝通等
三、病人標本的採集與處理
病人標本
以血液標本檢查最為重要
血液、尿液、糞便
各種分泌物
各種生理性和病理性體液
四、實驗診斷的臨床應用與評價
正確選擇實驗室檢查項目
原則
針對性
有效性
經濟性
及時性
診斷性實驗的評估指標
診斷靈敏度
診斷特異度
診斷準確度
五、實驗診斷參考範圍、醫學決定水準與危急值
參考範圍
各種檢驗項目都有判斷標準,即所謂的參考值或參考範圍,用於衡量受檢標本結果是否異常
醫學決定水平(MDL)
是透過觀察測定值是否高於或低於這些限值,可在疾病診斷中起排除或確認的作用,或對某些疾病進行分級或分類,或對預後作出估計。
危急值
危急值(critical values)是指某些檢驗結果出現異常超過某一界值時,可能危及病人的生命,醫師必須緊急處理,稱之為危急值。
第二章 血液學檢驗
第一節 血液的一般檢驗
紅血球
紅血球和血紅素檢測
血紅素和紅血球數參考值
紅血球及血紅素增多
相對性增多
血漿容量減少,使紅血球容量相對增加,見於嚴重嘔吐、腹瀉、大量出汗,大面積燒傷等。
絕對性增多
繼發性紅血球增多症—EPO增多
紅血球生成素代償性增加:增多程度與缺氧程度正比,如嚴重的慢性心肺疾病。
紅血球生成素非代償性增加:與某些腫瘤或腎臟疾病有關。
真性紅血球增多症(以紅血球數量增多為主的骨髓增生性腫瘤)
紅血球及血紅素減少
生理性減少
嬰幼兒及15歲以下的兒童身體快速發育,血液容積急劇增加,但造血原料不足
妊娠中、晚期血漿容量增加,使血液稀釋
老年人造血功能明顯退化
病理性減少
紅血球生成減少:缺鐵貧,巨幼貧,再生障礙性貧血
紅血球破壞增多:溶貧
紅血球流失過多(失血):急性、慢性失血性貧血。
紅血球形態改變
正常
雙凹圓盤狀(變形),大小均一,平均直徑7.2μm(6.7~7.7μm)
瑞氏染色:淡粉紅,血紅素充盈良好,呈正色素性、向心性淡染,中央淡染區大小約為細胞直徑的1/3
見於:健康人、急性失血
大小異常(體積-直徑)
小紅血球
形態
直徑小於6μm
發生
正常人偶見
中央染色過淺:Hb合成障礙
低色素性貧血:缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血
中央淡染區消失(球形細胞):遺傳性球形紅血球增多症
大紅血球
形態
直徑大於10μm
發生
見於溶血性貧血,巨幼紅血球性貧血
大紅血球
形態
直徑大於15μm
發生
葉酸、VitB12缺乏:巨幼紅血球性貧血,惡性貧血
紅血球大小不均
形態
直徑相差一倍以上
發生
骨髓造血功能失調、造血調控功能減弱
嚴重的增生性貧血(特別巨幼紅血球性貧血 )
紅血球形狀的改變
球形紅血球(spherocytes)
形態
細胞直徑<6.0μm,厚度增加,中央淡染區消失,似球形。
發生
增多見於遺傳性球形紅血球增多症(>25%)。
橢圓形紅血球(elliptocytes)
形態
細胞呈橢圓形或桿形,長度至少為寬度的3-4倍。
發生
健康人偶見,增多見於遺傳性橢圓形紅血球增多症(>15%)。
口形紅血球(stomatocyte)
形態
細胞中央有裂縫,中央淡染區呈扁平狀,似張口的口形或魚口。
發生
增多見於遺傳性口形紅血球增多症(>10%)、酒精中毒等。
標靶形紅血球(target cell)
形態
細胞中央部位染色較深,外圍蒼白,邊緣深染,形如射擊靶。
發生
增多見於珠蛋白生成障礙性貧血(>20%),缺鐵性貧血。
鐮形紅血球(sickle cell)
是由於HbS聚合而成的頂端較尖的月牙形或鐮刀形的紅血球。
主要見於鐮狀細胞疾病(HbS疾病)。
淚滴紅血球(teardrop cell)
淚滴紅血球是梨形或淚滴形的紅血球。
主要見於骨髓纖維化。
棘形紅血球(acanthocyte)
細胞表面有針尖狀突起,其間距不規則,突起長度和寬度不一。
當棘細胞>25%時為棘細胞增多症(先天性無β脂蛋白血症)。
鋸齒狀紅血球(echinocyte)
紅血球週邊呈鈍鋸齒形,突起排列均勻、大小一致,外端較尖
膜脂質異常---見於肝病、尿毒症等。
紅血球緹錢狀排列(rouleaux formation)
紅血球因血液中帶正電荷的球蛋白及纖維蛋白原增加,因而聚集呈串狀。
主要見於多發性骨髓瘤、原發性巨球蛋白血症。
血紅素含量異常(著色深淺)
正常色素性(normochromic)
見於正常人
急性失血、再生不良性貧血、白血病
低色素性 (hypochromic)
生理性淡染區擴大,染色淡,Hb明顯減少
常見於缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵粒幼細胞性貧血、某些血紅素疾病
高色素性 (hyperchromic)
生理性淡染區消失,整個RBC著色較深,Hb含量增加
常見於巨幼細胞性貧血、球形紅血球增多症。
嗜多色性 (polychromatic)
RBC呈淡灰藍色或灰紅色,胞體略大
胞質內少量RNA與Hb並存,提示骨髓造血功能活躍
各種增生性貧血(尤其是溶性貧血)
紅血球中出現異常結構和排列異常
嗜鹼性點彩紅血球(basophilic stippling cell)
胞質內存在嗜鹼性褐藍色顆粒的紅血球,屬於未完全成熟的紅血球。
可見於骨髓增生旺盛的貧血,如巨幼紅血球貧血;也見於鉛中毒,常作為鉛中毒診斷的篩選指標。
豪-焦小體或染色質小體(Howell-Jolly’s body)
紅血球內含有的圓形紫紅色小體,核碎裂或溶解後殘餘部分,常與卡波環同時存在。
主要見於增生性貧血,如溶血性貧血、巨幼紅血球性貧血、紅白血病等。
卡波氏環(Cabot ring)
胞質中紫紅色細線圈狀結構或「8」字形,是核膜的殘餘物、紡錘體的殘餘物、胞質中脂蛋白變性
見於嚴重貧血、溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、鉛中毒、白血病及脾切除術後。
網織紅血球檢測( Ret )
定義
Ret是介於晚幼紅血球和成熟紅血球之間尚未完全成熟的紅血球,其胞質中殘存嗜鹼性物質(核醣體和RNA),可被某些染料(如新亞甲藍或煌焦油藍等)活體染色呈藍色網狀或顆粒狀結構,故而得名。
參考範圍
成人
相對值:0.005~0.015
絕對值:(24~84)×109/L
臨床意義
反映骨髓造血功能的重要指標
判斷骨髓紅血球生成情況
(1)Ret增多:骨髓造血旺盛
見於各種增生性貧血(溶貧 )
(2)Ret減少:無效紅血球造血
見於非增生性貧血(再生不良性貧血)
觀察貧血療效的重要指標
骨髓移植後監測其造血功能
放/化療時骨髓功能監測
避免造成嚴重的骨髓抑制
紅血球沉降速率測定
紅血球沉降速率( ESR )
定義
ESR指在一定條件下,離體抗凝血全血的紅血球在第一小時末下沉的距離。
參考值
血沉測定影響因素
子主題
血漿因素: 蛋白質和脂類的成分與比例
加速:大分子蛋白 (Fg、Glb、CHOL、TG等)
減慢:小分子蛋白- (Alb、卵磷脂)
紅血球: 數量、大小、形態
加速:紅血球減少
減慢:紅血球增多、球形紅血球等
臨床意義
常規篩檢試驗
缺乏特異性
主要用於觀察病情的動態變化、差異功能性與器質性病變、鑑別良性與惡性腫瘤等
血沉加快
生理性血沉加快
病理性血沉的加快
血沉減慢(意義不大)
真性紅血球增多症、低纖維蛋白原血症、球形紅血球增多症。
血球比容測定及紅血球相關參數
血球比容測定(HCT)
定義
一定體積的全血中紅血球所佔體積的相對比例。
參考區間
成年
男性:0.40 ~ 0.50L/L
女性: 0.37~0.48L/L
臨床意義
HCT與RBC計數意義相似
HCT減低是診斷貧血的指標之一
原因
紅血球平均指數
平均紅血球容積(MCV)
正、大、小紅血球
平均紅血球血紅素含量(MCH)
正、高、低色素性紅血球
平均紅血球血紅素濃度(MCHC)
反映RBC中Hb的濃度,多數疾病仍保持恆定
參考值
臨床意義
紅血球體積分佈寬度的測定(RDW)
定義
紅血球體積分佈寬度是由血液分析儀測量獲得,反映週邊血紅血球體積異質性的參數,是反映紅血球大小均一程度的客觀指標,常用變異係數(RDW-CV)表示。
臨床意義
血球直方圖
血球分析儀檢測原理
血球具有相對非導電性質,懸浮在電解質溶液中的血球通過計數小孔時,可引起小孔內、外電流或電壓的變化,形成與血球數量相當、體積大小相應的脈衝訊號,從而對血球進行計數,並根據體積大小間接區分出細胞群。此原理又稱為庫爾特原理(Coulter principle)。
脈衝的大小:細胞體積 脈衝的數量:細胞數量
依儀器分類白血球水平可分為:
二分群:粒細胞與淋巴球
三分群:大細胞群、小細胞群與中間細胞
五分類:N、L、E、B、M
五分群 網織紅血球計數析儀
表現
經溶血劑處理後根據電阻抗原理計數白血球並進行分群
溶血劑的作用:
使紅血球迅速溶解
使白血球的胞漿經由膜滲出,胞膜緊貼在胞核或顆粒周圍
經處理後的白血球與自然體積無關,含有顆粒的粒細胞體積大於無顆粒的單核及淋巴球
概念
直方圖是透過血球計數儀測量而提供的血球體積分佈圖形,這些圖形可以表示出細胞群體分佈。
紅血球直方圖的臨床應用
正常紅血球直方圖幾乎為兩側對稱、較狹窄的常態分佈曲線,主要分佈在24 fl~360 fl區域。
白血球
白血球檢測
白血球計數
白血球數參考值
白血球分類計數
白血球正常百分數和絕對值
嗜中性球
嗜中性球增多
生理性增多
日間差異、懷孕後期、劇烈運動、飽餐或淋浴後、高溫或嚴寒
病理性增多
急性感染(化膿性球菌)、嚴重的組織損傷及大量血球破壞、急性大出血、急性中毒、白血病、骨髓增殖性腫瘤及一些惡性實體瘤等。
嗜中性球減少
感染(革蘭陰性菌:傷寒、副傷寒桿菌;某些病毒感染)、某些血液系統疾病(再生障礙性貧血)、物理及化學因素損傷、單核-吞噬細胞系統功能亢進、自體免疫疾病(系統性紅斑狼瘡)等。
嗜中性球的核象變化
指的是粒細胞的分葉狀況,反映粒細胞的成熟程度。
中性粒細胞核左移是指周邊血液的非中性分葉核粒細胞(中性桿狀核粒細胞、晚幼粒、中幼粒、早幼粒)的百分率增多(超過5%)。
嗜中性球右移
週邊血中性球的細胞核出現5葉或更多的分葉,且其百分率超過3%時,稱為核右移。
常見於巨幼細胞性貧血、惡性貧血等。在發炎的恢復期,可有性右移。若疾病進行期突然出現右移變化,多預後不良。
嗜中性球形態異常
嗜中性球的中毒性改變
情況
嚴重傳染病、化膿感染、中毒、惡性腫瘤、大面積燒傷等情況下
具體
大小不均(anisocytosis)
中毒顆粒(toxic granulation)
空泡形成(vacuolizatien)
杜勒小體(Döhle bodies)
核變性(degeneration of nucleus)
臨床意義
這三種形態異常可以單獨出現,也可以同時出現。見於嚴重感染性疾病,如化膿性感染、敗血症、惡性腫瘤、中毒及大面積燒傷等。
巨多分葉核中性粒細胞
多見於巨幼細胞貧血或應用抗代謝藥物治療後。
嗜酸性球
嗜酸性粒細胞增多
過敏性疾病(E>10%)、寄生蟲疾病(E>10%) 、血液疾病、某些惡性腫瘤、某些傳染病(猩紅熱)等。
嗜酸性粒細胞減少
傷寒、副傷寒初期,大手術、燒傷等壓力狀態。
嗜鹼性球
嗜鹼性球增多
①過敏性疾病:過敏性結腸炎、吸入物的超敏反應、紅斑及類風濕性關節炎。
②血液疾病:慢性骨髓性白血病、嗜鹼性白血球白血病、骨髓纖維化。
③惡性腫瘤:轉移癌
嗜鹼性球減少:無臨床意義
淋巴球
淋巴球增多
①感染性疾病:主要為病毒性感染(德國麻疹,麻疹,水痘,傳染性單核球增多症)
②成熟淋巴球腫瘤:成熟淋巴球白血病及部分淋巴瘤
③急性傳染病的恢復期
④移植排斥反應:移植物抗宿主反應(GVHR)
淋巴球減少
應用腎上腺皮質激素、烷化劑、放射線、免疫缺陷症等
反應性淋巴球(異型淋巴球)
具體
Ⅰ型(泡沫型)
Ⅱ型(不規則型)
Ⅲ型(幼稚型)
臨床意義
多見於感染性疾病(EB病毒感染引起的傳染性單核細胞增多症,10%以上)、流行性出血熱,藥物過敏等。
單核細胞
單核細胞病理性增多
某些感染:如感染性心內膜炎、瘧疾、黑熱病等
某些血液疾病:如單核細胞白血病、粒細胞缺乏症恢復期、骨髓增生異常症候群等
單核細胞減少
多無臨床意義
白血球體積分佈直方圖
分佈
白血球:35 ~ 450 fl
小細胞群:35 ~ 90 fl,以淋巴球為主
中間細胞群:90 ~ 160 fl,包括單核細胞、嗜酸性球、嗜鹼性球、幼稚細胞或白血病細胞。
大細胞群:160 fl 以上,主要為嗜中性球。
三分群血液分析儀
正常白血球分類模式圖(直方圖)
血小板
血小板檢測
PLT是判斷止血和止凝功能最常用的初篩指標。
正常參考範圍
(100~300)×109/L,在抗凝血裡面,血小板單一散在分佈,非抗凝血裡,常3、5成群分佈。
血小板計數
血小板減少
PLT少於100×109/L
常見
(1)血小板生成障礙:再障
(2)破壞或消耗增多: ITP、SLE、DIC
(3)分佈異常: 肝硬化致脾腫大
血小板增多
PLT超過400×109/L
常見
(1)原發性:原發性血小板增多症
(2)反應性:急性感染(多在500×109/L以下)
血小板平均容積(MPV)
定義
單一血小板的平均容積。
增加
血小板破壞增加而骨髓代償功能良好者;
造血功能抑制解除後,MPV增加是造血功能恢復的先兆。
減低: 骨髓造血功能不良
血小板分佈寬度(PDW)
定義
血小板容積大小的離散度。
增加:血小板的大小懸殊,出現於急性、慢性骨髓性白血病,巨幼紅血球性貧血。
血小板直方圖
紅血球和血小板檢測原理---同一個分析系統
由於血小板和紅血球在體積上有明顯差異,基於電阻抗的原理,可以用一個限定的閾值將兩者同時檢測的訊號進行區分,根據不同的閾值分別計算出紅血球和血小板的數量和體積。
血小板直方圖的臨床應用
正常血小板直方圖呈左偏態分佈,主要分佈在2 fl~20 fl範圍內,主要集中在2 fl ~15 fl 。
第二節 溶血性貧血檢測(HA)
定義
溶血:紅血球非老化而提前遭受破壞的過程
分類
溶貧依病因及發病機轉分類
依場所: 血管內---血管外(在脾肝單核吞噬系統內破壞)
過程
血管內溶血後血紅素代謝過程:
血管外溶血紅素的過程:
實驗室檢測
一般實驗室項目初篩
1.血液常規:RBC、Hb、HCT、 Ret
2.肝功能:總膽紅素 間接膽紅素
3.尿液常規:血紅素尿(濃茶樣或醬油樣)
溶血性貧血計畫篩檢
主要涉及有無紅血球破壞增加、壽命縮短
專案
血漿遊離Hb
血漿遊離血紅素測定(plasma free hemoglobin)
【參考值】:<50mg/L
【意義】:血管內溶血時明顯增高,血管外溶血時不增高
血清結合珠蛋白(haptoglobin, Hp)
【參考值】:0.7~1.5 g/L
【臨床意義】:
(1)Hp減少: 提示溶血存在,血管內溶血時顯著減低
(2)Hp增加:提示急性慢性感染、惡性腫瘤、風濕性關節炎、SLE等
(3)鑑別肝內外阻塞性黃疸
肝內阻塞性黃疸顯著減少或缺乏(肝內膽管)
肝外阻塞性黃疸正常或增高(肝外膽管)
血漿高鐵血紅素白蛋白
血漿高鐵血紅素白蛋白試驗(methemalbumin test)
血漿中游離血紅素氧化成高鐵血紅素,接著分解為高鐵血紅素,後者與白蛋白結合形成高鐵血紅素白蛋白。
【結果判定】陰性
【臨床意義】見於各種原因所致的嚴重血管內溶血,是檢測管內溶血的重要指標,本試驗陰性不能排除血管內溶血。
含鐵血黃素尿試驗(Rous試驗 )
腎小管上皮細胞吸收血紅素,代謝成含鐵血黃素。當細胞脫落至尿中,鐵離子在酸化的低鐵氰化鉀溶液中生成藍色的鐵氰化鐵,顯微鏡下尿沉渣可有深藍色物質出現,即為陽性。
【結果判定】陰性
【臨床意義】見於慢性血管內溶血,常見於PNH,陽性可持續數週,是對診斷慢性血管內溶血有重大意義。
紅血球壽命
紅血球壽命測定
原理:51Cr同位素標記
參考值:半衰期25~32天
臨床意義:溶性貧血是RBC半衰期<15天,表示有溶血存在。
缺陷檢測
溶貧原因
細胞膜缺陷檢測:紅血球滲透脆性試驗
【原理】
是測定紅血球對不同濃度低滲氯化鈉溶血的抵抗能力。主要取決於紅血球表面積與體積之比。表面積大而體積小,對低滲透壓鹽水抵抗力大(即脆性較小)。反之,抵抗力較小(即脆性較大)。
【參考值 】
開始溶血:0.42%~0.46%(4.2~4.6g/L)NaCL
完全溶血:0.28%~0.34%(2.8~3.4g/L)NaCL
【臨床意義】
(1)脆性增高:遺傳性球形紅血球增多症(開始溶血5.2g/L,甚至在6.8g/L即開始溶血)
(2)脆性減低:小細胞性貧血-地中海型貧血、缺鐵性貧血
紅血球酵素的缺陷:高鐵血紅素還原試驗
【原理】在被檢血液中加入亞硝酸鈉使得高鐵血紅蛋白變成亞鐵血紅蛋白。當G6PD含量和活性正常時,由磷酸戊糖代謝途徑產生的NADPH的數量足以完成上述還原反應。
【參考值 】
高鐵血紅蛋白還原率>75%;高鐵血紅蛋白0.3-1.3g/L。
【臨床意義】
減低:蠶豆病和伯氨喹型藥物誘導溶血性貧血患者因G6PD缺陷,高鐵血紅蛋白還原率明顯下降。
異常血紅素的檢測
正常:血紅素分子是由4條珠蛋白勝肽鏈(2對)和4個血紅素組成
血紅素電泳檢測
正常成人電泳圖顯示4條區帶,最多的是HbA, 少量HbA2,再後為兩條兩更少的紅血球內的非血紅素成分(NH1、NH2)。
【臨床意義】
有異常血紅素區帶見於地中海型貧血( HbA2 ↑)、缺鐵貧及鐵粒幼細胞貧血( HbA2 ↓)。
自體免疫性溶血性貧血檢測:抗人球蛋白試驗 ( Coombs’ test)
【原理】
已結合在紅血球相應抗原上不完全抗體IgG分子較小,無法連接兩個鄰近的紅血球而只能和一個紅血球抗原結合,抗人球蛋白抗體是完全抗體,可與多個紅血球表面不完全抗體結合,使紅血球相互連接出現凝集現象,稱為抗人球蛋白試驗陽性。
【臨床意義】
陽性:新生兒溶血性疾病、自體免疫性溶血性貧血、SLE、類風濕性關節炎
PNH檢測:酸化溶血試驗 (Ham試驗)
【原理】
膜蛋白缺陷的紅血球對補體敏感增加,在弱酸血清(pH6.6~6.8)中,經37℃ 孵育後紅血球發生溶血。
【臨床意義】
正常人陰性,陽性見於陣發性睡眠性血紅素尿症(PNH)。
骨髓細胞學檢測
臨床應用
1.診斷造血系統疾病---如各類白血病
輔助診斷某些疾病---如缺鐵貧、溶貧
提高某些疾病診斷率---如瘧原蟲、黑熱病原蟲
2.適應症與禁忌症
適應症:週邊血球成分及形態異常、不明原因發燒、化療後療效的觀察、需要做骨髓檢體檢查。
禁忌症:出血性疾病、晚期妊娠孕婦。
方法與內容
(一)肉眼檢查
觀察骨髓標本的取材和抹片製作是否滿意
良好的骨髓片可見骨髓小粒。
(二)低倍鏡檢查
判斷骨髓增生程度。以有核細胞的量來反映,分五級。
觀察巨核細胞
注意有無異常細胞
判斷骨髓增生程度
以有核細胞的量來反映。一般低倍鏡觀察有核細胞與成熟紅血球之間的比例。正常為1:20。
通常分為五級:增生極度活躍、明顯活躍、活躍、減低、明顯減低。
(三)油鏡檢查
有核細胞分類計數:連續分類計數200或500個有核細胞,依細胞的不同系列和不同發育階段分別計數,計算各階段細胞所佔的百分比。再累計粒細胞株總數和幼紅血球總數,計算粒紅比例(G : E),正常為2~4 :1。
觀察細胞形態:進行分類計數時,同時觀察形態是否正常,有無異常細胞,寄生蟲等。
(四)骨髓象分析及報告
結果
血球的細胞化學染色
定義
細胞化學染色是以細胞形態學為基礎,根據化學反應的原理,應用骨髓塗片進行固定、化學反應顯色、複染等程序染色,然後在光學顯微鏡下觀察細胞的化學成分及其變化的一項檢定方法。
作用
研究血球中的化學成分,含量及其分佈不盡相同,因此利用細胞化學染色有助於血球類型的鑑別,以及對某些血液疾病的診斷和鑑別診斷、療效觀察、發病機制探討等均有一定價值。
染色方法(歸納對比)
過氧化物酶(POX)染色
原理
粒細胞和單核細胞的胞質中含有過氧化物酶(POX),能催化過氧化氫釋放出新生態氧,氧化無色的受體四甲基聯苯胺,使其生成藍色的四甲基聯苯胺藍,後者再與亞硝基鐵氰化鈉結合,形成呈現穩定的藍色顆粒,原位沉澱於細胞質中。
臨床意義-鑑別急性白血病的類型
急性骨髓性白血病時,白血病細胞多呈現強陽性反應
急性單核細胞白血病時,呈現弱陽性或陰性反應
急性淋巴性白血病呈陰性反應
嗜中性球鹼性磷酸酶(NAP)染色
原理
成熟階段的嗜中性球胞質中的鹼性磷酸酶(NAP),在pH9.2~9.8緩衝液中,能水解基質液中的磷酸萘酚鈉,釋放出磷酸與萘酚,萘酚再與重氮鹽偶聯成不溶性有色偶氮染料,沉澱於細胞質中。
NAP的臨床意義
氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色
酸性磷酸酶(ACP)染色
α –醋酸萘酚酯酶染色 氟化鈉抑制實驗
肝醣染色
鐵染色
原理
細胞中的鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應,生成藍色的鐵氰化鐵(普魯士藍),定位於含鐵的部位。
細胞外鐵:骨髓小粒單核-吞噬細胞系統內的儲存鐵
細胞內鐵:幼紅血球內的鐵 ,鐵粒幼紅血球
舉例
臨床意義
缺鐵性貧血:細胞外、內鐵減少
非缺鐵性貧血:細胞外鐵多增高
鐵粒幼細胞性貧血:鐵粒幼細胞增多,出現環狀鐵粒幼細胞
蘇丹黑B(SB)染色
溶貧病因診斷指標
第四節 血型鑑定與交叉配血試驗
血型系統
紅血球血型系統
ABO血型系統
血型抗原
抗體分類
天然抗體-IgM(完全抗體)
免疫性抗體-IgG(不完全抗體)
根據紅血球膜上存在的抗原A與抗原B的情況而將血液分為4型。
亞型
亞型是指雖屬同一血型抗原,但抗原結構、表現或抗原表位數有一定差異的血型
分類
A 亞型:
A 1 、 A 2 、 A 3 、 A X 和 A M 等
最主要A 1、A 2 亞型,佔全部 A 型血的 99.9% 。
AB 亞型: A 1 B 、 A 2 B 兩個亞型
我國以 A 1 B 亞型為主
B 亞型:不多見,命名不一,一般稱B亞型或弱B型。
亞型檢測意義
防止誤定血型 避免輸血反應
① A 1 與 A 2 間輸血
②亞型抗原性弱,易漏檢或誤定,疑為亞型時,除用抗A 、抗B 血清定型外,還應將其紅血球與O 型血清進行反應,也可用反向定型來加以佐證。
鑑定
原理:
A抗原 抗A抗體
B抗原 抗B抗體
方法:
正定型:以標準抗A和抗B血清鑑定RBC上抗原
反定型:以已知血型的RBC鑑定血清中的抗體
玻片凝集法:正定型(被檢RBC 標準抗A/B血清)
玻片凝集法:反定型(被檢血清 標準RBC)
鑑定意義
確保輸血的安全性:相合性輸血,相容性輸血。
新生兒溶血病(ABO-HDN):第一胎,母親為O型,胎兒為A型或B型。
器官和組織移植:ABO血型不相合可加速對移植物排斥。
其他:親緣推定、法醫痕跡化驗。
Rh血型系統
系統組成:
(1)抗原:主要有D、C、c、E、e五種,D抗原最強
(2)抗體:抗D、C 、c 、E 、e五種,抗D最常見
Rh抗體主要是不完全抗體。
白血球抗原系統
血小板血型系統
第一章 概論
一、實驗診斷的概念
實驗診斷(laboratory diagnosis)
是以實驗室檢查結果或數據為依據,結合其他臨床資料,經過綜合分析,應用於臨床診斷、鑑別診斷、病情觀察、療效監測和預後判斷的一種臨床診斷方法。
地位
是聯繫基礎醫學與臨床醫學的重要橋樑
主要內容和應用範圍
實驗診斷主要內容
臨床血液學檢查
臨床生物化學檢查
臨床免疫學檢查
臨床病原學檢查
體液與排泄物檢查
其他檢查:遺傳疾病染色體檢查,基因檢查
實驗診斷的應用範圍
(1)為臨床醫療工作服務
疾病診斷與鑑別診斷,療效的觀察與預後判斷
(2)為進行預防工作提供依據
(3)進行社會普查
(4)開展健康諮詢
二、實驗診斷的品質系統及影響因素
完善的品質保證體系
目的:檢測分析過程的誤差, 把控分析的相關環節,確保結果準確可信。
分類
室內品質管制
室間品質控制
實驗室品質體系
影響實驗診斷的因素
1.實驗室前因素
檢驗結果出錯的原因60%以上來自實驗室前,主要是標本的採集與處理。
2.實驗室因素
標本的品質與處理、儀器與試劑、人員的技能與學識、操作技術與方法、品管與標準品、安全性與成本等。
3.實驗室後因素
檢查記錄、結果書寫、資訊輸入與傳輸、實驗室與臨床的溝通等
三、病人標本的採集與處理
病人標本
以血液標本檢查最為重要
血液、尿液、糞便
各種分泌物
各種生理性和病理性體液
四、實驗診斷的臨床應用與評價
正確選擇實驗室檢查項目
原則
針對性
有效性
經濟性
及時性
診斷性實驗的評估指標
診斷靈敏度
診斷特異度
診斷準確度
五、實驗診斷參考範圍、醫學決定水準與危急值
參考範圍
各種檢驗項目都有判斷標準,即所謂的參考值或參考範圍,用於衡量受檢標本結果是否異常
醫學決定水平(MDL)
是透過觀察測定值是否高於或低於這些限值,可在疾病診斷中起排除或確認的作用,或對某些疾病進行分級或分類,或對預後作出估計。
危急值
危急值(critical values)是指某些檢驗結果出現異常超過某一界值時,可能危及病人的生命,醫師必須緊急處理,稱之為危急值。