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心智圖資源庫 第三章：雜質檢查
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第三章：雜質檢查
藥物分析 雜質檢查 藥物的雜質分析，藥物分析中的雜質檢查是確保藥物品質和安全性的重要環節。可確保藥物的品質與安全性，並保障病人的用藥安全。
編輯於2024-04-06 15:35:15
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雜質檢查
藥物雜質與限量
藥物的雜質與純度
純度（Purities）
藥物的純淨程度
藥物的純度需綜合考慮藥物的外觀性狀、理化常數、雜質檢查及含量測定,綜合評定
雜質(Impurities)
影響藥品純度的物質
藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩定性和療效，甚至對人體健康有害的物質
藥物純度與試劑純度
共同點
均規定所含雜質的種類和限量
不同點
藥物純度從用藥安全、有效和對藥物穩定性等方面考慮,只有合格品和不合格品
試劑純度是從雜質可能引起的化學變化對使用的影響以及試劑的使用範圍和使用目的加以規定，它不考慮雜質對生物體的生理作用及副作用
化學試劑一般分為4個等級【基準試劑、優級純或特殊試劑(光譜純、層析純、農藥殘留檢測級)、分析純和化學純】
化學試劑不能取代藥品
雜質的來源與種類
來源
生產過程
合成過程中，原料不純或反應不完全，中間體、副產物在精製中未除盡
製劑過程引進的原料藥及輔料中本身含有的雜質，以及原料藥與輔料相互作用而產生的雜質
試劑、溶劑、還原劑殘留
異構體、多晶型
使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質
儲藏過程
在溫度、濕度、日光、空氣等外在條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發生水解、氧化、分解、異構化、晶型轉變、聚合、潮解和發黴等變化
種類
按來源分類
一般雜質
自然分佈廣泛，在多種藥物的生產和貯藏過程中容易引入的雜質，它們含量的高低與生產過程水平密切相關
特殊雜質
是指在特定的藥物生產和貯藏過程中引入的雜質，也稱為有關物質。這類雜質隨藥物不同而不同
製程雜質、降解雜質、反應物和試劑中混入的外來雜質
按毒性分類
毒性雜質
訊號雜質
按化學性質分類
無機雜質
大多屬於一般雜質
有機雜質（特定雜質和非特定雜質）
即有關物質
分類
特定雜質
規定了明確的限度，單獨進行控制的雜質
如阿斯匹靈檢查中的遊離水楊酸、有關物質
非特定雜質
未單獨列出，僅採用一個通用的限度進行控制的一系列雜質
如阿斯匹靈檢查中的易碳化物
有機揮發性雜質
雜質的限量(Limit Test)
概念
藥物中所含雜質的最大容許量
通常用幾分或百萬分之幾 (parts per million, ppm )
雜質限量控制
限量檢查
對照法
取一定量的被檢測雜質標準液和一定量供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應結果，以確定雜質含量是否超過限量
注意平行原則
即供試溶液和對照溶液應在完全相同的條件下反應。如加入的試劑、反應的溫度、放置的時間均應相等，這樣的結果才有可比較
靈敏度法
在供試品溶液中加入一定量試劑，在一定條件下反應，不得有正反應出現
比較法
取供試品一定量依法檢查，測定特定的雜質參數，與規定的限量相比，不得更大
定量測定法
雜質限量計算法
注意單位統一 注意供試品是否有稀釋
例
雜質檢查方法
化學方法
顯色反應檢查法
沉澱反應檢查法
鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查
生成氣體的檢查法
生成氨氣
滴定法
硫酸亞鐵中的高鐵鹽檢查
色譜方法
概述
藥物雜質的結構和性質與藥物相近時，採用色譜法可以將雜質和藥物分離和檢測
色譜法是有關物質檢查的首選法
分類
薄層色譜（TLC）法
特點
設備簡單
操作簡便
分離速度快
靈敏度和分辨率較高
方法
雜質對照法
取供試品溶液及一定濃度雜質對照品溶液，分別點樣於同一薄層板上展開，進行斑點定位。將雜質斑點進行對應比較判斷
供試品溶液自身稀釋法
將一定濃度供試品溶液稀釋並作為對照溶液，然後與供試品溶液在同一板上展開比較
例
鹽酸去氧腎上腺素的相關物質檢查
雜質對照品與供試品溶液本身稀釋對照並用法
對照藥物法
採用與供試品相同藥物作為對照，比較斑點、顏色，並進行對比控制。
高效液相層析（HPLC）法
特點
分離效能高
專有屬性強
檢測靈敏度高
可準確測定各組分的峰面積
方法
外標法
概述
適用於有雜質對照品且進樣量能精確控制的情況
方法
配製雜質對照品溶液及供試品溶液，分別取一定量注入層析儀，測定雜質峰響應，外標法計算雜質濃度
特點
定量比較準確，但必須有雜質對照品
加校正因子的主成分自身對照法
概述
適用於雜質已知的控制。以主成分為對照，以雜質對照品測定雜質的校正因子
方法
校正因子和保留時間直接載入各品種品質標準
雜質的校正因子用於校正此雜質的實測峰面積
校正因子的計算與使用
特點
優點
測定時既無需雜質對照品，又考慮到了雜質與主成分響應因子不同，準確度好
缺點
雜質相對於藥物的相對保留時間和校正因子也需一併載入各品種項下
例
不加校正因子的主成分自身對照法
方法
將供試溶液稀釋成雜質限量相當的溶液作為對照溶液，調節檢測靈敏度後，取供試品溶液和對照品溶液，分別進樣，將供試品溶液中各雜質峰面積及其總和，與對照液主成分峰面積比較，以控制供試品中雜質的量
特點
單一雜質含量較少，無法得到雜質對照品，但雜質結構與主成分相似
理論上，要求雜質與主成分的反應因子基本相同（0.9-1.1）；響應因子超過0.9-1.1範圍時，宜用加校正因子的主成分自身對照法
例
苯海索有關物質檢查
峰面積歸一化法
概述
只適用於供試品中結構相似，相對含量較高且限度範圍較寬的雜質含量的粗略考查
方法
測量各雜質峰的面積和色譜上除溶劑峰以外的各色譜峰面積，計算各峰面積佔總峰面積的百分率，粗略測量供試品中雜質的含量
特點
不需對照品，簡單易行
記錄圖譜的時間應為主峰保留時間的整數倍；
通常只能粗略考察供試品的雜質含量
氣相層析（GC）法
適用於揮發性雜質的檢測
計算方法
標準溶液加入法
毛細管電泳（CE）法
適用於酵素類藥物的酵素雜質
檢查方法同HPLC中的方法
例
抑肽酶中丙胺酸-去甘胺酸-抑肽酶和去丙胺酸-抑肽酶的檢查
光譜方法
概述
依據藥物和雜質對光選擇吸收性質差異
分類
可見-紫外分光光度法
概述
利用藥物和待檢雜質紫外線特徵吸收的差異進行檢查。在雜質的最大吸收波長處測定
例
腎上腺素中腎上腺素的檢查
紅外線分光光度法
概述
主要用於藥物中無效或低效晶型的檢查，其原理為多晶型藥物由於其晶型結構不同，某些化學鍵的鍵長，鍵角等發生不同程度的變化，可導致紅外線吸收光譜中某些特徵帶的頻率、峰形、強度出現顯著的差異
僅限於晶型檢查，指紋區
例
西咪替丁的A/B晶型的紅外線光譜研究
A晶型臨床療效最佳
西咪替丁A 晶型的IR光譜圖在3150 cm-1處有2個中等分裂峰, 在1205 cm-1處有強吸收峰, 在1160 cm-1處有較強吸收峰
B晶型在3150~3350 cm-1處有肩峰, 在1180 cm-1處有強吸收峰
原子吸收分光光度法
概述
靈敏度高，廣泛用於超微量元素分析，在雜質檢查中，主要用於藥物中金屬雜質的檢查
利用藥物中所含待測元素的原子蒸汽，吸收發自光源的該元素的特定波長的光，使原子中的電子被激發，由較低能階躍遷到較高能階；測定基態原子對輻射能的吸收程度，從而求出供試藥物中待測元素含量的方法
方法
標準加入法
取供試品製備供試溶液，測定讀數為(b)
對照溶液：等量的供試品 限度量的待測元素溶液，讀數為 (a)
要求： (b)要小於(a-b)
其他
熱分析法（Thermal analysis）
概述
測定物質的物理化學性質隨溫度變化的關係
物質在受熱過程中晶型轉化、熔融、蒸發、脫水等物理變化；熱分解、氧化、還原等化學變化；伴隨的重量、溫度或能量的改變
分類
熱重分析法(Thermogravimetric Analysis, TGA)
應用熱天平在程序控溫的條件下，測量物質的質量隨溫度變化的熱分析技術
可計算出樣品在相應溫度範圍內減失質量的百分率
用於測定吸附水
差熱分析法(Differential Thermal Analysis, DTA)
在程序控制溫度下，測量供試品和惰性參考物(常用石英砂、煅制MgO)之間的溫度差與溫度(或時間)關係的熱分析技術
供試品放熱為正峰，吸熱為倒峰
差示掃描量熱法(Differential Scanning Calorimetry, DSC)
測量保持供試品和惰性參比物的溫度相同, 系統所需輸給供試品或參考物的能量差(dQ/dT）隨溫度(或時間)變化的熱分析技術
分為功率補償型與熱流型兩種
與DTA相比，更適合測量物質在物理變化或化學變化中焓的變化，且定量測定準確度更好，應用更普遍
DSC峰型方向與DTA相反，供試品放熱為倒峰，吸熱為正峰
應用
熔點和分解點測定
DSC與TG聯用，可獲得熔點訊息，驗證真偽；還可以分析熔融穩定性以及受熱分解特徵
多晶型及其轉變的表徵
晶型轉變伴隨熱效應，可用DSC和DTA研究晶型轉變或判定晶型
藥物的純度測定
應用條件
樣品純度在98.0%以上
雜質不與主成分反應
雜質不與主成分形成共晶或固熔體
雜質與熔融試樣有化學相似性
藥物在熔融過程中化學性質穩定
藥物如存在多晶現象則必須全部轉變成某一晶型
例
西咪替丁的晶型研究
酸鹼度檢查法
概述
藥物中鹼性或酸性雜質檢查時，可利用藥物與雜質之間的酸鹼性差異，採用酸鹼滴定法、指示液法或pH測定法進行檢查
分類
酸鹼滴定法
在一定指示液下，以酸或鹼滴定供試品溶液中的鹼性或酸性雜質，以酸或鹼的消耗量作為限量指標
指示液法
將一定量指示液的變色pH範圍作為供試液中酸鹼性雜質的限量指標
pH測定法
以電位法測定供試品溶液的pH，衡量其酸鹼性雜質是否符合限量規定
物理性狀檢查法
概述
根據藥物與雜質在性狀上的不同進行檢查
分類
臭味和揮發性差異
雜質有特殊氣味，如麻醉乙醚的異臭（雜醇油）
雜質不揮發，藥物揮發，如樟腦中不揮發物檢查
顏色差異
藥物本身無色，生產中引入有色的相關物質或分解產物
例
磺胺嘧啶原料藥顏色檢查
磺胺苯環上胺基氧化生成有色偶氮苯化合物
溶解行為差異
根據藥物與雜質溶解度的差異
例
葡萄糖中糊精的檢查
旋光性質的差異
藥物有旋光度而雜質沒有
黃體酮在乙醇中比旋度 186~ 198
雜質有旋光度而藥物沒有
硫酸阿托品中莨菪鹼的檢查,供試體水溶液50mg/mL不得過-0.4
藥物中一般雜質的檢查
氯化物檢查法
原理
利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應, 生成氯化銀白色渾濁液, 與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下產生的氯化銀渾濁程度比較, 濁度不得更大
操作方法（對照法）
樣品管
對照管
結果觀察方法
暗處放置5min(避免AgCl分解)
黑色的背景上自上而下的觀察
注意事項
平行試驗
加稀硝酸的目的
加速氯化銀混濁的生成,產生較好的乳濁，避免產生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉澱。一般以50ml供試液含稀硝酸10ml為宜。過多會增大氯化銀的溶解度,使濁度降低
氯化物最適的檢測濃度範圍
50ml供試液中含0.05~0.08mg的Cl-,相當於標準氯化鈉溶液(10µgCl-/ml) 5.0 ~ 8.0ml時，所顯渾濁梯度明顯根據限量取用適宜的供試品量，使氯化物的濃度在適當的範圍內
供試品溶液有色時的處理方法
內消色法
外消色法
在供試品溶液中加入某種試劑，使溶液顏色褪去後再依法檢查
例
高錳酸鉀中氯化物的檢查
因溶液呈紫色，加入適量乙醇，使顏色消失後再檢查
供試品溶液不澄清處理方法
供試品溶解後溶液不澄清應過濾，過濾時的濾紙要先用含硝酸的水溶液(1→100)洗滌, 除去濾紙中含有的氯化物
硫酸鹽檢查法
原理
硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標準硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較
操作方法
注意事項
標準硫酸鉀溶液（100μg/mL）為硫酸鉀的水溶液
以50mL供試液中含有2mL稀鹽酸為宜，過量可使硫酸鋇溶解
濃度範圍：0.1mg~0.5mg硫酸根離子/50mL，相當於標準溶液1~5mL
藥物在水中不易溶解，可加入適量與水互溶的有機溶劑將藥物溶解後依法檢查
鐵鹽檢查法
原理
硫氰酸鹽法
操作方法
注意事項
標準鐵溶液
硫酸鐵銨(含硫酸)濃度10µgFe3 /ml
最佳比色濃度
儀器分析線性範圍
5~90µg Fe3 /50ml
目視比色濃度範圍
10~50µg Fe3 /50ml
以50mL供試液中含有4mL稀鹽酸為宜，可防止Fe3 水解
過硫酸氨的作用
氧化供試品中兩價鐵變三價鐵
防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色
葡萄糖中用硝酸作氧化劑，但須加熱除去過量硝酸
色調不一致時或顏色較淺時，須加正丁醇萃取濃集比較
環狀結構有機藥物及實驗條件下不溶解藥物，而是熾灼破壞
重金屬檢查法
概述
重金屬的概念
重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙醯胺或硫化鈉作用呈色的金屬。 如：Ag、Pb Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、 Sn、As、Ni、Co、Zn等
重金屬存在影響藥物的穩定性及安全性
重金屬在體內積蓄中毒，以鉛為代表
檢查方法
硫代乙醯胺法
概述
適用於溶於水、稀酸和乙醇的藥物
原理
操作方法（對照法）
甲管
乙管
丙管
注意事項
標準鉛溶液濃度
以硝酸鉛配製標準鉛貯備液（加硝酸防止Pb2 水解），標準鉛溶液臨用前稀釋而成，標準硝酸鉛溶液10µg Pb2 /ml
適宜比色範圍為27ml溶液中含10~20µg的Pb2 ，相當於標準溶液1~2mL
硫代乙醯胺試液
溶液的pH
本法以2ml pH3.5的醋酸鹽緩衝液控制溶液pH值為3~3.5
處理過程中若使用強酸，加入硫代乙醯胺前應先加氨水至對酚酞中性，再加緩衝液
供試品溶液有顏色時的處理
外消色法
在對照管中加稀焦糖溶液或其他無幹擾的有色溶液至顏色相同
內消色法
幹擾物的排除方法
若供試品中有微量Fe3 存在，會氧化硫化氫生成單質硫，幹擾比色，可加入抗壞血酸或鹽酸羥胺0.5~1.0g還原Fe3 為Fe2 ，消除乾擾
若供試品為鐵鹽，Fe3 在鹽酸中生成 HFeCl，用乙醚提取除去，剩餘微量鐵在氨鹼性溶液中，加KCN掩蔽，然後用第三法檢查
熾灼殘渣法
概述
適用於含芳香環、雜環以及不溶於水、稀酸、乙醇及鹼的有機藥物
500~600℃熾灼後的殘渣，經處理後，依第一法檢查
含鈉及氟的有機藥物應用鉑坩堝、石英坩堝或硬質玻璃蒸發皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）
原理
重金屬可能與含有強配位基團的芳香環、雜環藥物形成牢固的價鍵作用，影響直接溶樣檢查；或供試品不溶解，可能包覆重金屬。這時，需先將供試品熾灼破壞為重金屬氧化物殘渣，再加鹽酸轉化，依第一法檢查
操作方法
硫化鈉法
概述
適用於溶於鹼而不溶於稀酸或在稀酸中生成沉澱的藥物。如磺胺類、巴比妥類
原理
注意事項
NaOH鹼性條件
顯色劑用硫化鈉，臨用新製
砷鹽檢查法
古蔡氏法（Gutzeit）
原理
金屬鋅與酸作用產生新生態的氫與藥物中微量砷鹽反應生成揮發性的砷化氫，遇溴化汞試紙產生黃色至棕色的砷斑，與同條件下一定量標準砷溶液所生成的砷斑比較,判斷砷鹽的量
操作方法
檢砷瓶：A 導氣管：C 具塞孔：DE
導氣管C裝入醋酸鉛棉球
接著旋塞D的平面上放兩片溴化汞試紙
樣品、對照品分別置於檢砷瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加2.5%碘化鉀試液5ml與0.3%酸性氯化亞錫試液5滴，室溫放置10分鐘
加鋅粒2g，立即將裝妥的導氣管C密塞與A瓶，置25-40 ℃水浴中，反應45分鐘，取出溴化汞試紙，比較砷斑
注意事項
標準砷斑大都採用標準砷溶液（1μg/ml）2ml
試劑的作用
碘化鉀試液
還原劑
As5 →As3
五價砷生成AsH3的反應速度比三價砷速度慢，加入KI使五價砷還原為三價砷後再與活潑氫反應，以增加AsH3的生成速度
I-與反應生成的鋅離子配位，促進生成砷化氫的反應進行
酸性氯化亞錫試液
還原劑
將五價砷還原為三價砷(As5 →As3 )
KI被氧化生成的I2再還原為I-
醋酸鉛棉球
排除硫化物的干擾（1mgS2-）
幹擾物的排除
供試品是硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽
幹擾原因
排除方法
加入濃硝酸處理
供試品是鐵鹽（Fe3 ）
幹擾原因
Fe3 能消耗還原劑(KI、SnCl2)，並能氧化砷化氫
排除方法
先加酸性SnCl2試液使Fe3 →Fe2
共價鍵結合的砷化物
排除方法
進行有機破壞
酸破壞法（加稀硫酸與溴化鉀）或鹼破壞法（氫氧化鈣500-600℃灼燒或加入無水碳酸鈉鹼融）
古蔡氏法特點
優點
靈敏度高（1µgAs）
缺點
Sb幹擾
含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法，需用白田道夫法
二乙基二硫代氨基甲酸銀法(Ag-DDC法)
概述
本法不僅用於砷鹽的限量檢查, 而且可用作微量砷鹽的含量測定
DDC-Ag：
原理
金屬鋅與酸作用產生新生態氫，反應生成揮發性的砷化氫，還原DDC-Ag產生紅色膠態銀，用比色法或測定吸光度與標準對照比較
操作方法
同古蔡氏法生成砷化氫
砷化氫還原Ag-DDC溶液,產生紅色的膠態銀
目視比色法或510nm測定吸光度
特點
靈敏度高：0.5 µgAs/30ml
可儀器測定，亦可定量1 µg~10µg/40ml
Sb幹擾小，500µg銻不干擾
白田道夫法
原理
SnCl2在HCl中能將砷鹽還原為棕褐色的膠態砷，與一定量的標準砷溶液按同法處理後進行比較, 判斷供試品中砷鹽的限量
特點
優點
不受Sb幹擾
缺點
靈敏度低：20µgAs2O3/10ml
加入少量HgCl2,靈敏度提高至2µgAs2O3（1.5 µgAs）/10ml
次磷酸法
原理
在鹽酸酸性溶液中，次磷酸還原砷鹽為棕色的遊離砷，與標準砷溶液同法處理後比較顏色
特點
不受硫化物、亞硫酸鹽和Sb的影響
靈敏度低於古蔡氏法
乾燥失重測定法
概述
乾燥失重是指藥物在規定條件下經乾燥後所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發性物質
操作方法
ChP規定供試品連續兩次乾燥或熾熱後秤重的差異在0.3 mg 以下即達到恆重
測定方法
常壓恆溫乾燥法
受熱穩定的藥物，105℃恆溫加熱
方法
供試品應平鋪在扁形稱量瓶中乾燥，厚度不可超過5mm；若為疏鬆物質，則不可超過10mm
放入烘箱或乾燥器進行乾燥，應將瓶蓋取下或半開
置於烘箱內乾燥的供試品，應在乾燥後取出置於乾燥器中放冷，然後稱定重量
減壓乾燥法與恆溫減壓乾燥法
熔點低或受熱分解的藥物，室溫或恆溫，乾燥器中進行
常用乾燥劑：五氧化二磷、無水氯化鈣、矽膠；恆溫減壓乾燥器中常用的乾燥劑：五氧化二磷
乾燥劑乾燥法
受熱分解或易昇華的藥物，乾燥器中進行
熱分析法
計算方法
水分測定法
容量分析法
費休氏微量水分測定法
原理
操作方法
精密稱取供試品適量（約消耗費休氏試液1~5ml），加無水甲醇2~5ml，不斷攪拌下用費休氏試液滴定至溶液由淺黃色變為紅棕色，或以永停滴定法指示終點；另作空白試驗
計算方法
供試品中水分含量(％)＝(A－B) F／W ×100％
A為供試品所消耗費休氏試液的容積，ml
B為空白所消耗費休氏試液的容積，ml
F為每1ml費休氏試液相當於水的重量，mg
W為供試品的重量，mg
注意事項
理論上費休氏試劑中水:碘:二氧化硫:甲醇:吡啶=1:1:1:1:3，但為了反應完全且部分試劑兼做溶劑，實際上僅碘與水的摩爾比為1: 1，而碘、二氧化硫、吡啶的比例達1:3:5，甲醇更遠遠過量
無法區分藥物中水分的形態使結晶水或吸附水，可用熱分析法識別
烘乾法
減壓乾燥法
甲苯法
氣相層析法
熾灼殘渣檢查法
概述
檢查不含金屬的有機藥物或揮發性無機藥物中混入的無機雜質（金屬氧化物或無機鹽類）
熾灼殘渣指有機藥物或揮發性無機藥物，在硫酸存在條件下，進行炭化和熾灼後，所殘留的非揮發性無機雜質的硫酸鹽灰分
原理
樣品炭化後 H2SO4濕潤→700~800℃熾灼至恆重→熾灼殘渣（硫酸灰分），限量一般為0.1%~0.2%
操作方法
計算方法
注意事項
供試品的取樣量應依據熾灼殘渣限量及稱量誤差決定
含氟的藥物對瓷坩鍋有腐蝕，應使用鉑坩堝
若殘渣需留作重金屬檢查，則500~600℃熾灼至恆重
加硫酸處理是使雜質轉化為穩定的硫酸鹽，並幫助有機物炭化
易炭化物檢查法
概述
檢查藥物中遇硫酸易炭化或易被氧化呈色的微量有機雜質
方法
硫酸炭化後與對照液比較
比色：同置白色背景前，平視觀察比較。
比色用對照液分類
「溶液顏色檢查」項目下的標準比色液
由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液和比色用硫酸銅液依規定方法配成的對照液
高錳酸鉀液
殘留溶劑測定法
常見殘留溶劑
第一類（毒性大，致癌，有害，避免使用）
苯
四氯化碳
1,2-二氯乙烷
1,1-二氯乙烯
1,1,1-三氯乙烷
第二類（對人有一定毒性，限制使用）
乙腈
氯苯
三氯甲烷
甲醇
吡啶等
第三類（對人無毒性，建議使用）
醋酸
丙酮
正丁醇等
第四類（尚無毒理學資料的溶劑）
石油醚
三氯乙酸
異辛烷等
測定方法
氣相層析法
系統適用性試驗
一般要求理論塔板數填充柱大於1000；毛細管柱大於5000
待測峰與相鄰峰的分離度>1.5
相對標準差內標法≤5%；外標法≤10%
測定方法
直接進樣法
取標準溶液與供試品溶液，分別連續進樣3次，每次2μl，測得對應的峰面積，用內標法定量時，計算待測物與內標物峰面積的比值，供試品溶液所得的峰面積比的平均值不得大於由標準溶液所得的峰面積比的平均值。外標法定量時，供試品溶液所得的待測物峰的平均面積不得大於由標準溶液所得的待測物峰的平均面積
頂空分析法
將含揮發性雜質的供試品置於一耐壓的密閉系統中，在一定的溫度，經過足夠的時間，該揮發性雜質在氣相或液相中的含量達到平衡並具一定的比值，取其氣相中氣體進行測定，其結果與液相中含量成正比。此分析方法亦稱液上氣體分析法，常與氣相層析法聯用，稱為頂空氣相層析法
頂空瓶加熱溫度一般70~85℃，頂空瓶加熱時間30~60分鐘
溶液的製備
通常以水為溶劑；對於非水溶性藥物，可採用N,N-二甲基甲醯胺或二甲基亞砜作溶劑
計算方法
以內標法依峰面積比或外標法的峰面積定量
溶液顏色檢查法
概述
控制藥物中有色雜質限量的方法
檢查方法
目視比色法
即與標準比色液比較的方法
標準比色液的配製
6種色調：綠黃色、黃綠色、黃色、橙黃色、橙紅色、棕紅色
分光光度法
單一波長定量
配製一定濃度的供試溶液，在規定波長測定吸收度，吸收度不得過規定值
色差計法
全波長範圍定量
本法是透過色差計直接測定溶液的透視三刺激值，對其顏色進行定量表述和分析的方法。測色儀器一般為光電積分型色差計
溶液澄清度檢查法
概述
檢查藥物中的微量不溶性雜質，用作注射劑的原料藥一般應作此項檢查
檢查方法
目視比濁法
操作方法
濁度標準液的配置
中國藥典規定以濁度標準液作為澄清度檢查的標準
烏洛托品在偏酸性條件下水解產生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶於水，形成白色混濁。 1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配製濁度標準貯備液，再按比例稀釋
判斷
藥典中規定的“澄清”，係指供試品溶液的澄清度相同於所用溶劑，或未超過0.5號濁度標準液
濁度儀法
供試品溶液的濁度用濁度儀測定。溶液中不同大小、不同特性的微粒物質包括有色物質皆可使人射光產生散射，透過測定透射光或散射光的強度，可以檢查供試品溶液的濁度。儀器測定模式通常有三種類型，透射光式、散射光式和透射光-散射光比較測量模式
特殊雜質的檢查方法
特殊雜質的研究規範
新原料或新製劑總的雜質表觀含量在0.1%及其以上的雜質以及表觀含量在0.1%以下的具強烈生物作用的雜質或毒性雜質，要求定性或確證其結構
特殊雜質的鑑定
合成雜質對照品
色譜法製備雜質對照品