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- 30
immunologie clinique
Les points de connaissances pour l'examen du titre professionnel intermédiaire en tests médicaux comprennent les anticorps monoclonaux, les réactions d'agglutination, les maladies auto-immunes, les maladies immunoprolifératives, les réactions de précipitation, etc.
Edited at 2024-01-14 00:56:14
- Cent ans de solitude - Tableau des relations entre les personnages
Cent ans de solitude est le chef-d'œuvre de Gabriel Garcia Marquez. La lecture de ce livre commence par l'analyse des relations entre les personnages, qui se concentre sur la famille Buendía et raconte l'histoire de la prospérité et du déclin de la famille, de ses relations internes et de ses luttes politiques, de son métissage et de sa renaissance au cours d'une centaine d'années.
- Cent ans de solitude - Tableau des relations entre les personnages
Cent ans de solitude est le chef-d'œuvre de Gabriel Garcia Marquez. La lecture de ce livre commence par l'analyse des relations entre les personnages, qui se concentre sur la famille Buendía et raconte l'histoire de la prospérité et du déclin de la famille, de ses relations internes et de ses luttes politiques, de son métissage et de sa renaissance au cours d'une centaine d'années.
- Modèle de processus de gestion de projet
La gestion de projet est le processus qui consiste à appliquer des connaissances, des compétences, des outils et des méthodologies spécialisés aux activités du projet afin que celui-ci puisse atteindre ou dépasser les exigences et les attentes fixées dans le cadre de ressources limitées. Ce diagramme fournit une vue d'ensemble des 8 composantes du processus de gestion de projet et peut être utilisé comme modèle générique.
immunologie clinique
- Cent ans de solitude - Tableau des relations entre les personnages
Cent ans de solitude est le chef-d'œuvre de Gabriel Garcia Marquez. La lecture de ce livre commence par l'analyse des relations entre les personnages, qui se concentre sur la famille Buendía et raconte l'histoire de la prospérité et du déclin de la famille, de ses relations internes et de ses luttes politiques, de son métissage et de sa renaissance au cours d'une centaine d'années.
- Cent ans de solitude - Tableau des relations entre les personnages
Cent ans de solitude est le chef-d'œuvre de Gabriel Garcia Marquez. La lecture de ce livre commence par l'analyse des relations entre les personnages, qui se concentre sur la famille Buendía et raconte l'histoire de la prospérité et du déclin de la famille, de ses relations internes et de ses luttes politiques, de son métissage et de sa renaissance au cours d'une centaine d'années.
- Modèle de processus de gestion de projet
La gestion de projet est le processus qui consiste à appliquer des connaissances, des compétences, des outils et des méthodologies spécialisés aux activités du projet afin que celui-ci puisse atteindre ou dépasser les exigences et les attentes fixées dans le cadre de ressources limitées. Ce diagramme fournit une vue d'ensemble des 8 composantes du processus de gestion de projet et peut être utilisé comme modèle générique.
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immunologie clinique
Introduction
Introduction
Fonction immunitaire
la défense
Éliminer les micro-organismes pathogènes
Améliorer
réaction d'hypersensibilité
affaiblir
maladie d'immunodéficience
étranger
auto-stabilisant
Supprimer les cellules endommagées ou sénescentes
Améliorer
maladie auto-immune
Ne peut pas être utilisé par soi-même
moniteur
Éliminer les cellules malignes mutées ou aberrantes
affaiblir
tumeur maligne
Anti-tumoral
cellule
cellules dérivées de cellules précurseurs lymphoïdes
Cellules NK
Cellules qui jouent un rôle clé dans l’inflammation aiguë
neutrophiles
cellules pouvant provoquer des réactions allergiques aiguës
basophiles
Cellules ayant pour fonction d’éliminer de manière coopérative les complexes immuns de la circulation sanguine
des globules rouges
réponse immunitaire
Une série de réactions qui se produisent lorsqu'elles sont stimulées par des antigènes
Le but d’excréter ou de décomposer l’antigène
fonctionnalité
Identifier soi et non-soi
spécificité
mémoire
Diversité, tolérance, autorégulation
Classification
l'immunité innée
Également connue sous le nom d’immunité innée, immunité non spécifique
première ligne de défense
barrière tissulaire
Peau et muqueuses
Caractéristiques
Premiers jours
rapide
inné
non spécifique
immunité adaptative
Aussi appelée immunité acquise, immunité spécifique
processus
identifier
Cellules présentatrices d'antigènes (APC)
Reconnaître, ingérer, dégrader
identifier
ingérer
avaler dans l'estomac
dégradation
décomposé en peptides antigéniques
Soumettre
libéré après décomposition
Présenter des informations sur l’antigène
Aux lymphocytes T auxiliaires et aux lymphocytes associés
Activation
Cellules T et B
Le processus d’activation, de prolifération et de différenciation après réception de signaux de stimulation antigénique
stimulation directe
Stimulation post-présentation APC
Cellules B
Cellule plasmatique
Immunité humorale
Immunité humorale complète grâce aux phagocytes
Cellules T
Cellules effectrices (cellules T tueuses)
immunité cellulaire
étape d'effet
Cellule plasmatique
sécréter des anticorps
cellules dépendantes du thymus
Lors de l’activation des cellules B
Besoin d'aide pour les lymphocytes T
Cellules T
Cellules T auxiliaires (cellules Th)
sécréter des cytokines
Cellules T tueuses (CTL)
Exécuter des effets cytotoxiques
cellules cibles
cellules tumorales
cellules infectées par des bactéries
organe transplanté
cellules de mémoire
Après prolifération et différenciation, un petit nombre de lymphocytes T et de lymphocytes B
N'effectue pas directement de fonctions effectrices
Agissant sur
à nouveau une réponse immunitaire
Aucune étape d'activation requise
Produire directement des anticorps
réponse immunitaire primaire
Caractéristiques de la production d'anticorps
anticorps de faible affinité
Immunité active artificielle et immunité passive artificielle
immunité active artificielle
Vaccination avec vaccin (antigène)
immunité passive artificielle
Sérum immunitaire (anticorps), lymphokines
comme le tétanos
Pas besoin de stimuler
Immunité immédiatement
tissus et organes immunitaires
système
organe immunitaire
Cellules immunitaires
molécules immunitaires
organe immunitaire
organe immunitaire central
Le lieu où les cellules immunitaires sont produites, différenciées et mûries
moelle
organe hématopoïétique important
Le berceau des cellules sanguines et des lymphocytes (T, B)
Cellules B
endroit mature
Les fluides corporels proviennent également de la moelle osseuse.
Thymus
Cellules T
endroit mature
organes immunitaires périphériques
site de la réponse immunitaire
Lieux d’identification et d’activation
recirculation lymphocytaire
Point de départ, station intermédiaire et destination du retour
organes immunitaires périphériques
sang
organes immunitaires périphériques
organe
Ganglions lymphatiques
Le plus gros montant
rate
maximum
tissu lymphoïde associé à la muqueuse
amygdales, ganglions lymphatiques de l'intestin grêle, appendice
Cellules immunitaires
Classification
Lymphocytes
Cellules T et B
Cellules NK
Cellules mononucléées-phagocytaires
Rôle de soutien
phase tardive de l'immunité humorale
stade précoce de l'immunité cellulaire
cellules présentatrices d'antigènes
Les monocytes pénètrent dans les tissus
C'est des phagocytes
Lymphocytes
Cellules T
Fonction
immunité cellulaire
de lymphocytes totaux du sang périphérique
60%-80%
marquage des surfaces
CD28
exprimée en
Surface des lymphocytes T
Peut interagir avec le CD80 à la surface des cellules B
Stimuler l'activation des lymphocytes T
CD45RO
Antigène CD spécifique à la surface des lymphocytes T mémoire
sous-population
Ème
Fonction
Promouvoir et améliorer la réponse immunitaire
Th1
Sécréter IL-2, IFN-r (interféron-r), TNF-β (facteur de nécrose tumorale β)
Promouvoir l'immunité cellulaire
Th2
Sécrète l'IL-4, 5, 6, 10
Promouvoir l'immunité humorale
Régule négativement les réponses immunitaires cellulaires
TCF-β
Régulation négative de l'immunité cellulaire
CTL
reconnaissance spécifique
Complexe endogène de molécules peptide antigénique-CMH de classe I
Conditions dans lesquelles les cellules tumorales sont tuées
Exprime les facteurs du CMH de classe I
Tuerie spécifique des cellules cibles
Cellules B
Fonction
Immunité humorale
de lymphocytes totaux du sang périphérique
8%-15%
marquage des surfaces
mIgM = u chaîne Ig
CD80
exprimée en
surface des cellules B activées
Interagit avec CD28 à la surface des cellules T
Stimuler l'activation des lymphocytes T
CD21
Molécules CD à la surface des cellules B matures
Peut se lier au virus Epstein-Barr
Cellules B2
Cellules B majeures dans le sang périphérique
Cellule primaire qui assure l'immunité humorale
Cellules B1
Impliquées dans la régulation immunitaire de l'organisme, les maladies auto-immunes et les tumeurs dérivées des cellules B sont étroitement liées
Type d'antigène reconnu
polysaccharide
Cellules tueuses naturelles (cellules NK)
Caractéristiques
non spécifique
Aucune stimulation antigénique requise
Pas besoin d'activer
Tuer directement les cellules cibles
Non limité par les molécules du CMH
Le cytoplasme contient des granules azurophiles
marquage des surfaces
CD56, CD16
CD56 CD3-CD16
Deux vieillards baisent directement sans stimulation
Détermination des cellules cibles actives
Activité des cellules NK humaines
Lignée cellulaire K562
Activité des cellules NK de souris
Lignée cellulaire YAC
Cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps
À médiation cellulaire : cellules NK
ADCC
La fonction tueuse des cellules NK nécessite également l’aide d’anticorps
Anticorps nécessaires
IgG
processus
L'IgG se lie au déterminant antigénique correspondant de la cellule cible
Les cellules NK se lient au segment Fc des IgG
Activer les cellules NK
Libérez de la perforine, des granzymes, etc. pour tuer les cellules cibles
apoptose des cellules cibles
Détection
Activité de destruction des cellules NK
Test de cytotoxicité
cellules immunitaires auxiliaires
Glossaire
Lymphocytes
Surtout les lymphocytes T
L'activation nécessite la participation de non-lymphocytes
Classification
Cellules mononucléées-phagocytaires
Cellules dendritiques
Cellules mononucléées-phagocytaires
gros phagocytes
Monocytes dans le sang
Macrophages dans les tissus
La surface contient des récepteurs scavenger, TcrR, TLR et des récepteurs du complément
Pas de récepteur de reconnaissance d'antigène
Parce que les macrophages ne sont pas spécifiques
petits phagocytes
neutrophiles
marquages superficiels
Cellules mononucléées-phagocytaires
CD14
neutrophiles
CD33
Cellules dendritiques
Aucune capacité phagocytaire
Possède une forte capacité de présentation des antigènes
Cellules présentatrices d'antigènes (APC)
marquages de surface importants
Antigène du CMH de classe II
Après l'activation des macrophages, des niveaux élevés de
Les niveaux d'expression sont faibles dans les macrophages au repos
À temps plein
Cellules mononucléées-phagocytaires
Cellules dendritiques
Cellules présentatrices primaires de la réponse immunitaire primaire
Cellules B
Aucune activation requise
Les principales cellules présentatrices de la réponse immunitaire à nouveau
À temps partiel
Cellules endotheliales
Cellules épithéliales
cellules T activées
doit être activé
Isolement et préservation des cellules immunitaires
séparation
Isolement des cellules mononucléées
Liquide de séparation Ficoll
Méthode de centrifugation sur gradient de densité unique
Il n'y a qu'une seule densité, une seule couche (couche intermédiaire) après centrifugation
Le monocœur est également ici
Isoler les cellules mononucléées
Lymphocytes
noyau unique
en couches
plaquettes, couche de plasma
Couche de cellules mononucléées (milieu de séparation Ficoll)
granulocytes, couche de globules rouges
Plage de gravité spécifique
cellules mononucléées
1.075-1.090
granulocytes multinucléés
Environ 1.092
plaquettes
1.030-1.035
Isolement des lymphocytes
Méthode d'adhésion, méthode de filtration sur colonne d'adsorption
principe
Les cellules mononucléées peuvent adhérer activement au verre, au plastique, à la laine de nylon, à la fibre de coton et au gel de dextrane
Retirer les monocytes de la suspension
Obtenir une population lymphocytaire pure
méthode d'attraction magnétique
Le mononoyau peut phagocyter les particules de fer
Méthode de séparation Percoll
centrifugation continue sur gradient de densité
en couches
cellules mortes, plaquettes, plasma
Monocytes (couche supérieure)
Lymphocytes (couche inférieure)
granulocytes, couche de globules rouges
Isolement des cellules T et B
Méthode de sédimentation en rosette E
Les lymphocytes T possèdent des récepteurs érythrocytaires de mouton (récepteur E/récepteur CD2)
Cellules T
Méthode de sédimentation en rosette EA
Les cellules B ont des récepteurs IgG Fc
Peut se lier au segment Fc des immunoglobulines IgG
Cellules B
Isolement des sous-ensembles de lymphocytes T
principe
Selon les caractéristiques des cellules correspondantes et différents marqueurs de surface
Ème
CD4
CTL
CD8
Méthode de liaison et de séparation par plaque d’affinité
Méthode de séparation par microsphères magnétiques
Méthode de séparation par séparateur de cellules activé par fluorescence
sauvegarder
Conservation à long terme
Cryogénie à l'azote liquide
-196
Agent protecteur
diméthylsulfoxyde
Test de viabilité de cellules isolées
Voir s'il a une fonction
Vérifiez les fonctions avant de sauvegarder
coloration au bleu trypan
Y compris vérifier si le sperme est vivant ou mort
bleu trypan
Membrane cellulaire intacte et imperméable aux cellules vivantes
Les cellules vivantes ne se colorent pas
coloration des cellules mortes
bleu
Détection des marques de surface
Méthode des rosettes de cellules sensibilisées aux anticorps
Guirlande E
Guirlande EA
Immunocytochimie
Les anticorps marqués par des enzymes se lient à des récepteurs spécifiques sur les cellules
Pourcentage de cellules colorées observées au microscope ordinaire
Immunofluorescence
Les anticorps marqués à la fluorescéine se lient à des récepteurs spécifiques des cellules
Observation au microscope à fluorescence du pourcentage de cellules fluorescentes
cytométrie en flux
Test fonctionnel des lymphocytes
Test de la fonction des lymphocytes T
Test de prolifération des lymphocytes T/transformation lymphoblastique (test in vitro) (test de transformation lymphocytaire PHA)
principe
Après que les cellules T soient stimulées par des mitogènes ou des antigènes in vitro
Augmentation de la synthèse intracellulaire des protéines et des acides nucléiques
Taille accrue, synthèse accrue d'ADN dans le noyau et d'ARN dans le cytoplasme
Augmentation du cytoplasme
La cavitation apparaît
Chromatine nucléaire lâche
Les nucléoles sont évidents
revenir au lymphoblaste
cellisation mère
Retransformée en mère, pour proliférer
irritants
mitogène non spécifique
Phytohémagglutinine (PHA)
Concanavaline A (ConA)
Phytolacca americana (PWM)
antigène spécifique
Dérivé protéique purifié (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
Anatoxine tétanique
Stimuler la prolifération des lymphocytes T
antigène tumoral
cellules allogéniques
Phytohémagglutinine (PHA)
Stimuler la prolifération des cellules B
Virus d'Epstein-Barr
Stimule simultanément la prolifération des lymphocytes T et B
Dérivé protéique purifié (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
Méthode de détection
Examen morphologique
Méthode d’incorporation du 3H-TdR (méthode aux radionucléides)
Les lymphocytes activés absorbent les précurseurs pour la synthèse de l'ADN
Thymidine marquée au 3H
Selon la quantité de mélange
Test de cytotoxicité médiée par les lymphocytes T
principe
Lorsque les cellules T sensibilisées rencontrent à nouveau l'antigène de la cellule cible correspondant
Destruction et lyse démontrées des cellules cibles
Une application clinique
Évaluer le niveau immunitaire des cellules du corps
En particulier, mesurer la capacité des CTL chez les patients atteints d'une tumeur à tuer les cellules tumorales
Déterminer le pronostic et observer l’effet curatif
Tests in vivo
principe
Une fois que le corps normal a établi une immunité cellulaire contre un antigène spécifique,
Faire un test cutané avec le même antigène
réaction d'hypersensibilité retardée positive
méthode
Test tuberculinique (OT/PPD)
Vaccination sous-cutanée
2-3 jours plus tard
rougeur, gonflement, cloques
>20mm
Preuve d'infection tuberculeuse
Si le patient reçoit un diagnostic de tuberculose
PPD négatif
Démontre une fonction immunitaire cellulaire réduite
Une application clinique
S'il possède une capacité de réponse immunitaire cellulaire spécifique à un certain antigène
Statut immunitaire cellulaire
Diagnostic de certaines infections microbiennes pathogènes (tuberculose, lèpre)
Diagnostiquer les maladies d'immunodéficience cellulaire
Déterminer le pronostic de la maladie
Tests fonctionnels des cellules B
Test de prolifération des cellules B
principe
Identique au test de prolifération des lymphocytes T
irritants
Cellules B de souris
Lipopolysaccharide bactérien (LPS)
cellules B humaines
Staphylococcus aureus et anticorps anti-IgM avec SPA
SPA
Protéine A staphylococcique
Test de plaque hémolytique
La capacité des lymphocytes B à produire des anticorps
principe
Utilisation des globules rouges de mouton (SRBC)
Souris immunisées
Retirez la rate de la souris
Préparation de suspension de splénocytes
À l’intérieur se trouvent des plasmocytes
Préparation de plaques de gélose contenant du SRBC
Ajouter la suspension de cellules de rate à la plaque
Si des anticorps anti-SRBC sont produits, la zone environnante sera sensibilisée
Avec la participation du complément
Dissoudre SRBC
Formation de plaques hémolytiques visibles à l'œil nu
processus
signification clinique
Chaque plaque contient une cellule formant des anticorps au centre
Nombre de plaques
Nombre de cellules formant des anticorps
taille des plaques
Combien d’anticorps chaque cellule produit-elle ?
test de plaque hémolytique inversé
Déterminer le nombre de cellules productrices d'anticorps
Test immunospot lié à une enzyme (ELISPOT)
POT
signification des taches
application
Tests in vitro
Cellules B d'anticorps spécifiques
Quantité de sécrétion d'anticorps
Cellules T sécrétant des cytokines
Peut détecter les cellules sécrétant des anticorps
Il peut également détecter la quantité d'anticorps sécrétée
Test de fonction des cellules phagocytaires
Test de la fonction des neutrophiles
Test fonctionnel de chimiotaxie
Méthode de perméabilité de la membrane filtrante (méthode de la chambre de Boyden)
test de fenêtre cutanée
Capacité bactéricide intracellulaire
Test de réduction du nitro bleu tétrazolium (NBT)
Taux positif de personnes normales
5%-10%
Le taux de positivité a considérablement augmenté
infection bactérienne systémique
Phagocytose et activité métabolique
Méthode de chimiluminescence
Substances pouvant améliorer l’efficacité lumineuse
Luminol
Test de fonction des macrophages
Test de dégagement des particules de carbone
Les phagocytes peuvent avaler des particules de carbone
molécules immunitaires
Cellules immunoactives ou cellules apparentées
Sécrété pour participer à la réponse immunitaire ou à la régulation immunitaire de l'organisme
Substances protéiques et polypeptidiques
Classification
Immunoglobuline
Anticorps
complément
Cytokines
molécules d'adhésion cellulaire
antigène de différenciation des leucocytes humains
Immunoglobuline
Immunoglobuline (Ig)
Une globuline qui a une structure chimique similaire à celle d'une molécule d'anticorps
Forme en Y
Anticorps (Ab)
Globuline produite par les lymphocytes B qui prolifèrent et se différencient en plasmocytes après avoir reçu une stimulation antigénique.
Exercer la fonction immunitaire humorale
Anticorps avec des effets secondaires minimes
anticorps à petites molécules
Le support le plus efficace pour les médicaments thérapeutiques
Des anticorps monoclonaux
Tous les anticorps sont des immunoglobulines
Toutes les immunoglobulines ne sont pas des anticorps
comme le myélome multiple
Classification
Sécrété (Igs)
Principalement trouvé dans les fluides corporels
Avoir diverses fonctions d'anticorps
Modèle (mIg)
Exprimé à la surface des cellules B comme récepteur d'antigène
immunoglobulines de surface membranaire
structure chimique
Les molécules d'Ig sont composées de 4 chaînes peptidiques
2 chaînes lourdes identiques (H)
Chaîne γ, α, μ, δ, ε
Différentes chaînes lourdes, différents types d'immunoglobulines
2 guirlandes lumineuses identiques (L)
Chaîne K, L
K:L environ 2:1
Deux lourds et deux légers, changement supérieur et inférieur constant, classification lourde et constante, classification légère et constante, antigène de noeud variable léger et lourd
Classification des immunoglobulines
région constante de la chaîne lourde
Typage des immunoglobulines
région constante de la chaîne légère
Antigénicité de la région constante de la chaîne lourde (CH)
IgG (γ)>IgA (α)>IgM (μ)>IgD (δ)>IgE (ε)
Segment FC
Région constante (région VH)
Epitopes isotypes d'immunoglobuline
Région constante (CH, CL)
site de liaison à l'antigène de l'immunoglobuline
Variabilité des chaînes lourdes (H) et des chaînes légères (L) (région V)
Région hypervariable (HVR)
Dans la région variable de l’anticorps (région V)
site qui se lie à un épitope antigénique
Également connue sous le nom de région déterminant la complémentarité (CDR)
Il existe 6 sites qui se lient réellement à l’antigène.
Classification
IgG
force principale
Le contenu le plus élevé
Le seul anticorps capable de traverser le placenta
Autoanticorps, anticorps hypersensibles de type II, anticorps secondaires (anticorps secondaires) dans les tests immunologiques
IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
La teneur la plus élevée en IgG1
Les IgG4 ne peuvent pas activer le complément
Immunoélectrophorèse convective
IgG1 et IgG2
grâce à l'électroosmose
Se diriger vers la cathode
IgG3 et IgG4
à cause du courant
avancer vers la positivité
Longue période d'incubation
Haute affinité
anticorps primaires de la réponse immunitaire secondaire
effet
IgM
Premier Mars
pentamère
Grand poids moléculaire
Macroglobuline
Les premiers anticorps synthétisés et sécrétés au cours de l'ontogenèse
Augmentation des IgM dans le sang de cordon des nouveau-nés
infection intra-utérine
Anticorps produits pour la première fois après la stimulation antigénique
Les taux sériques d’IgM augmentent pendant l’infection
infection récente
Peut provoquer l'agrégation des globules rouges en milieu salin
Identification du groupe sanguin (méthode par diapositive)
Faible affinité
La plus forte capacité à activer le complément
lectines naturelles
agglutinine froide
syndrome des agglutinines froides
Maladies auto-immunes causées par les immunoglobulines IgM
IgA
garde-frontière
Sécrété (sIgA)
structure dimère
Contient une chaîne J et un patch sécrétoire
Participer à l’immunité muqueuse locale
anticorps primaire
Présence de tractus gastro-intestinal, sécrétions bronchiques, colostrum, salive, larmes
Les IgA présentes dans le lait maternel améliorent la barrière immunitaire locale chez les nourrissons 4 à 6 mois après la naissance
anticorps locaux
IgE
le moins de contenu
Anticorps cytotropes
Affinité pour les mastocytes et les basophiles
Réaction d'hypersensibilité de type I
augmenter
Réaction d'hypersensibilité de type I
Asthme bronchique, rhinite allergique
maladies non allergiques
Myélome à IgE
infection parasitaire
Préparation de fragments d'immunoglobuline
méthode enzymatique
Sensibilité à la papaïne
Les IgG sont divisées en 2 fragments Fab et un fragment Fc
Enzymes utilisées pour fabriquer des fragments Fc d'immunoglobulines
Pepsine
Les IgG sont divisées en F(ab)2 et en plusieurs petits fragments
sous-thème
Dosage d'immunoglobulines dans les liquides corporels
Détermination des IgG, IgA, IgM
Contenu niveau g/L
Méthode d'immunodiffusion circulaire unidirectionnelle
immunoturbidimétrie
Plus utilisé
Dosage immuno-enzymatique
Détermination des sous-classes d'IgG
sensibilité la plus basse
complément
Aperçu
Complément (C)
Un groupe de glycoprotéines sériques qui ont une activité semblable à celle d'une enzyme et qui sont thermolabiles (principalement des β-globulines).
mais pas une enzyme
Synthétisé par les cellules hépatiques et les macrophages
Les antigènes stimulent le corps
ne produira pas
système complémentaire
Composition
ingrédients inhérents
C1, C2, C3, C4, C5
protéine régulatrice du complément
Composition du récepteur du complément
C3
Le contenu le plus élevé
C2
Le contenu le plus bas
Facteur D (pas de C2)
Le contenu le plus bas
Poids moléculaire minimal
Cq1
Le plus grand poids moléculaire
Un fragment de C1
propriétés chimiques
Lyophilisation
garde-le actif
inactivation du complément
56℃
30 minutes
Acides et bases forts
Fort choc
certains additifs
Éther
éthanol
Protéase
Rayonnement UV
voie d'activation
C9 est N
étape d'identification
Nécessite la participation d'immunoglobulines
L'IgM ou l'IgG se lient à l'antigène
Activer C1q et C1
étape d'activation
C1 coupe C4 et C2
Formation de convertase C3 (C4b2b)
La convertase C3 clive C3
Formes C5 convertase (C4bC2bC3b)
Étape d'attaque du film MAC
La convertase C5 clive C5
Formation complexe C5b67
C5b678 intégré dans la membrane cellulaire
N C9 entrer
former des pores transmembranaires
L'eau externe peut pénétrer dans les cellules
provoquant la lyse cellulaire
Le complément est clivé en plusieurs fragments lors de l'activation
fragments plus petits
un
fragments plus gros
b
Exception C2
fragment plus gros
C2a
fragment plus petit
C2b
Le seul petit fragment du chemin classique
effet
Les anticorps auxiliaires exercent un effet cytolytique
Participer à l’effet de défense et à l’auto-stabilité de l’organisme
Provoquer des réactions immunopathologiques
C3a et C5a
Agit sur la membrane cellulaire des noyaux des mastocytes et des basophiles
Dénuclée les cellules pour libérer de l'histamine et des leucotriènes
Modifications du dossier médical pour les réactions anaphylactoïdes
anaphylatoxines
Cellules Raji
Il existe un grand nombre de récepteurs C3b, C1q et C3d à la surface
pas de sourire
Utilise ces récepteurs pour se lier aux complexes immuns circulants qui se lient au complément
Ajoutez ensuite des IgG anti-humaines marquées par un radionucléide
Complexes immuns circulants détectables
Dosage de l'activité du complément total
Complément test d'hémolyse 50% (détermination du CH50)
principe
Les anticorps SRBC (globules rouges de mouton) se lient aux antigènes de surface SRBC
Activer le complément (voie classique)
Volume sérique minimum pour une hémolyse à 50 %
Reflète l’activité totale du complément
Que 100% d'hémolyse
Plus sensible et plus facile à observer
Dépendance de la réaction hémolytique sur la posologie du complément
Courbe spéciale en forme de S
L'hémolysine est principalement utilisée
2 unités (2U)
unité
U/ml
Influence
Diminution de l'activité hémolytique
PH
Tampons et force ionique
augmenter la hauteur
ion
Tampon calcium, ions magnésium
excès
Inhiber l'activité hémolytique
signification clinique
augmenter la hauteur
tumeur maligne
C3 et C4 ont également augmenté
test de fixation du complément
principe
Les complexes antigène-anticorps se lient au complément
L'antigène ou l'anticorps libre ne peut pas se lier au complément
tampon de dilution
Une quantité appropriée de chlorure de sodium
De petites quantités d'ions calcium et magnésium
Avoir une certaine valeur de pH
Détection
Antigène ou anticorps
système d'indication
Hémolysine
Anticorps qui lysent les globules rouges
Globules rouges de mouton
Système antigène-anticorps
effet
Indique si le complément est lié
Détecter la présence de l’antigène ou de l’anticorps à tester
Classification
système de réaction
système complémentaire
est un réactif
Usage général
Sérum frais de cobaye
Ne pas être testé
système d'indication
Hémolysine
globules rouges de mouton
processus
Ajouter le réactif 1
Antigène connu/Anticorps connu
Ajouter du sérum (regarder les anticorps/regarder les antigènes)
Ajouter le réactif 2
ajouter un complément
Ajouter le réactif 3
Rejoignez le système d'instruction
S'il y a des anticorps dans le sérum, alors le complément s'est déjà combiné avec la première étape et le réactif 3 ne peut plus se combiner.
Non hémolytique
Non hémolytique
Positif
Présence de l'antigène/anticorps à tester
Unité de dosage
Unité utilitaire
hémolyse complète minime
Dosage
Antigène, anticorps, hémolysine, globules rouges de mouton
0,1 ml chacun
complément
0,2 ml
Total 0,6 ml
Dosage formel du complément d’essai
formule
quantité minimale d'hémolyse complète
Dilution 1:60
Oui
Y*2：60=0,2：X
X : facteur de dilution
2 : 2 unités complémentaires
0.2 : Dosage du complément
signification clinique
réduire
Consommation accrue
PR (rhumatoïde), LED (lupus érythémateux disséminé), hémolyse auto-immune active (hypersensibilité de type II), rejet de greffe
Infections bactériennes
Surtout les infections à cellules Gram-négatives
micro-organismes les plus sensibles
Une diminution des taux sériques de complément résulte souvent de l’activation de la voie alternative du complément.
Stimulation des lipopolysaccharides (LPS)
Synthèse insuffisante
maladie hépatique grave
Malnutrition
perte massive
Brûlures étendues
Saignement abondant
le syndrome néphrotique
signification clinique
Maladies génétiques du déficit en complément
Défaut de la molécule inhibitrice C1
Ce n'est pas un manque de C1
angio-œdème héréditaire
Défaut C3
infection grave
Cytokines
Cellules immunitaires activées et certaines cellules stromales
substances actives sécrétées
nature chimique
Protéine ou peptide à petite molécule
Principalement des glycoprotéines
Principalement des protéines de faible poids moléculaire
Existent principalement sous une forme unique
Non limité par le MHC
fonctions biologiques
Méditer et réguler les réponses immunitaires et les réponses inflammatoires
Régule une variété de fonctions physiologiques cellulaires
Les cellules B seules ne peuvent pas être stimulées pour produire des anticorps
Activation et prolifération des cellules B
Nécessite des signaux doubles, une double reconnaissance et des cytokines
Détection
méthode la plus couramment utilisée
Test immunologique
ELISA
Méthode préférée
Mesure de l'immunoréactivité uniquement
Non testé pour l'activité immunitaire
cytométrie en flux
Test immunospot lié à une enzyme (ELISAPOT)
Méthodes qui ne peuvent pas mesurer les molécules précurseurs des cytokines
Test d'activité biologique
inclure
Interleukine (IL)
IL-2
Production de lymphocytes T
Promouvoir et maintenir la culture de cellules T à long terme
Facteur de croissance des lymphocytes T
rejet de greffe
Après activation, l’IL-2 est sécrétée pour favoriser l’entrée des lymphocytes T effecteurs (CTL) dans le greffon et favoriser la production d’anticorps par les lymphocytes B.
En hypersensibilité retardée (DTH)
provoque non seulement la prolifération des lymphocytes T activés par l'antigène
Cela peut également provoquer la prolifération de lymphocytes T « spectateurs »
Peut activer les cellules NK
Détection
Test de prolifération cellulaire favorisée
réduire
hépatite B chronique
hépatite B chronique
Cellules mononucléées stimulées par le LPS
La capacité à sécréter l’IL-1 et l’IL-2 est nettement inférieure à celle des personnes normales.
IL-4
Production de cellules Th2
Favoriser le changement de classe d’immunoglobulines
Cellules mononucléées du sang périphérique de patients tuberculeux stimulées par des antigènes mycobactériens
évidemment augmenter
Démarrez les cellules B au repos pour entrer dans la phase de synthèse de l’ADN
Réaction d'hypersensibilité de type I
Stimule la prolifération et la différenciation de cellules B spécifiques en plasmocytes
Produire des IgE caractéristiques
Augmenter
tuberculose pulmonaire active
IL-3, IL-5
Réaction d'hypersensibilité de type I
Après liaison aux récepteurs de surface des éosinophiles
stimuler son activation
Libère des granules éosinophiles et des substances bioactives
IL-5
Favoriser la prolifération, la différenciation et la chimiotaxie des éosinophiles
IL-6
Myélome multiple, patients atteints de myélome
Facteurs importants qui augmentent le nombre d'ostéoclastes
Facteurs clés qui favorisent la prolifération et la différenciation des plasmocytes
Le plus couramment utilisé pour stimuler la prolifération des hybridomes des cellules B
Le rejet chronique survient après une transplantation d'organe
Niveaux de cytokines chez les patients
augmenté de façon significative
IL-6
IL-6, IL-1
Stimule les hépatocytes pour sécréter des protéines de phase aiguë
IL-8
Effet chimiotactique sur les neutrophiles
IL-10
régulateur immunitaire négatif
Peut inhiber la synthèse d'IL-2 et d'IL-1
IL-18
A une activité chimiotactique
méthode
Test d'activité chimiotactique
Interféron (IFN)
interféron de type I
interféron alpha
production de leucocytes humains
interféron bêta
Produit par des fibroblastes humains
Fort effet antiviral
interféron de type II
rinterféron
Production de lymphocytes T
Production de cellules Th1
effet
Effet immunomodulateur
le plus fort
effet antiviral
Inhiber la transformation des cellules Th0 en cellules Th2
Parce que ceci est produit par Th1, bien sûr c'est dirigé vers ma mère
C'est-à-dire inhiber l'activation et la prolifération des cellules Th2
Peut activer les cellules NK
L'IFN-α et l'IFN-r agissent sur des récepteurs différents
Produit après stimulation par un antigène
Méthode de détection
Test d'activité antivirale
facteurs de croissance
Facteur de croissance transformateur (TGF)
TCF-β
Régulation négative de l'immunité cellulaire
famille des chimiokines
facteur de nécrose tumorale (TNF)
TNF-α
cachexie
Cytokines majeures provoquant la cachexie
stimuler les cellules cibles à produire
IL-1, IL-6
Peut activer les cellules NK
Détection
A une activité cytotoxique
Tests d'activité cytotoxique disponibles
TNF-β
par les lymphocytes T
Production de cellules Th1
Facteur de stimulation des colonies (CSF)
Facteurs qui activent la fonction des cellules NK
IL-2, IFN-r, TNF-α
Facteur d'adhésion cellulaire (CAM)
Reçu par la liaison mutuelle et l'adhésion entre cellules ou entre cellules et matrice extracellulaire
Peptides à petites molécules ou glycoprotéines
forme de fonctionnement
Liaison des ligands du récepteur
effet
Participer à la réponse immunitaire, à l’inflammation, à la coagulation, à la cicatrisation des plaies et aux métastases tumorales, etc.
Base moléculaire
Classification
Famille dépendante des ions calcium/famille des mucocadines
famille d'intégrines
Superfamille des immunoglobulines
famille de type mucine
famille de sélection
N'inclut pas la famille des facteurs inflammatoires
Principales méthodes de mesure
Méthode ELISA
Caractéristiques
Performance
Pléiotropie
chevaucher
Effet de résistance
synergie
Nécessité de se lier spécifiquement aux récepteurs de haute affinité des cellules cibles
exercer des effets biologiques
pareil que l'insuline
A des effets biologiques extrêmement forts
Seules des traces de cytokines sont nécessaires
Peut agir de manière paracrine, autocrine ou endocrinienne
pareil que les hormones
effets cliniques
Évaluation de l’état immunitaire de l’organisme et de la fonction immunitaire cellulaire
Plus utilisé
Diagnostic assisté de maladies spécifiques
spécifique
Juste un auxiliaire
Détection des effets du traitement de la maladie et conseils sur l’utilisation des médicaments
la prévention des maladies
traitement de la maladie
Aujourd’hui, de nombreuses cytokines sont transformées en médicaments
autre
À propos des cytokines produites par les cellules T
Types d'anticorps pouvant affecter les cellules B
Réaction antigène-anticorps
principe
Complémentarité structurale et affinité des déterminants antigéniques (épitope) et des régions hypervariables des anticorps
Capacité de liaison à l'antigène
liaison non covalente
Ne forme pas de liaisons covalentes
attraction électrostatique
Forces de Van der Waals
le plus faible
force de liaison hydrogène
force hydrophobe
le plus fort
En effet, la membrane d’hydratation de l’antigène et de l’anticorps doit être écartée pour exposer le site de liaison.
C'est donc le plus fort
Affinité
La force de liaison entre un site de liaison à l'antigène sur une molécule d'anticorps et un épitope d'antigène répondant
selon
degré de complémentarité de la configuration spatiale
reflète
Relation complémentaire antigène-anticorps
exprimer
Constante d'équilibre K
Plus la valeur K est élevée, plus l’affinité est forte.
Plus la liaison à l’antigène est forte
Affinité
La force de liaison adaptative entre un site de liaison à l'antigène sur une molécule d'anticorps et le déterminant antigénique correspondant
La force de liaison inhérente entre l’antigène et l’anticorps
reflète
La force de liaison entre l'antigène et l'anticorps
Caractéristiques
spécificité
Réversibilité
Proportionnalité
scène
spécificité
Complémentarité entre déterminants antigéniques et régions hypervariables d'anticorps
réactivité croisée
deux molécules d'antigène différentes
Epitopes antigéniques avec des structures partiellement identiques ou similaires
Peut réagir de manière croisée avec les antisérums correspondants
Réaction de Waifei
Les bactéries Mutans et Klebsiella ont le même épitope antigénique
Remplacement de Chrysotitis sp. par mutans
Diagnostiquer le typhus (crittsiose)
Je sors du travail dehors, reviens immédiatement
Extérieur : Épiphyse Côté : Métamorphose Classe : Macula Immédiatement : Rickettsie
Réversibilité
La dissociation peut se produire sous certaines conditions
Chromatographie d'affinité
La modification du pH et de la force ionique de la solution favorise la dissociation du complexe antigène-anticorps
purifiant ainsi l'antigène ou l'anticorps
Reste biologiquement actif après dissociation
Proportionnalité
La quantité de conjugués formés est liée à la concentration des réactifs
Rapport optimal (point d'équivalence)
Le rapport de concentration de l'antigène à l'anticorps qui produit la réaction visible la plus rapide
Zone d'équivalence
La plage appropriée pour le rapport molécules antigène-anticorps
La réaction de précipitation maximale se produit également à
phénomène de bande
Excès d'antigène et d'anticorps sans précipitation
sangle avant
Surdose d'anticorps
sangle arrière
Excès d’antigène
Simple avant et simple derrière
Les anticorps sont relativement plats
scène
La première phase
Liaison spécifique à l'antigène et à l'anticorps
Rapide, invisible
secondes en minutes
Deuxième étape
Agglutination, précipitation, lyse cellulaire
Réponse lente, visible
minutes en heures
Facteurs qui influencent
électrolyte
Faire perdre une partie de leur charge à l'antigène et à l'anticorps
sujet à l’agglutination ou à la précipitation
0,85% de chlorure de sodium
accélérer la formation de complexes immuns
de lent à rapide
SCN-, CLO4-, NO3-, SO4-, H2PO4-
Le plus rapide est
CL-
pH
Les réactions antigène-anticorps doivent être effectuées dans un environnement au pH approprié
pH optimal6-9
Parce que le pH humain est de 7,35 à 7,45
température
hausse de température
Peut accélérer le mouvement moléculaire
Risques accrus de collision antigène-anticorps
Accélération de la réaction
Température : 37 ℃
Préparation d'immunogènes et d'antisérums
Préparation d'immunogène
Immunogène
Peut inciter le corps à produire des anticorps ou des lymphocytes sensibilisés
Substances provoquant des réactions spécifiques
caractéristique
Immunogénicité
une réponse immunitaire se produit
La capacité d'induire le développement d'anticorps ou de lymphocytes sensibilisés
Immunoréactivité (antigénicité)
Caractéristiques de la capacité de liaison spécifique
Classification
antigène complet
immunoréactif
immunogène
haptène
immunoréactif
Non immunogène
Aucune réponse immunitaire
Ne produit pas d'anticorps et ne sensibilise pas les lymphocytes
Peptides, hormones stéroïdes, nucléosides, certains médicaments (pénicilline)
Non immunogène
Uniquement combiné avec un support (l'albumine sérique bovine est le plus couramment utilisée)
être immunogène
antigène thymus-dépendant
On ne peut pas compter sur moi-travailleur
préparation
Frais ou conservé à -40℃
antigène particulaire
grand
Antigènes cellulaires, antigènes bactériens, antigènes parasitaires
vaccination intraveineuse
antigène soluble
Petite molécule
Protéines, glycoprotéines, lipoprotéines, enzymes, complément, toxines bactériennes, fragments d'immunoglobulines, acides nucléiques
extraction grossière
Acquisition de cellules uniques
Ecrasage mécanique
Traitement enzymatique
Méthode de rupture cellulaire
méthode de gel-dégel répétée
Perturbation ultrasonique
Méthode d'autolyse
Traitement enzymatique
Méthode de traitement des tensioactifs
Extraction et épuration
Méthode de relargage
Méthode de relargage au sulfate d'ammonium
Méthode d'extraction du sulfate d'acide octanoïque d'ammonium
Méthode de relargage au sulfate de sodium
Sel neutre (33-50 % de sulfate d'ammonium saturé)
Peut détruire la membrane d'hydratation
neutraliser la charge
agréger et précipiter les protéines
Le plus classique
le plus dur
Technologie de séparation et de purification des protéines
N'affecte pas l'activité
Méthode de précipitation des polymères (CIC)
Détection des complexes immuns circulants
Méthode de précipitation PEG
Ne peut pas refléter la situation des complexes immuns circulants à petites molécules
Détermination des complexes immuns non spécifiques à l'antigène
Caractéristiques
Simple
Mauvaise spécificité
sensible aux effets de la température
Polyéthylèneglycol (PEG)
masse moléculaire
6000
Plus le poids moléculaire des protéines est élevé
Plus la concentration de PEG requise pour être précipité est faible
3%-4%PEG
Complexes immuns précipitables
>5%
La fonctionnalité de sélection du CIC précipité disparaît
8%-12%
Précipite les IgG
La technologie de participation complémentaire détecte le CIC
méthode
Méthode en phase solide C1q
Méthode anticorps C3-CIC-ELISA
Incapable de détecter les complexes immuns circulants formés par les anticorps de classe IgA
Parce que les IgA ne peuvent pas lier le complément
globules rouges aldéhydés
Caractéristiques
Capacité à résister à une chaleur à 60°C
Peut être congelé et décongelé à plusieurs reprises et ne se casse pas facilement
La réaction de coagulation sanguine est plus forte que celle des globules rouges frais
Longue durée de stockage
Plusieurs virus peuvent être purifiés simultanément
Forte applicabilité aux virus
adjuvant immunitaire
Aide à générer une réponse immunitaire
Injecté dans l'organisme avant ou en même temps que l'antigène
Peut être non spécifique
Améliorer la réponse immunitaire
Changer le type de réponse immunitaire
taper
immunogène
Cytokines, lipopolysaccharide, Bacillus pertussis, vaccin BCG
cellules et bactéries
Non immunogène
Hydroxyde d'aluminium, paraffine liquide, lanoline, alun
Adjuvants pour immuniser les animaux
Adjuvant de Freund
L'adjuvant complet de Freund
Paraffine liquide, lanoline, vaccin BCG
Un vaccin BCG de plus
Adjuvant incomplet de Freund
Paraffine liquide, lanoline
Mécanisme
Modifier les propriétés physiques de l'antigène
Améliorer l'immunogénicité
Retarder la dégradation et l’élimination des antigènes
Stimule efficacement le système immunitaire
Stimule le système cellulaire monocytes-phagocytaires
Améliorer sa capacité à traiter et à présenter les antigènes
Stimuler la prolifération et la différenciation des lymphocytes
Augmenter le titre d'anticorps de la réponse immunitaire du corps
Changer le type d'anticorps
Produire plus d'IgG
Induction de réactions d'hypersensibilité de type retardé
Type IV
Impossible de modifier la spécificité de l'antigène
Si la spécificité est modifiée, ce vaccin ne sera plus le même.
Préparation d'antisérum (préparation d'anticorps)
antisérum : sérum contenant des anticorps
Plusieurs cellules B dans le corps s’activent et produisent des anticorps contre un certain antigène
anticorps polyclonal
Chaque cellule B produit un anticorps
Plusieurs lymphocytes B sont des anticorps polyclonaux
taper
Tapez R
Lapins et autres petits animaux
Forte affinité et difficile à dissocier
Convient à une large gamme
pour réactifs de diagnostic
Type H
Chevaux et autres grands animaux
Faible affinité, facile à dissocier
Convient pour une plage étroite
pour immunothérapie
Vaccin contre le tétanos
choisir
programme
temps
1ère et 2ème fois
10-20 jours
3ème fois et plus tard
7-10 jours
Collecte de sang après vaccination
5-7 jours
5.7.10.20
Site de collecte de sang
Collecte de sang de l'artère carotide
Animaux grands et moyens
Ablation des yeux ou coupe de la queue
souris
Purification de l'antisérum
Élimination des adsorbats d’hétéroanticorps
Solution antigénique sans antigène spécifique
Chromatographie d'affinité
Affinité spécifique (spécificité)
Purifier les anticorps, les enzymes et les protéines réceptrices
le meilleur, le plus efficace
Comme l'extraction d'IgG spécifiques de haute pureté
liaison par affinité Assez dévoué
filtration sur gel
Séparer les protéines selon leur poids moléculaire
Les grosses molécules passent en premier
gel via trou Regardez la taille
Méthode de relargage
Le plus classique et le plus brut
N'affecte pas l'activité des protéines
Méthode d'extraction de l'acide caprylique
Extraction du brut par relargage très classique
Chromatographie d'échange d'ions
Selon la charge portée par la protéine
Les ions sont chargés différemment
Chromatographie d'affinité
processus
Lorsque l'antisérum traverse la colonne
L'affinité spécifique du support en phase solide pour la substance séparée
Les IgG sont adsorbées par la colonne de chromatographie
Changez ensuite la phase mobile pour faire disparaître l’adsorption spécifique de la substance cible.
Les IgG se dissocient de la colonne
pour atteindre le but de purification
filtration sur gel
Chromatographie sur gel/filtration sur tamis moléculaire
Selon le poids moléculaire des protéines
grosse protéine
Directement à travers les espaces entre les gels
lavé en premier
petite protéine
entrera dans le gel
a été élué plus tard
Méthode de relargage
Méthode de relargage au sulfate d'ammonium
Méthode d'extraction du sulfate d'acide octanoïque d'ammonium
Méthode de relargage au sulfate de sodium
Sel neutre (33-50 % de sulfate d'ammonium saturé)
Peut détruire la membrane d'hydratation
neutraliser la charge
agréger et précipiter les protéines
Le plus classique
le plus dur
Technologie de séparation et de purification des protéines
N'affecte pas l'activité
Chromatographie d'échange d'ions
Différents frais
chargé positivement
résine échangeuse d'anions
Parce que ce que je veux échanger c'est de l'anion
chargé négativement
Résine échangeuse de cations
Parce que ce que je veux échanger, ce sont des cations
Identification et conservation des antisérums
identification
Spécificité des anticorps
immunodiffusion bidirectionnelle
Détermination du titre d'anticorps
Titrage en damier (méthode de titrage carré)
immunodiffusion bidirectionnelle
Concentration de travail optimale
Critères de jugement
Antigène et anticorps
Fort positif
dilution la plus élevée
concentration la plus faible
sauvegarder
stockage à court terme
2-8 ℃
Se conserve 5 ans
Méthodes courantes
Évitez les congélations et décongélations répétées
Cryoconservation
Se conserve 5 à 10 ans
séchage sous vide
Des anticorps monoclonaux
Principes de base de la technologie des hybridomes
Fabriquer des anticorps monoclonaux
Agent protecteur
diméthylsulfoxyde
Des anticorps monoclonaux
Cellules B simples isolées
Une colonie de clones formée après prolifération
épitope unique
Même structure
Anticorps fonctionnellement homogènes
Diluer les cellules fusionnées
Chaque culture bien
En fait
0-nombre de cellules
La théorie est
1 cellule
Molécules d'antigène produites par les cellules d'hybridome
un seul déterminant antigénique
d'anticorps
spécificité
selon
Criblage de cellules clonales
Culture clonale de cellules d'hybridomes positives
méthode de dilution limite
Plus utilisé
microscopie
Intuitif et fiable
Longue durée de fonctionnement et facile à contaminer
trieur de cellules activé par fluorescence
Haute efficacité et cher
méthode sur plaque de gélose molle
Difficile à maîtriser
Fondamental
Splénocytes
Cellules B sensibilisées
Fonction de sécrétion d'anticorps
cellules de myélome
non-sécrétaire
Ne produit pas d'immunoglobulines
Peut être divisé à l'infini et possède l'immortalité
Empêcher les rétrocessions
8-azaguanine
Médicament capable de reproduire des lignées cellulaires de myélome dépourvues d'hypoxanthine-guanine phosphoribose convertase (HGPRT)
sauvegarder
-196 ℃ azote liquide
agent de fusion cellulaire
Polyéthylèneglycol (PEG)
CHAPEAU moyen
Hypoxanthine (H), aminoptérine (A), thymidine (T)
Aminoptérine (A)
Antagoniste de l'acide folique qui bloque la principale voie de synthèse de l'ADN dans les cellules
Mort cellulaire non fusionnée
Survie des cellules d'hybridome
taper
Technologie des hybridomes des lymphocytes B
Préparer des anticorps monoclonaux
Technologie des hybridomes des lymphocytes T
Préparation de diverses lymphokines
préparation
Méthode d'induction in vivo
Prenez des souris BALB/c
Injection intrapéritonéale de 0,5 ml de paraffine liquide suivie de phytane
inducteur
provoquer une ascite
1 semaine plus tard
Inoculation intrapéritonéale de cellules d'hybridome
Prolifèrent dans la cavité abdominale des souris
Production et sécrétion d'anticorps monoclonaux
10 à 14 jours après la vaccination
Aspirer l'ascite
cellules péritonéales
cellules nourricières
Obtenir de grandes quantités d’anticorps monoclonaux
caractéristique
Très spécifique
Se lie uniquement à l'épitope correspondant
Cibler un seul épitope
haut degré d'uniformité
Répétabilité
faible réaction d'agglutination
Ne précipite pas
Après précipitation, il n’existe aucun moyen de réaliser une immunoturbidimétrie.
Très sensible à l'environnement
Méthode de purification
Méthode de relargage
Méthode d'extraction de l'acide caprylique
filtration sur gel
Chromatographie d'échange d'ions
Chromatographie d'affinité
Le plus efficace
Identique à la purification de l'antisérum
sauvegarder
séchage sous vide
Ingénierie génétique
principe
Technologie d'ingénierie de l'ADN recombinant et des protéines
Modifier et assembler des gènes codant pour des anticorps en fonction de différents besoins
Importer les cellules destinataires appropriées
anticorps réexprimés
avantage
Réduire, voire éliminer, le rejet des anticorps par l’organisme
anticorps humanisés
Conserve l'affinité et la spécificité de l'anticorps parent
Réduire l’hétérogénéité des anticorps
Propice à l’application dans le corps humain
taper
anticorps chimériques
Gène fonctionnel à région variable Ig humaine approuvé dégène
Anticorps chimériques souris-humain
Caractéristiques
Réduire l’hétérogénéité
Conserve la spécificité et l’affinité de l’anticorps parent
Réduire le rejet
anticorps modifié
Déterminants de complémentarité (CDR) dans les régions variables des anticorps humains (régions hypervariables)
Passer à la séquence source de la souris
Caractéristiques
Possède la spécificité des anticorps monoclonaux dérivés de souris
Maintenir l’avidité des anticorps
anticorps humains
Des anticorps entièrement humains
La forme la plus idéale d’anticorps thérapeutiques
Anticorps bispécifiques/anticorps bifonctionnels
Deux sites de liaison à l'antigène ont des spécificités différentes
combine deux molécules d'antigène différentes
Technologie de bibliothèque combinatoire d’anticorps
Régions variables des chaînes légères et lourdes
combinaison aléatoire
Produire une nouvelle technologie de méthode d'appariement de chaînes légères et lourdes
réaction d'agglutination
Aperçu
antigène particulaire
Bactéries, globules rouges
ou surface recouverte d'un antigène ou d'un anticorps soluble
affaire particulière
L'antigène soluble doit recouvrir les particules
Autrement invisible
Se lie à l'anticorps ou à l'antigène correspondant
Caillots visibles
Classification
réaction d'agglutination directe
antigène particulaire
réaction d'agglutination indirecte
antigène soluble
Besoin d'aide du transporteur
Caractéristiques
Qualitatif
Semi-quantitatif
Après dilution
Utilisez le facteur de dilution le plus élevé comme puissance ou titre
Pratique et simple
Aucun équipement spécial requis
deux étapes
liaison spécifique de l'antigène et de l'anticorps
Une agglomération visible de particules se produit
Influence
Favoriser l'agglutination
Augmenter les électrolytes ou les protéines
Augmenter la viscosité de la solution de test
traitement à la cystinase
Traitement à la neuraminidase
réaction d'agglutination directe
antigène particulaire
agglutinogène
Antigène (particulaire)
Lectine
Anticorps
méthode
méthode de diapositive
Anticorps connus
tester l'antigène
Dans l'identification du groupe sanguin, le sang est l'antigène, c'est pourquoi des anticorps connus sont utilisés
Peut détecter à la fois les antigènes et les anticorps
application
Identification de la souche
Peut détecter les deux antigènes
Les anticorps peuvent également être testés
Typage sérologique
Identification du groupe sanguin ABO
méthode du tube à essai
Semi-quantitatif
antigène connu
Test d'anticorps
Test Waifei, correspondance croisée, test Feida
Astuce : les diplomates sont si gros qu’ils saignent.
Test de Waifei
Utilisant le même épitope de Proteobacteria et Klebsiella
test pour le typhus
Test de Feida
Test d'agglutination typhoïde
Si gros, si triste
Déterminer les anticorps
test d'agglutination hétérophile
Virus d'Epstein-Barr
Des anticorps IgM apparaissent
Peut agglutiner de manière non spécifique les globules rouges de mouton et les globules rouges de cheval
anticorps hétérophile
récepteurs de surface
Récepteur C3d
Diagnostiquer la mononucléose infectieuse
test d'agglutination indirecte
Antigène ou anticorps soluble
Impossible de détecter
Antigène AFP
test d'agglutination indirecte directe
antigène connu
Test d'anticorps
L'agglutination est positive
En avant, il y a d'abord un antigène, donc c'est un antigène connu
Support sensibilisant aux antigènes
test d'agglutination indirecte inverse
Anticorps connus
tester l'antigène
L'agglutination est positive
Support sensibilisant aux anticorps
application
diagnostic de grossesse au latex
Devise : Faire les choses correctement et arranger les choses
Les anticorps sont relativement plats
Différence : Support sensibilisant à l'antigène ou à l'anticorps
test d'agglutination par inhibition indirecte directe
à son tour
Anticorps connus
tester l'antigène
L'agglutination est négative
L’interprétation des résultats est également inverse.
Cependant, on sait que l'anticorps ne sensibilise pas le porteur
Un agent allergène de plus 2
processus
application
Test d'Ascoli pour le charbon
test d'agglutination par inhibition indirecte inverse
à son tour
antigène connu
Test d'anticorps
L'agglutination est négative
L’interprétation des résultats est également inverse.
Mais l'antigène connu n'est pas un support sensibilisant
Un agent allergène de plus 2
test d'agglutination synergique
Protéine A de Staphylococcus aureus (SPA) comme support
Liaison non spécifique au segment Fc des IgG (support de particules sensibilisé)
Antigène de test (inconnu)
pour antigènes solubles
Détection directe des virus bactériens
test d'hémagglutination indirecte
transporteur
des globules rouges
Couramment utilisé
Moutons, lapins, poules
Globules rouges humains de type O
Parce qu'il n'y a pas d'antigène sur la surface de type O
Antigène ou anticorps de revêtement sur les globules rouges
forme de vecteur de sensibilisation
Les globules rouges simples ne sont pas des porteurs sensibilisants
Vérifiez si les globules rouges sont agglutinés passivement ensemble
résultat
Positif
agglutination
au fond du trou
Négatif
Fond du trou de sédimentation
un petit point
Comme le test TPPA pour la syphilis
test d'agglutination au latex
test d'agglutination indirecte
particules de latex
protéine adsorbable
principe
antigène adsorbé
Détecter les anticorps
antigène
IgG dénaturées
Facteur rhumatoïde (RF)
Également connu sous le nom de facteur rhumatoïde
Hémolysine "O"
Antihémolysine "O" (ASO)
vecteur utilisé
latex de polystyrène
diamètre
0,8 um
Caractéristiques
méthode du tube à essai
méthode de diapositive
Fermeté de liaison
Différence
Moins sensible que les tests de coagulation
Test d'agglutination à la gélatine
test d'agglutination indirecte
Antigène adsorbé sur gélatine rose
Détecter les anticorps
Virus testables
Test à l'antiglobuline (test de Coombs)
Test de Coombs
Détection de l'hémolyse auto-immune
Méthodes pour détecter les anticorps incomplets dirigés contre les globules rouges
Classification des anticorps
anticorps complet
IgM
Parce que c'est un pentamère
Peut amener les globules rouges à se coller les uns aux autres, puis à se réticuler
visible à l'œil nu
anticorps incomplets
Caractéristiques
Peut se lier aux antigènes (sensibiliser)
Aucune réaction d'agglutination visible ne devrait se produire
un fragment d'un anticorps IgG
Les anticorps immunitaires sont pour la plupart des anticorps incomplets
taper
test direct à l'antiglobuline
Détermination de la surface liée
Il a une valeur diagnostique pour la maladie hémolytique Rh néonatale
Parce qu'il s'agit de détecter si les cellules sont sensibilisées
test indirect à l'antiglobuline
Déterminer gratuitement
Détection des anticorps maternels Rh(D) (anticorps anti-D)
application
test de correspondance sanguine
anticorps anti-D
Diagnostic de la maladie anémique hémolytique néonatale
Détection d'anticorps incomplets contre les bactéries
Test de condensation à froid
syndrome des agglutinines froides
Détection de l'hémolyse auto-immune
Causée par IgM/macroglobuline/agglutinine froide
divisée en
Type de plante unique
Hybride
processus
à des températures plus basses
Anticorps et agglutination autologue des globules rouges
Symptômes de cyanose des mains et des pieds
La température monte à 20-25℃
Le complément est activé et une hémolyse se produit
La température augmente de 37℃
Séparation totalement réversible
Les symptômes disparaissent
Test de condensation à froid
in vitro
Température optimale 0-4℃
Dissocier à 37°C
Jugement des résultats
Négatif
Titre d'agglutinine froide <1:32
Positif
Titre d'agglutinine froide > 1:64
diagnostic
pneumonie atypique primaire
réaction de précipitation
complexes immuns circulants
température optimale des précipitations
4℃
réaction de précipitation dans un liquide
immunoturbidimétrie
définition
Tampon
Solution de phosphate
Agent augmentant la turbidité
Polyéthylèneglycol (PEG)
Peut former rapidement des particules de complexe immun (IC)
En cas de léger excès d'anticorps et d'immobilisation
La CI est proportionnelle à la quantité d’antigène à mesurer
principe
Instruments de mesure optique combinés à des systèmes d'analyse automatisés
Classification d'immunoturbidité
immunoturbidimétrie
Lumière transmise
Aucune lumière n'atteint le complexe (IC)
La lumière frappant le complexe (IC) est absorbée
Valeur d'absorbance (quantité de lumière absorbée) et quantité IC
Correlation positive
Plus il y a d'IC, plus l'absorbance est élevée
immunoturbidimétrie
Lumière dispersée
Lumière réfractée après avoir atteint le complexe (IC)
Lorsque le diamètre des particules est bien inférieur à la longueur d'onde de la lumière incidente
La répartition de la lumière diffusée est relativement uniforme
Devenez un Rayleigh Scatter
Détecter l'intensité de la lumière diffusée
Correlation positive
Plus il y a de circuits intégrés, plus la lumière diffusée est forte
Classification
turbidimétrie par diffusion en point final
Une fois que l’antigène-anticorps atteint l’équilibre
Déterminer la quantité de complexe
turbidimétrie par diffusion de taux
Dosage d'immunoglobulines
le plus sensible
L'approche la plus appropriée
Pour la détermination de l'activité enzymatique
Plus précise
Méthode de détermination cinétique
application
Le deuxième signal de crête apparaît
Le premier signal pic est généré par tous les antigènes à tester
Aucun deuxième signal de crête n'apparaît
La quantité d'antigène testée est trop élevée
prémisse
Surdose d'anticorps
Système de détection de surdosage d’anticorps
Système de détection développé pour garantir un excès d’anticorps
Prévenir l'effet crochet
Prévenir le surdosage d’antigènes (phénomène afterzone)
Limites de seuil pour l’excès d’antigène
Facteurs qui influencent
Qualité des anticorps
Forte spécificité, haute puissance et forte affinité
Utiliser des anticorps de type R
réactif de détection
Une application clinique
Tester le contenu en Ig
méthode la plus couramment utilisée
Tester l'apolipoprotéine sérique
méthode la plus couramment utilisée
Détecter les immunoglobulines
IgG, IgA, IgM
Contenu élevé
Détection des sous-classes d'immunoglobulines
Complément C3, C4
Protéine trace urinaire
concentration thérapeutique du médicament
Test de sédimentation en gel
Test de diffusion sur gélose unidirectionnelle
Peut être fait manuellement
Ne peut tester que l'antigène
principe
Mélanger une quantité quantitative d'anticorps dans le gel d'agar
plaque de gélose
Percez des trous dans la planche en plastique
Injecter du sérum (antigène) dans le puits
méthode de la plaque
Dans un gel d'agar à 0,9%
37 ℃, expansion libre
diffusion en anneau
méthode du tube à essai
Solution d'agarose à 0,7%
Diffusion à 50℃
Formation d'anneaux de précipitations visibles
Correlation positive
Plus la teneur en antigène est élevée
Plus l'anneau de précipitation est grand
Une courbe étalon doit être réalisée
Ajoutez 5 à 7 étalons d'antigènes de différentes concentrations en même temps
Déterminer le diamètre de l'anneau de sédimentation
abscisse
Concentration standard d'antigène
Axe Y
Diamètre de l'anneau de sédimentation
Application d'anticorps monoclonaux pour mesurer les antigènes polymorphes
la valeur de mesure
Du côté bas
Simple et plus bas
Mesure de la protéine M à l'aide d'anticorps polyclonaux
la valeur de mesure
Du côté haut
À quelle hauteur
méthode
méthode du tube à essai
méthode de la plaque
Méthode de calcul
Courbe de Mancini
Convient aux antigènes de grande taille moléculaire et à la diffusion à long terme (>48 heures)
Le carré du diamètre de l’anneau de précipitation d2 a une relation linéaire avec la concentration en antigène c
c/d2=k
k : constante
Courbe de Fahey
Convient aux antigènes à petites molécules et aux temps de diffusion plus courts
logc/d=k
c : concentration en antigène
d : diamètre de l’anneau de sédimentation
k : constante
signification clinique
Utilisé par les hôpitaux primaires
Détermination des teneurs en IgG, IgA, IgM et complément C3 et C4
Lors de la mesure de la protéine M à l’aide d’anticorps polyclonaux
Le cercle de sédimentation s'agrandit
Évaluation méthodologique
Pas très sensible
Temps de détection
48-72 heures
2-3 jours
Une courbe étalon doit être réalisée en même temps
pour la détermination quantitative
Test de diffusion sur gélose bidirectionnelle
formulaire
méthode du tube à essai
Ajoutez d’abord de la gélose contenant des anticorps dans le tube à essai
Après solidification, ajoutez une couche d'agar ordinaire au milieu
Après refroidissement, ajoutez la solution d'antigène à la couche supérieure
Après placement, l’antigène et l’anticorps diffusent librement dans la couche intermédiaire de gélose.
méthode de la plaque
deux trous
un antigène
Ag
un anticorps
Un B
Jugement des résultats
bien proche de l'antigène
Des niveaux élevés d’anticorps
Près du puits d'anticorps
Teneur élevée en antigène
Celui qui reste à l'écart est plus susceptible d'être
L'arc apparaît
Parce que le poids moléculaire est petit
Se propager rapidement
En raison du petit cercle de diffusion lente, la concentration locale est importante
La ligne de précipitation se courbera vers le côté ayant le poids moléculaire le plus élevé.
Qui a la tête la plus petite ?
Détermination du titre d'anticorps
Titrage en damier (Méthode de titrage Fondateur)
Un test d'immunodiffusion biphasique
But
Choisissez la concentration de travail optimale
Dilution la plus élevée fortement positive
La concentration la plus faible qui est fortement positive
immunoélectrophorèse
principe
Champ électrique CC
Produit combiné d'analyse électrophorétique et de diffusion sur gel (réaction de précipitation)
Gels les plus couramment utilisés
agarose
concentration
0,8%-1,0%
Généralement, l'électrophorèse des molécules protéiques en gel est presque la même que celle de l'électrophorèse libre.
Parce que le rapport de tampon dans le gel
99%
principe
Les antigènes et les anticorps sont chargés négativement
Parce que l'antigène est chargé plus négativement
mettre la cathode
nager vers l'anode
Parce que les anticorps sont moins chargés négativement
Mettez l'anode
Sous l'action de la force électroosmotique
Force électroosmotique : l’eau nage de l’anode à la cathode
nager vers la cathode
Immunoélectrophorèse convective
IgG1 et IgG2
grâce à l'électroosmose
Se diriger vers la cathode
IgG3 et IgG4
À cause de la charge négative
avancer vers la positivité
Classification
Immunoélectrophorèse par convection (CIEP)
Immunodiffusion biphasée associée à l'électrophorèse
cathode d'antigène
Anode d'anticorps
Anticorps IgG
grâce à l'électroosmose
Une ligne de précipitation blanc laiteux se forme au rapport optimal antigène/anticorps.
phénomène appelé régression inverse des pôles négatifs
Influence
électroosmose
Le pouvoir électrophorétique des anticorps est inférieur au pouvoir électroosmotique
Alors nage vers la cathode
pH
Quelle est la charge d’une molécule ?
Dépend du pH du tampon
Plus la valeur du pH du tampon est éloignée du point isoélectrique
Le plus chargé
nager plus vite
Point isoelectrique
La valeur du pH d'une solution lorsque les protéines se dissocient en charges positives et négatives égales
Immunoélectrophorèse de fusée (RIE)
Plage de mesure
ug/ml ou plus
Immunodiffusion monophasée associée à l'électrophorèse
La hauteur du pic est proportionnelle à la quantité d'antigène
Le sommet du pic a la forme de nuages peu clairs
L'électrophorèse n'a pas atteint le point final
comme combiné avec l'autoradiographie
Sensibilité accrue
1000 fois
Immunoélectrophorèse (IEP)
Immunodiffusion biphasée combinée à une électrophorèse de zone
processus
La technologie de zone d'abord
Détecter les zones inutilisées
Après l'arrêt de l'électrophorèse
Mettez ensuite le sérum (anticorps) dans le réservoir d’anticorps parallèle.
Ne faites qu'un seul trou et mettez le sérum dedans
Regardez la ligne de sédimentation en forme d'arc
résultat
mesurable
protéine M
signification clinique
Test qualitatif
Analyse des protéines sériques du myélome multiple et de la macroglobulinémie
protéine M
entre γ et β
Identification des composants antigéniques
Identification des anticorps gamma monoclonaux
Peut refléter approximativement le type d'immunoglobuline
ne peut que refléter grossièrement
Pas précis
IgG
Entre α et γ lent
IgA
β et γ1
IgM
β2 ou γ
IgD
β ou γ
IgE
β pour ralentir γ
Électrophorèse par immunofixation (IFE)
première personne à signaler
Alphonse
Méthodes immunochimiques (réaction de liaison antigène-anticorps) combinées à l'électrophorèse de zone
principe
La technologie de zone d'abord
détecter différentes zones
Recouvrez ensuite les chaînes légères kappa et lambda avec des anticorps (anticorps contre les chaînes légères kappa et lambda) ou un antisérum de chaînes lourdes (anticorps contre les chaînes lourdes).
Formation de précipité complexe
Rincer et teindre
restitue les zones colorées
signification clinique
protéine M
méthode la plus couramment utilisée
Des anticorps monoclonaux
Identification qualitative et typée (type de chaîne légère et lourde)
Méthode préférée
Identification des chaînes légères d'immunoglobulines et détection des protéines hebdomadaires dans les urines et typage κ et λ
Graphique des résultats
Chaînes G, A, M, kappa et lambda
SP signifie protéine sérique totale
Électrophorèse sur gel de polyacrylamide (SDS-PAGE)
principe
électrophorèse de zone
Le gel a une structure en réseau
A un effet de tamis moléculaire
Plus le poids moléculaire est petit
aller plus vite
Plusieurs bandes peuvent être séparées
défaut
Les protéines de poids moléculaire similaire ne peuvent pas être séparées
processus
bandes séparées
L'effet de séparation est invisible à l'œil nu
Les bandes électrophorétiques apparaissent seulement après coloration
Ajoutez du gel d'empilage à la couche supérieure du gel pour améliorer l'effet de séparation
Protéine compacte pour favoriser la natation
La séparation des protéines sériques peut donner
20+ ingrédients
électrophorèse à focalisation isoélectrique
principe
Un tampon spécial crée un gradient de pH dans le gel
Gels couramment utilisés
gel de polyacrylamide
Identique à la FDS
Caractéristiques
Les poids moléculaires isolés sont similaires
Protéines avec différents points isoélectriques
dosage radioimmunologique
dosage radioimmunologique
Radionucléides couramment utilisés
125 I (iode 125)
Méthode de marquage au 125 I (iode 125)
notation directe
Marquage par iodation de peptides, protéines et enzymes
méthode
Méthode à la chloramine T (ch-T)
Méthode de marquage à la lactoperoxydase
étiquetage indirect
Applicable à
Composés à petites molécules dépourvus de groupes de marquage de l'iode
méthode
Méthode de notation de connexion (méthode Bolton-Hunter)
Exiger
Pureté radiochimique
>95%
Exigences d'activité immunitaire
>80%
Stabilisant ajouté à l'éluat des marqueurs radionucléides
La même quantité de 1% de blanc d'œuf
radioactivité spécifique
L'intensité de la radioactivité contenue dans une quantité chimique unitaire d'un marqueur
Pureté radiochimique
Méthodes d'essai
Utiliser de l'acide trichloroacétique pour précipiter toutes les protéines de l'échantillon à tester
Norme d'insuline
Réduit la liaison maximale de l'insuline 125I à l'antisérum de 50 %
PosologieX
Dosage de proinsuline Y
Taux de réactivité croisée = X/Y
Titre
Après dilution en série d'un antisérum
réagir avec un antigène marqué
Méthodologie
haute sensibilité
Échantillons et réactifs
Moins de dosage
Forte spécificité
Bonne répétabilité
facile à utiliser
facile à standardiser
défaut
contamination radioactive
Une application clinique
Hormones (telles que hCG, insuline, etc.), médicaments (digoxine, morphine, barbituriques), marqueurs tumoraux (AFP, CEA), protéines traces
Ce sont toutes des traces de substances
Dosage radio-immunologique (RIA)
RIA
principe
réponse d'inhibition compétitive
Il y a de la concurrence
Donc la vitesse devient plus lente
Peut seulement mesurer
antigène
unité
cpm ou cps
Inversement proportionnel à
Plus il y a d’antigènes à tester
La matière la moins radioactive
processus
Antigènes marqués et anticorps connus
Tous sont limités
Complexe antigène-anticorps marqué séparé (B) et antigène marqué non lié (F)
méthode
Deuxième méthode de précipitation des anticorps
Méthode de précipitation au polyéthylène glycol (PEG)
Le PEG peut précipiter de manière non spécifique des protéines macromoléculaires telles que des complexes antigène-anticorps.
Ne précipite pas les antigènes à petites molécules
défaut
Précipitations plus non spécifiques
Lorsque la température est supérieure à 30°C, le précipité est facile à redissoudre
Méthode du réactif PR
Conserve les avantages des anticorps secondaires et du PEG
Économisez le dosage, séparation rapide et facile
Méthode d'adsorption sur charbon actif
Analyse immunoradiométrique (IRMA)
IRMA
principe
réaction contraignante non compétitive
Peut détecter l'antigène
Les anticorps peuvent également être testés
IRMA à point unique
système de réaction
anticorps marqué
Antigène ou anticorps à tester
Antigène enrobé sur phase solide
la différence
principe
Utilisez d’abord un excès d’anticorps marqué pour réagir avec l’antigène à tester
forme complexe
dans le surnageant
Mesurer la quantité de rayonnement dans le surnageant
L'antigène en phase solide est ensuite utilisé pour lier les anticorps marqués non liés.
et séparez-le
Peut détecter l'antigène
Les anticorps peuvent également être testés
IRMA sur deux sites
méthode sandwich à double anticorps
système de réaction
anticorps marqué
Antigène à tester
Anticorps enrobés sur phase solide
la différence
principe
méthode sandwich à double anticorps
Nécessité d'éliminer les anticorps marqués restants
Mesurer la radioactivité en phase solide
Ne peut tester que l'antigène
Par rapport
application
Cellules Raji
Il existe un grand nombre de récepteurs C3b, C1q et C3d à la surface
pas de sourire
Utilise ces récepteurs pour se lier aux complexes immuns circulants qui se lient au complément
Ajoutez ensuite des IgG anti-humaines marquées par un radionucléide
Complexes immuns circulants détectables
Immunotechnique par fluorescence
Aperçu
La première technologie de marquage établie
Ne peut pas être utilisé pour la détermination quantitative
concept
Fluorescéine
Marqueurs directement impliqués dans la luminescence
fluorescence
Molécules à l’état fondamental (stables, faible énergie)
Après avoir absorbé la lumière d'une certaine longueur d'onde
État singulet excité (énergie supérieure)
Lors d'un retour rapide à l'état fondamental
Émet de la lumière à partir d'une plante à luminescence d'excitation spécifique
Efficacité de la fluorescence
Le pourcentage de fluorescéine qui convertit l'énergie lumineuse absorbée en fluorescence
extinction de la fluorescence
Sous certains facteurs physiques et chimiques, la fluorescence peut s'affaiblir, voire disparaître.
Rayonnement UV
haute température
Utiliser des extincteurs de fluorescence pour éliminer la fluorescence non spécifique
bleu de méthylène
Bleu Evans
Fuchsine basique
solution iodée
substance fluorescente
Pigments fluorescents
Isothiocyanate de fluorescéine (FITC)
vert jaunâtre
masse moléculaire
389,4 kDa
Lumière absorbée maximale (longueur d'onde d'excitation)
490-495nm
Lumière émise maximale
520-530 nm
Le plus largement utilisé
avantage
Les yeux humains sont sensibles au jaune-vert
Habituellement, il y a moins de fluorescence verte dans les échantillons sectionnés que de fluorescence rouge
Tétraéthyl Rhodamine (RB200)
Orange
Lumière absorbée maximale (longueur d'onde d'excitation)
570 nm
Lumière émise maximale
595-600 nm
Insoluble dans l'eau
Soluble dans l'éthanol et l'acétone
Peut être conservé longtemps
Isothiocyanate de tétraméthylrhodamine
rouge-orange
Lumière absorbée maximale (longueur d'onde d'excitation)
550 nm
Lumière émise maximale
620 nm
Peut être doublement étiqueté avec FITC
Phycoérythrine (R-RE)/(PE)
couleur orange
Absorption maximale (longueur d'onde d'excitation)
565 nm
488 nm
Lumière émise maximale
620 nm
575 nm
Insoluble dans l'eau
Soluble dans l'éthanol et l'acétone
Peut être doublement étiqueté avec FITC
largement utilisé
Lumière d'excitation partagée de 488 nm
Autres substances fluorescentes
Chélates de lanthanide
Europium (Eu3)
Le plus largement utilisé
Applicable à
immunoessai par fluorescence résolu en temps
Génère une fluorescence après l'action enzymatique
Pas d'effet fluorescent lui-même
La fluorescence peut être produite sous l'action d'enzymes
Préparation d'anticorps fluorescents
Marquage à la fluorescéine des anticorps
méthode
Méthode d'agitation
Dialyse
Purification des anticorps marqués
méthode
Dialyse
séparation chromatographique
Identification des anticorps
Titre d'anticorps
test d'immunodiffusion biphasique
Lorsque la teneur en antigène est de 1 g/L
Titre>1:16
Facteurs qui influencent
température
Plus la température est basse
Une plus grande efficacité et une plus grande résistance
pH
Dépend des pigments fluorescents
Par exemple, le FITC diminue l’acidité
Les chélates de lanthanide se renforcent en acidité
concentration
Concentration trop élevée
phénomène d'auto-extinction
Parce qu'elle est trop élevée, les molécules devraient entrer en collision violemment
perdre de l'énergie
Solvant
Impuretés fluorescentes dans les solutions d'éthanol
Besoin de traitement
rehausseur
Accélérer la teinture
N'a aucun effet sur les effets de coloration
Microscope à fluorescence
Source de lumière
source de lumière d'excitation
Lampe au mercure haute pression
lampe au xénon
Lampe halogène
filtre
Filtre thermique
Devant le condenseur de la salle lumineuse
Bloque le passage des rayons infrarouges et isole de la chaleur
filtre d'excitation
entre la source lumineuse et l'objectif
Transmet sélectivement la lumière dans la gamme de longueurs d'onde ultraviolettes visibles
Classification
Filtre UV (UG)
La lumière UV de 275 à 400 nm passe à travers
Transmission maximale
365 nm
Filtre UV bleu (BG)
La lumière ultraviolette bleue de 325 à 500 nm traverse
Transmission maximale
410 nm
Filtre absorbant
entre l'objectif et l'oculaire
Bloque la lumière d’excitation et laisse passer la fluorescence émise
fond sombre
Afficher la fluorescence
facile à observer
Yeux protégés des fortes irritations lumineuses stimulantes
Plage de transmission
410-650 nm
Classification
OG
Orange jaune
GG
jaune verdâtre clair
autre
Regarder FITC
filtre d'excitation
BG12
Filtre absorbant
OG4 ou GG9
Regarder RB200
filtre d'excitation
BG12
Filtre absorbant
OG5
Technologie des anticorps fluorescents
Aussi connu sous le nom
Immunohistochimie par fluorescence
Nécessaire à la réponse des tissus ou des cellules
Microscopie à fluorescence
Il faut le regarder au microscope
processus
anticorps marqué
Seuls les anticorps peuvent être marqués
Réagir avec les antigènes tissulaires ou cellulaires dans la coupe
Après lavage et séparation
Observer les complexes et les pièces au microscope
signification clinique
Caractériser ou localiser les antigènes des cellules tissulaires
position
Quelle partie émet de la lumière (noyau, cytoplasme, enveloppe, etc.)
Des tests de localisation d'antigène peuvent être effectués
Technologie des anticorps fluorescents
immunochimie tissulaire enzymatique
préparation des spécimens
Doit avoir des cellules
Le sérum et le plasma ne sont pas acceptables
source
Coupes de tissus, empreintes de tissus, frottis cellulaires, frottis microbiens, frottis cellulaires exfoliés, échantillons de liquides corporels concentrés (sédiments d'épanchement pleural et ascite)
Les types
méthode directe
Réagir directement avec l'antigène
marqué sur l'anticorps
Seul l'antigène peut être vérifié
Caractéristiques
Spécificité la plus élevée
Méthode avec la coloration non spécifique la plus faible
Haute spécificité directe
mauvaise sensibilité
Peu de facteurs de coloration fluorescente non spécifiques
méthode indirecte
Testez les anticorps inconnus en utilisant des antigènes connus
anticorps primaire
Ig humaine
anticorps secondaire
Ig de luciole ou de mouton/lapin marquées par une enzyme
Il en va de même pour les tests ELISA pour les anticorps.
Il y a un anticorps secondaire
Marqué sur un anticorps secondaire
Anticorps secondaire marqué à la fluorescéine conjugué à l'anticorps primaire
Peut détecter l'antigène
Les anticorps peuvent également être testés
Avantages par rapport à la méthode directe
Détecter différents antigènes
Préparez simplement un anticorps fluorescent
Parce que la fluorescéine est marquée sur l'anticorps secondaire
Détection
anticorps antinucléaires
Le plus efficace
méthode de double étiquetage
Étiquetez différents anticorps avec FITC et rhodamine respectivement
Colorer le même spécimen
Une application clinique
Ne remplace pas d'autres tests de routine
Tests d'auto-anticorps
Anticorps antinucléaires (ANA) dans le sérum
Détection d'agents pathogènes
Identifier les agents pathogènes
Niveaux d'anticorps spécifiques dans le sérum
Tests immunopathologiques
Détection d'antigènes et de récepteurs de surface
Identification des lymphocytes et des sous-populations
Cytométrie en flux
Type de test immunologique par fluorescence
Test immunologique par fluorescence résolu dans le temps (TRFIA)
principe
Avec des éléments de lanthanides
Antigène ou anticorps de marquage
Déterminé à l'aide de techniques résolues dans le temps
résolution temporelle
fluorescence non spécifique
La durée de vie de la fluorescence est courte
Chélates de lanthanide
Longue durée de vie de la fluorescence
Après décroissance non spécifique de la fluorescence
Détecter à nouveau le signal fluorescent
Déplacement de Stokes
Différence de longueur d'onde entre le spectre d'excitation et le spectre d'émission
Si le déplacement de Stokes est faible
Les spectres d'excitation et d'émission se chevauchent souvent
interférer les uns avec les autres
Les chélates de lanthanide ont de grands déplacements
Élimine facilement les interférences de diffusion de la lumière d'excitation
force du signal
La fluorescence peut être améliorée dans une solution d'amélioration acide
Une application clinique
similaire au dosage radio-immunologique
Détecter les substances traces
Une protéine de plus à détecter
Test immunologique de polarisation de fluorescence (FPIA)
principe
Utiliser des réactions de compétition antigène-anticorps
Différence dans le degré de polarisation de fluorescence de l'antigène marqué et du complexe
application
dans le sang ou l'urine
Détermination de petites molécules
concentration de drogue
Première méthode
Dosage immunoenzymatique fluorescent
principe
Utiliser la réaction de l'antigène et de l'anticorps, à l'aide d'un substrat fluorescent de réaction enzymatique
La précédente est la méthode sandwich à double anticorps.
Ajouter un substrat
processus
Le substrat 4-MUP n'a pas de fluorescence
Émettre de la fluorescence sous la stimulation de l'ALP
Analyseur de cytométrie en flux (FCM)
Aperçu
Utiliser les caractéristiques de l'optique intégrée, de la mécanique des fluides, de la technologie informatique électronique et de la fluorescéine pour produire de la fluorescence
Technologie de mesure quantitative multiparamétrique et de tri de chaque cellule
Sources lumineuses couramment utilisées
lumière émise
Lumière absorbée par la fluorescéine
laser
structure
Système de flux de liquide
Système de test de conversion optique et de signal
Systèmes informatiques pour le traitement et l'amplification du signal
principe
Suspensions unicellulaires et fluides de gaine marqués avec des carburants fluorescents spécifiques
Entrez dans la salle de flux
Formation d'une colonne de fluide unicellulaire qui encapsule la suspension cellulaire dans le fluide de la gaine
Colonne de liquide et faisceau laser horizontal (source de lumière d'excitation)
intersection verticale
données
Lumière diffusée vers l'avant (FS)
la taille des particules
Lumière diffusée latéralement (SS)
La complexité à l'intérieur de la particule
douceur de la surface
C'est la même chose que les cinq catégories
Fluorescence (FL)
Le nombre de pièces fluorescentes colorées par des particules
Coloration PI
cycle cellulaire
Marqueurs ADN couramment utilisés
PI (iodure de propidium)
Longueurs d'onde d'excitation couramment utilisées
488 nm
Longueurs d'onde d'émission couramment utilisées
620 nm
Taux de récolte par tri
Il existe une relation correspondante entre le taux de récolte et la pureté
Haute pureté des cellules triées
Le taux de récolte est relativement faible
Fluide de gaine
effet
Enrouler autour du flux d’échantillon
Centrer le flux d'échantillon dans la buse
Précision garantie
Empêcher les cellules de s'approcher de la paroi de la buse et de bloquer le trou
application
Sous-ensembles de lymphocytes T
Sensibilité de détection la plus élevée
Cellules B colorées avec des anticorps fluorescents anti-Ig
La surface présente des changements de fluorescence avec le temps
bague, tache, casquette, disparition
dosage immunoenzymatique
dosage immunoenzymatique
Profiter de l’activité catalytique efficace et spécifique des enzymes
conjugué enzymatique
Antigène ou anticorps marqué par une enzyme
Bioamplification des substrats catalytiques
Une petite quantité d’enzyme peut refléter une grande quantité de substances
Technologie de marquage
Antigène ou anticorps
Positionnement, qualitatif, quantitatif
Caractéristiques
enzymes et substrats
besoins en enzymes
Forte activité
Haute pureté
Facile à coupler avec un antigène et un anticorps
L'activité est stable après marquage
N'affecte pas la réactivité immunitaire des antigènes et des anticorps
spécificité
Aucune enzyme endogène ou inhibiteur identique à l'enzyme marquée n'est présent dans l'échantillon testé.
produits fabriqués par catalyse enzymatique
facile à juger ou à mesurer
Enzymes couramment utilisées
Peroxydase de raifort (HRP)
substrat
Tétraméthylbenzidine (TMB)
le plus couramment utilisé
bleu
bonne stabilité
Pas besoin d'éviter la lumière, pas d'effet mutagène
défaut
Mauvaise solubilité dans l'eau
O-phénylènediamine (OPD)
L'un des substrats chromogènes les plus sensibles
Orange jaune
instable
Disponible sous forme de comprimés ou de poudre
Reconstituer avant utilisation
concept
Dérivé de légumes
une glycoprotéine
Teneur en sucre 18%
composition
glycoprotéine incolore
enzyme principale
Indépendant de l'activité enzymatique
Pic d'absorption maximale
275 nm
Rouge sang ferreux
coenzyme
groupe actif d'enzyme
Pic d'absorption maximale
403 nm
le plus couramment utilisé
Phosphatase alcaline (AP/ALP)
substrat
p-nitrophénylphosphate (p-NPP)
couleur
jaune
concept
Extrait d'E. coli ou de muqueuse intestinale de veau
Classification
Bactériogène
la muqueuse intestinale
Haute activité
β-Galactosidase (β-Gal)
substrat
4-méthylumbelanoyl-RD galactopyranoside (4-MUU)
Caractéristiques
Sensibilité supérieure à celle du HRP
30 à 50 fois
Mais lors de la mesure, il faut
Fluoromètre
concept
Extraction d'Escherichia coli
Le sang humain manque de cette enzyme
Aucune interférence des enzymes endogènes pendant la mesure
Marqueurs enzymatiques
Méthode de marquage
Méthode de réticulation du glutaraldéhyde
Méthode au periodate de sodium modifié
Antigène et anticorps marqués HRP (peroxydase de raifort)
méthode la plus couramment utilisée
Support en phase solide
Le support en phase solide le plus couramment utilisé pour ELISA
polystyrène
couvert
Le processus de liaison d’un antigène ou d’un anticorps à un support solide
Tampon
PH9.6
tampon carbonate
fermé
1 % à 5 % d'albumine sérique bovine ou 5 % à 20 % de sérum de veau
Couvert à nouveau
Élimine le développement de couleurs non spécifiques
Empêcher l'entrée de protéines d'impuretés dans le sérum et interférer avec les résultats
Classification
immunohistochimie enzymatique
utilisé en pathologie
Localisation des antigènes dans des coupes de tissus ou d'autres échantillons
seulement l'antigène
Juste le positionnement
Dosage immunoenzymatique (EIA)
Qualification ou quantification d'antigènes ou d'anticorps dans des liquides
Dosage immunoenzymatique homogène
Technologie de dosage immunologique amplifié par enzyme (EMIT)
Test immunologique avec donneur de clonase (CEDIA)
L'enzyme marquée sur l'antigène est inactive Actif uniquement après une liaison spécifique
dosage immunoenzymatique hétérogène
dosage immunoenzymatique en phase solide
dosage immunoenzymatique en phase liquide
Séparer et distinguer les marqueurs enzymatiques liés et libres selon que cela est nécessaire
séparé en phases hétérogènes
Le divorce nécessite une séparation
Dosage immunoenzymatique homogène
Homogène sans séparation
Pas besoin de transporteur
dosage immunoenzymatique
droit de la concurrence
principe
L'enzyme combinée perd son activité
Tester l'activité enzymatique
Ce qui manque, c'est l'enzyme de liaison
avantage
Pour la mesure d'antigènes à petites molécules (hormones) ou d'haptènes (médicaments)
dosage immunoenzymatique hétérogène
séparation de phases hétérogène
principe
L'enzyme combinée reste active
Il suffit de laver la planche
C'est une phase différente
Classification
dosage immunoenzymatique en phase liquide
Détermination de quantités extrêmement faibles d'hormones peptidiques courtes
Médicaments et autres haptènes de petites molécules
Sensibilité
ng à pg
dosage immunoenzymatique en phase solide
Utiliser des supports solides comme supports
commun
Test immuno-enzymatique (ELISA)
Test immuno-enzymatique (ELISA)
Comment détecter les antigènes
Méthode sandwich double anticorps (méthode en deux étapes)
processus
anticorps en phase solide
Connectez d’abord l’anticorps spécifique au support en phase solide
Réaction antigène-anticorps
Ajouter l'antigène à tester
Formation d’un complexe anticorps-antigène en phase solide
premier lavage
Anticorps marqués par des enzymes
Ajouter des anticorps marqués enzymatiques
Formation d'un complexe anticorps-antigène-anticorps en phase solide marqué par une enzyme (sur deux épitopes différents de l'antigène à tester)
deuxième lavage
Développement des couleurs
Ajouter du substrat pour développer la couleur
La quantité de produit coloré est proportionnelle à l'antigène à tester
Applicable à
méthode la plus couramment utilisée
Antigènes multivalents avec au moins deux épitopes
antigène macromoléculaire
Tels que l'antigène de surface de l'hépatite B, l'alpha-fœtoprotéine, l'hCG
molécule d'adhésion soluble extracellulaire
antigène soluble
Deux sites (méthode en une étape)
processus
Combiner l'antigène à tester et l'anticorps marqué par une enzyme
Rejoignez la réaction en même temps
Les deux anticorps n'interfèrent pas l'un avec l'autre
Après un lavage
Ajouter du substrat pour développer la couleur
défaut
Lorsque la concentration de l'antigène à tester est trop élevée
effet crochet (phénomène de backband)
Rendu des couleurs réduit
faux négatif
Les échantillons peuvent être dilués et retestés
droit de la concurrence
Inversement proportionnel à
Plus la quantité d'antigène à mesurer est élevée
Les produits les moins colorés
processus
anticorps en phase solide
Connectez d’abord l’anticorps spécifique au support en phase solide (quantité limitée)
Réaction antigène-anticorps
Ajouter l'antigène à tester et l'antigène marqué par une enzyme (quantité limitée)
Anticorps spécifiques de liaison concurrents
la lessive
Développement des couleurs
Ajouter du substrat pour développer la couleur
Applicable à
Antigènes à petites molécules avec un seul épitope
Médicaments, hormones, etc.
Comment détecter les anticorps
méthode indirecte
Anticorps du virus de l'hépatite C
processus
antigène en phase solide
Revêtement de l'antigène sur un support en phase solide
Réaction antigène-anticorps
Ajouter l'anticorps à tester
Formation d’un complexe antigène-anticorps en phase solide à tester
premier lavage
Anticorps secondaire marqué par une enzyme
Ajouter un anticorps secondaire marqué par une enzyme (IgG anti-humaine de chèvre)
Formation d'un complexe d'anticorps secondaire antigène-anticorps-à-détecter-marqué enzymatique en phase solide
deuxième lavage
Un marqueur détecte plusieurs analytes
Les anticorps secondaires marqués par des enzymes peuvent détecter tout complexe antigène-anticorps
Développement des couleurs
Directement proportionnel
droit de la concurrence
Anticorps central du virus de l’hépatite B (HBcAb), anticorps du virus de l’hépatite B e (HBeAb)
Inversement proportionnel à
Plus la quantité d'anticorps à mesurer est élevée
Les produits les moins colorés
processus
antigène en phase solide
Revêtement de l'antigène sur un support en phase solide
édition limitée
Réaction antigène-anticorps
Ajouter l'anticorps à tester et l'anticorps marqué par une enzyme (quantité limitée)
Anticorps spécifiques de liaison concurrents
la lessive
Développement des couleurs
Ajouter du substrat pour développer la couleur
Facteurs qui influencent
Centrifugation insuffisante de l'échantillon
présence de fibrine
Les étiquettes enzymatiques colleront à la fibrine
Ce qui fait qu'il est impossible de le laver
couleur sombre
faux négatif
Hémolyse
Parce que l'hémolyse est de couleur foncée
faux négatif
méthode sandwich double antigène
sensibilité et spécificité
plus élevé que la méthode indirecte
application
Détection des anticorps de surface de l'hépatite B
méthode de capture
également connue sous le nom de méthode indirecte inverse
processus
Anticorps secondaire contre les IgM déposés sur un support en phase solide
Ajouter un spécimen à tester
Les IgM peuvent être capturées par des porteurs en phase solide
Ajouter un antigène spécifique
Ajouter des anticorps marqués enzymatiques à des antigènes spécifiques
Formation d’un complexe d’anticorps marqué en phase solide anticorps secondaire-IgM-antigène-enzyme
application
Anticorps de type IgM
application
facteur d'adhésion soluble extracellulaire
ELISA
Principales méthodes de mesure
Technologie de dosage immunologique par chimiluminescence
principe
Combinant la haute sensibilité de l’analyse par luminescence avec la haute spécificité des antigènes et des anticorps
Technologie de test immunologique marqué pour détecter des traces d'antigènes ou d'anticorps
Identique au dosage radio-immunologique
Méthode de marquage
méthode de condensation au carbodiimide
agent de condensation
carbodiimide
Méthode d'oxydation au périodate de sodium
Les glycoprotéines marquées ont une bonne stabilité
Pas facile de tomber
Méthode de couplage au sel de diazonium
Simple, peu coûteux et bonne répétabilité
Méthode d'activation du N-hydroxysuccinimide
briller
État fondamental
absorber la lumière
passer à l'état excité
retour à l'état fondamental
Le processus de libération de photons
Même principe que la fluorescence
agent chimiluminescent
taper
immunoessai par chimiluminescence directe
Utiliser de l'ester d'acridinium
en milieu alcalin
Marquage direct des antigènes (anticorps)
Une réaction antigène-anticorps se produit
Dosage immunoenzymatique chimiluminescent
Marqueurs enzymatiques impliqués dans la luminescence par réactions catalytiques ou transfert d'énergie
Utilisez de la peroxydase de raifort ou de la phosphatase alcaline
Antigène ou anticorps de marquage
Une réaction antigène-anticorps se produit
Test immunologique par chimiluminescence de microparticules
Marque
phosphatase alcaline
Test immunologique par électrochimiluminescence
Participer aux réactions d’oxydation par transfert d’énergie
Anticorps (antigène) marqué au ruthénium terpyridine
tripropylamine
Donneur d'électrons (accepteur d'électrons)
Dans le champ électrique, une réaction chimiluminescente spécifique se produit à la surface de l’électrode en raison du transfert d’électrons.
Incluant deux procédés : électrochimie et chimiluminescence
avantage
Similaire au dosage radio-immunologique
Mais pas de pollution
Haute sensibilité et forte spécificité
ng ou même pg
Large plage linéaire
Le marqueur est stable
Le réactif a une longue période de validité et est non toxique
haut degré d'automatisation
application
Hormones, marqueurs tumoraux, concentrations de médicaments, marqueurs myocardiques, anticorps viraux et autres activités biologiques traces
Détection
petite quantité de
Technologie d'amplification biotine-avidine
biotine activée
Utiliser le groupe carboxyle de la biotine
Utiliser la modification chimique pour fabriquer des dérivés de divers groupes réactifs
Après activation
Facilement couplé aux groupes correspondants dans divers antigènes, anticorps, enzymes et molécules d'acide nucléique
marqueurs biotinylés
structure
je sonne
anneau de cuivre imidazole
Avidine : tryptophane
Bague II
Anneau thiophène
Anticorps de liaison et autres grosses molécules
Biotine (B)
Avidine (A)
haute affinité
Combiné avec rapide, spécifique et stable
Avidine
forme de croix
Biotine
Triangle
L'avidine possède quatre sites et peut lier 4 biotines
Il y a donc une réaction d'amplification
Étiquetez différents types de biotine activée
biotine activée
Impossible d'étiqueter les groupes carboxyle
Parce que c'était une modification chimique faite par lui
Applications du système biotine-avidine (BAS)
B : biotine, A : avidine, S : amplification
Méthode de marquage à l'avidine
méthode au périodate de sodium
Méthode ABC
principe
C : La signification de l’enzyme
enzyme de marquage de la biotine
avidine liant la biotine
Avidine conjuguée à un anticorps biotinylé
enzymes et anticorps marqués
C'est entièrement de la biotine
L'avidine est uniquement utilisée pour se lier à la biotine
couplé à l'ELISA
Améliore considérablement la sensibilité de l'ELISA
L'enzyme est marquée dans
sur la biotine
test immunologique sur membrane en phase solide
Membranes en phase solide couramment utilisées
Membrane nitrocellulosique (NC)
Or colloïdal
Les complexes antigène-anticorps sont marqués avec des particules d’or
au microscope
Particules brun foncé
oeil nu
taches rouges ou roses
hCG
Détecter l'hCG
Test d'or colloïdal d'anticorps monoclonaux
Sensibilité la plus élevée
test hCG pendant l'ovulation
Pour éviter les réactions croisées
Dosage immunoenzymatique monoclonal à deux points
8-10 semaines
atteindre le sommet
L'hCG dans le sérum est légèrement plus élevée que dans l'urine
La seule hormone dont la sécrétion n’augmente pas à mesure que le poids du placenta augmente
Différencier la grossesse molaire de la grossesse normale
Test quantitatif de concentration d'hCG
Classification
Test d'immunofiltration à l'or en pointillé
sur film NC
Le liquide s'écoule verticalement vers le bas
L'or colloïdal comme un vêtement pulmonaire
Dosage immunochromatographique Dot Gold
sur film NC
écoulement horizontal de liquide
comme des bandelettes de test de grossesse
Test immunospot lié à une enzyme (ELISPOT)
Cellules B mesurables
sécréter des anticorps spécifiques
La sécrétion d'anticorps peut également être mesurée
Cellules T mesurables
Cellules T sécrétant des cytokines
Western-blot/wb
processus
trois phases
Électrophorèse sur gel SDS-polyacrylamide (SDS-PAGE)
électrophorèse de zone
électrotransfert
dans des conditions d'électrophorèse par transfert
Transfert sur membrane de nitrocellulose (membrane NC)
Transférer la protéine sur une membrane en phase solide
Toujours invisible à l'œil nu
Détection de réactions enzymatiques
Protéine transférée (équivalente à un support en phase solide recouvert d'antigène)
Réagir avec des anticorps spécifiques et des anticorps secondaires marqués par des enzymes
Ajouter du substrat pour développer la couleur
SDS-PAGE et ELISA complets
Une application clinique
VIH
Test de confirmation
Détection des composants d'anticorps
gp41/gp120/gp160 apparaît
deux bandes dans
S’il meurt, appelez le 120 et cela ne le guérira pas. Il va s’enfuir.
gp120 se lie au CD4
Détruire les cellules T CD4
CD4/CD8
Le ratio diminue
Dosage des anticorps antigènes extractifs (anticorps ENA)
Tâche sud
Méthodes de transfert pour détecter les acides nucléiques
immunohistochimie
Aperçu
immunohistochimie
anticorps spécifiques marqués
Tests pour localiser, quantifier et identifier qualitativement les antigènes
Ne peut tester que l'antigène
Source du spécimen
tissu vivant
Coupes de tissus
Divers fluides corporels et liquides de ponction (le sérum et le plasma ne sont pas acceptables car ils ne contiennent pas de cellules)
Frottis et empreintes
Cellules cultivées
Diapositive de cellules vivantes
Le but de la fixation des échantillons
protéine de coagulation
Mettre fin à l'action des enzymes intracellulaires
Empêcher l'autolyse
Maintenir la forme et la structure des cellules
Maintenir l'antigénicité cellulaire
Empêcher les couches cellulaires de tomber
Élimine les lipides qui empêchent la liaison des anticorps
Inhiber la croissance bactérienne
Anticorrosion
Processus d'immunohistochimie
Extraction et purification d'antigènes
Antigène à tester
Immunisation des animaux et fusion cellulaire
Préparation d'anticorps spécifiques
technologie des hybridomes
Purification des anticorps
Marqueurs conjugués aux anticorps
Former des anticorps marqués
Manipulation et préparation des échantillons
réactif primaire
Anticorps
Des anticorps monoclonaux
Puisqu'il ne peut détecter que des tissus, il doit s'agir d'un antigène, il ne peut donc détecter que des antigènes.
étape clé
Immunocoloration
histochimie par immunofluorescence
Anticorps marqués à la fluorescéine
Ne peut tester que l'antigène
Caractéristiques
Peut détecter simultanément plusieurs antigènes dans les échantillons
Avantages par rapport aux techniques d’immunohistochimie enzymatique
Pendant l'observation en microscopie à fluorescence
Précautions
Observer les échantillons immédiatement après la coloration
Il n'est pas conseillé d'observer un seul champ de vision pendant une longue période
Utilisez de l'huile pour lentilles non fluorescente
Observation en chambre noire
erreur
L'observation est meilleure à 37 ℃
immunohistochimie enzymatique
Utiliser des anticorps (antigènes) marqués par des enzymes
Les anticorps et les antigènes peuvent être mesurés
Classification
Technologie d’immunohistochimie des anticorps marqués par des enzymes
Identique au test immunoenzymatique
Méthode de pontage enzymatique de coloration histochimique d'anticorps immunoenzymatiques non marqués
L'enzyme n'est pas marquée sur l'anticorps
Anticorps anti-enzymes comme troisièmes anticorps
Avoir un anticorps pontant comme anticorps secondaire
Formation d'un complexe anticorps-pont anticorps-anti-enzyme spécifique à l'antigène de test
Méthode de coloration enzymatique des anticorps non marqués-PAP (méthode peroxydase-anti-peroxydase)
Le troisième anticorps est différent
Le troisième anticorps (anticorps anti-enzyme) et l'enzyme forment un complexe soluble (complexe PAP)
Ce complexe est constitué de 2 anticorps anti-enzymes et de 3 enzymes peroxydase
structure pentagonale
très stable
immunité aux greffes
Classification
autotransplantation
Le greffon provient de l'hôte lui-même
Aucune réaction de rejet
greffe syngénique
Transplantation entre individus génétiquement identiques
Jumeaux identiques
Les réactions de rejet ne se produisent généralement pas
greffe allogénique
Transplantation entre individus de la même espèce mais de génotypes différents
antigène cible provoquant le rejet
antigène majeur d'histocompatibilité (MHA)
Antigène majeur d'histocompatibilité (MHA) du complexe majeur d'histocompatibilité (MHC) sur le chromosome 6
Également connu sous le nom d’antigène leucocytaire humain (HLA)
CMH humain = HLA
Classification
HLA I
HLA-A, HLA-B, HLA-C
Toutes les surfaces cellulaires nucléées
La plupart des lymphocytes
cellules nerveuses
pas de noyau
HLA-C
N'a aucun effet significatif sur le processus immunitaire de transplantation
HLA II
HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP
Distribué dans les cellules APC professionnelles, les cellules T activées et les cellules épithéliales thymiques
domaine de type immunoglobuline
Domaines fonctionnels α2 et β2
Région de liaison au polypeptide antigène
Domaines fonctionnels α1 et β1
Région de liaison CD4
Domaine fonctionnel β2
HLA-DR
Le plus immunogène
Le plus important pour le rejet de greffe
Méthode CDC pour détecter l'antigène HLA-DR
Cellules à tester
cellules B purifiées
Parce que les protéines de classe II sont présentes à la surface des cellules B et des macrophages (APC professionnels)
Une interférence de classe HLA-I n’a pas été exclue
avec des cellules B purifiées
typage biologique
PCR-RFLP
PCR-SSO
La méthode la plus utilisée pour le typage HLA de classe II
RAP/SSP
principe
Concevoir un ensemble d'amorces spécifiques à une séquence (SSP) pour les allèles HLA
Amplification PCR de l'ADN à tester
obtenir
produits d'amplification allèle-spécifique
PCR-SSCP
SBT
La méthode la plus précise et la plus intuitive
doit
Isolement de l'ADN des cellules à tester
Amplification par PCR à l'aide d'amorces spécifiques d'un locus, d'un groupe ou d'un allèle
Purification et séquençage de produits amplifiés
Comparaison de la séquence génétique mesurée avec la séquence d'ADN connue de la banque de gènes
Cytologie de typage HLA
typage négatif
cellules standards
Cellules typées homozygotes avec un seul antigène LD à leur surface
typage positif
cellules standards
lymphocytes présensibilisés
Structure et fonction des molécules du CMH
CMH
Groupe de gènes étroitement liés sur un chromosome codant pour les principaux antigènes d'histocompatibilité.
CMH-I
Les cellules tumorales ne peuvent être tuées par les cellules Tc que si elles expriment le CMH-I.
Les plaquettes expriment uniquement le CMH-1
CMH-II
Marqueurs de surface importants des cellules présentatrices (APC)
Les lymphocytes B peuvent exprimer le CMH de classe I et de classe II
Reconnu par les cellules T CD4 auxiliaires
Ruban
Epitopes allotypiques (partie polymorphe des molécules HLA de classe II)
Région de liaison au peptide antigénique
Reconnaître les molécules CD4 et CD8
Zone d'échantillonnage d'Ig
Région de type immunoglobuline : domaine β2
Ancrage des molécules HLA à la membrane cellulaire
région transmembranaire
et signalisation intracellulaire
Région intracellulaire (région cytoplasmique)
HLA-II
Région de liaison au polypeptide antigène
Domaines fonctionnels α1 et β1
domaine de type immunoglobuline
Domaines fonctionnels α2 et β2
Région de liaison CD4
Domaine fonctionnel β2
Facteurs qui déterminent le polymorphisme du CMH
Les gènes du CMH sont constitués de plusieurs allèles
sont codominants
voie d'identification
voie d'identification directe
Donateur APC
Antigène de transplantation du donneur (CMH)
présenté aux lymphocytes T receveurs
voie d'identification indirecte
DestinataireAPC
Antigène de transplantation du donneur (CMH)
présenté aux lymphocytes T receveurs
Reconnaissance du CMH donneur par les cellules T
molécule reconnue
sont des peptides dérivés de molécules allotypes traitées du CMH
Tant qu'il existe une différence d'acide aminé entre le donneur et le receveur
une réaction de rejet peut survenir
taper
Réaction hôte contre greffon (HVGR)
Rejet du donneur par le receveur
Réaction du greffon contre l'hôte (GVHR)
Le donneur rejette le receveur
Réaction hôte contre greffon (HVGR)
Classification
rejet suraigu
En quelques minutes à 1-2 jours
Un rejet humoral irréversible se produit
Rapide, fort, irréversible
réponse immunitaire humorale
substance principale médiatrice
Anticorps cytotoxiques (cellules T cytotoxiques/cellules T tueuses/cellules Tc)
raison
Ceux qui ont des groupes sanguins ABO et autres incompatibles, des groupes sanguins Rh incompatibles, des grossesses multiples, des transfusions sanguines répétées ou ceux qui ont reçu une greffe d'organe
Mauvaise perfusion de l'organe transplanté ou temps d'ischémie excessif
Mauvaise conservation et manipulation des greffons
rejet aigu
semaines ou mois
type le plus courant
diagnostic
Les valeurs de sIL-2R et de créatinine sérique ont augmenté simultanément
Méthode d'incorporation du 3H-TdR 4 heures
Test de transformation cellulaire 3H-TdR sur 4 heures
Méthodes de détection des lymphocytes T sensibilisés chez les receveurs
Un test satisfaisant pour prédire la crise aiguë de rejet
Différenciation entre rejet aigu et infection virale
1 à 5 jours avant l'apparition des symptômes cliniques
Augmentation du rapport CD4/CD8
>1,2
Indique qu'un rejet aigu est sur le point de se produire
infection à cytomégalovirus
Diminution des CD4/CD8
<1,08
Forte possibilité d'infection
rejet chronique
des mois voire des années
La maladie progresse lentement
Réaction du greffon contre l'hôte (GVHR)
greffe de moelle osseuse
Si vous ne recevez pas de traitement immunosuppresseur
Dépend de HLA-DR
Avant le traitement, une radiothérapie et une chimiothérapie à haute dose sont nécessaires pour tuer toutes les cellules de la moelle osseuse.
faire preuve d’incompétence immunitaire
Montre ceci
Cela nécessite uniquement une correspondance du groupe sanguin ABO.
La moelle osseuse qui pénètre dans l'organisme du receveur contient un grand nombre de cellules immunitaires
Peut effectuer une réponse immunitaire aux organes et tissus du receveur
Typage sérologique HLA
Test de cytotoxicité dépendant du microcomplément (CDC)/test de microlymphocytotoxicité
Méthodes de typage HLA-I et HLA-II
Test de cytotoxicité dépendant du complément
génétiquement prédisposé
Non identifiable
HLA-DP
Le typage cytologique HLA est requis pour l’identification
Identification des cellules présensibilisées par typage cellulaire
Sérums de typage standard anti-HLA spécifiques connus
Anticorps connus
Si caractérisé comme anti-HLA-DR ou DQ
Utiliser les plaquettes pour adsorber les anticorps HLA-I
Combiner avec les lymphocytes à tester
Antigène à tester
ajouter un complément
Typage HLA cytologique
HLA-DP identifiable
Cellules standards utilisées
typage négatif
Cellules typées homozygotes avec un seul antigène LD à leur surface
typage positif
lymphocytes présensibilisés
Test lymphocytaire mixte bidirectionnel/test lymphocytaire mixte
Déterminer si les antigènes HLA du donneur et du receveur sont compatibles
Si la quantité d'infiltration et de cellules transformées est la plus grande
Indique une forte positivité MLC
Indique une inadéquation complète de l'antigène D
Impossible de déterminer le type HLA
Prévention et traitement
Compatibilité croisée HLA
Test de compatibilité croisée lymphocytaire (test de toxicité croisée lymphocytaire)
test de toxicité croisée sur les lymphocytes
But
S'il y a des anticorps contre les lymphocytes du donneur dans le sérum du receveur
Lymphocytes du donneur
Anticorps dans le sérum du receveur
Réaction lymphocytaire mixte monophasique entre les cellules du receveur et les cellules du donneur traitées à la rhomycétine C
et correspondance croisée
Identique au côté principal
traiter
Thérapie allogénique par anticorps anti-CD3
Complications les plus importantes
maladie sérique
immunité tumorale
Macrophages
Macrophages infiltrants dans les lésions tumorales
et propagation de la tumeur et métastases
corrélation négative
Mécanisme d'action anti-tumoral
Tuer les cellules tumorales par la voie ADCC
antigène tumoral
Nouvellement émergé ou surexprimé au cours de l’apparition et du développement de la tumeur
Substances antigéniques
classement spécifique
Antigène spécifique de la tumeur (TSA)
néoantigènes spécifiques des cellules tumorales
Exprimé uniquement dans les cellules tumorales
Cellules tissulaires absentes et normales
antigène de rejet associé au mélanome
MARA
l'antigène prostatique spécifique
Messages d'intérêt public
antigène associé à la tumeur
Non spécifique aux cellules tumorales
Les tissus et cellules normaux expriment également
Quand le cancer survient
Le contenu a considérablement augmenté
Alpha fetoprotéine
AFP
Mécanisme d'effet anti-tumoral
immunité cellulaire
Le rôle le plus important
Cellules T, cellules NK, macrophages
Mécanisme immunitaire humoral
Effet cytolytique du complément
Effet anticorps
Cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps (ADCC)
Phagocytose immunomodulatrice des anticorps
Les anticorps bloquent certains récepteurs à la surface des cellules tumorales
Les anticorps se lient aux récepteurs et bloquent la signalisation dans les cellules tumorales
Les anticorps interfèrent avec l'adhésion des cellules tumorales
Marqueurs tumoraux courants
antigènes embryonnaires
Alpha-fœtoprotéine (AFP)
cancer primitif du foie
AFP>300ug/L
augmenter
femmes enceintes
nouveau née
hépatite aiguë
cancer primitif du foie
Courbes dynamiques AFP et ALT
Différenciation entre le cancer du foie et une maladie hépatique bénigne (hépatite active)
suiveur de courbe dynamique
maladie bénigne du foie
Aussi haut que tu veux
séparateur de courbe dynamique
AFP élevée
Diminution de l'ALT
Pensez au cancer du foie
Antigène carcinoembryonnaire (CEA)
A plusieurs isoformes
CEA-A, CEA-P, CEA-M, etc.
Contient des déterminants antigéniques complexes et plusieurs glycoprotéines isomères
fumeur
Légère augmentation
Tumeurs intestinales
Cancer du côlon, cancer rectal, cancer du pancréas
Antigènes de la chaîne sucrée
CA153
cancer du sein
Tu veux que je touche
Seins à toucher
CA125
cancer des ovaires
Me veux
Un fils est sur le point de naître, donc dans l'ovaire
Protéine 4 de l'épididyme humain (HE4)
Nouveaux marqueurs tumoraux
cancer des ovaires
CA199
tumeurs gastro-intestinales
Je veux 99
Je ne peux pas le digérer, ça coûte 99
cancer du pancréas
9 Vu de côté, il ressemble à un pancréas
Cancer du pancréas, cancer de la vésicule biliaire, cancer du côlon, cancer de l'estomac
Antigène du carcinome épidermoïde (SCCA)
Carcinome squameux
Carcinome épidermoïde de l'œsophage
cancer du col de l'utérus
Enzymes et isoenzymes
Antigène spécifique de la prostate (PSA)
cancer de la prostate
marqueurs tumoraux spécifiques à un organe
Rapport f-PSA et f-PSA/t-PSA
Différenciation entre le cancer de la prostate et les maladies bénignes de la prostate
Le t-PSA et le f-PSA sont tous deux élevés
Rapport f-PSA/t-PSA
<10%
Le cancer de la prostate est probable
Phosphatase acide prostatique (PAP)
cancer de la prostate
Enolase spécifique des neurones (NSE)
Cancer du poumon à petites cellules (carcinome à cellules d'avoine)
a-L-fucosidase (AFU)
cancer primitif du foie
Aucun rapport avec l'AFP
effet complémentaire
Des AFU élevées peuvent également être observées dans des AFP négatives.
Les hormones
Acide Vanillyl Mandélique (VMA)
Phéochromocytome
gonadotrophine chorionique humaine
Tumeurs trophoblastiques et tumeurs des cellules germinales
Môle hydatiforme, môle érosive, choriocarcinome
calcitonine
cancer médullaire de la thyroïde
hormone adrénocorticotrope (ACTH)
Cancer du poumon à petites cellules (carcinome à cellules d'avoine)
protéine
β2-Microglobuline (β2-MG)
Tumeur maligne, myélome, lymphome, maladie rénale
Parce que la β2-microglobuline
Trouvé à la surface de toutes les cellules nucléées
Ferritine
tumeurs malignes, inflammation
Protéine de la semaine (BJP)
myélome multiple
Exprime l'antigène du groupe sanguin ABO
cellules de cancer gastrique
Pas possible d'être
Monosaccharide
maladie d'immunodéficience
maladie d'immunodéficience primaire
déficit primaire en lymphocytes B
Agammaglobulinémie liée à l'X
Gammaglobuline = immunoglobuline
Syndrome de Bruton
Absence d'amygdales
Manifestations cliniques courantes
concept
Agénésie congénitale des cellules B
Cellules B réduites ou défectueuses
Anticorps réduits ou déficients
Difficile à trouver dans la moelle osseuse
Cellule plasmatique
Nombre normal de cellules T
Des infections récurrentes sont survenues chez l'enfant 6 mois après la naissance (enfant d'âge préscolaire)
Résistance actuelle aux IgG et aux IgA sécrétoires dans les 6 mois
déficit sélectif en IgA
Maladies d'immunodéficience humorale les plus courantes
Les IgA et sIgA sériques ont diminué
Souvent accompagné d'infections récurrentes du tube digestif et des voies respiratoires
dans la membrane muqueuse
Thérapie de remplacement des gammaglobulines
invalide
maladie d'immunodéficience variable courante
Maladie d'immunodéficience à cellules B
En raison d’un fonctionnement défectueux des cellules B et d’une signalisation anormale
maladie d'immunodéficience humorale
Syndrome de Bruton
Déficit primaire en lymphocytes T
syndrome d'hypoplasie thymique congénitale
maladie d'immunodéficience cellulaire
syndrome de DiGeorge
Souvent accompagné d'une insuffisance parathyroïdienne
Sensibilité aux infections virales et fongiques
Parce que ni l’immunité cellulaire ni humorale ne fonctionnent
Déficit de la fonction immunitaire cellulaire
Déficit immunitaire humoral
Parce que les lymphocytes T CD4 (cellules Th) sont nécessaires
La transplantation de thymus embryonnaire est efficace
maladie par carence phagocytaire primaire
granulome chronique
Anomalies du nombre, du mouvement ou de la fonction d'adhésion et de l'activité bactéricide des phagocytes
Infections récurrentes par des bactéries ou des champignons purulents
Un déficit en G-6-PD peut provoquer
En raison du manque de G-6-PD, les macrophages ont un apport énergétique insuffisant et des capacités de phagocytose et de destruction réduites.
neutrophiles
La capacité de chimiotaxie a été considérablement diminuée
Syndrome de Chédiak-Higashi
Syndrome des leucocytes de Lasy
Infection cutanée et muqueuse chronique à Candida albicans
Test cutané au Candida albicans
diabète
brûler
nouveau-né normal
La capacité phagocytaire est considérablement réduite
Déficit en complément ou en anticorps
Diminution du métabolisme enzymatique
granulome chronique
Le taux de positivité du test NBT a augmenté de manière significative
septicémie
carence en complément
Défaut de la molécule inhibitrice C1
angio-œdème héréditaire
infections bactériennes récurrentes
pas un virus
Avec lupus érythémateux systémique et néphrite chronique
Pas nécessairement
Déficit immunitaire combiné sévère (DICS)
La patiente a développé des troubles du développement 6 mois après la naissance
Sensible à une infection grave et à la mort
déficit immunitaire combiné sévère lié au sexe
X-SCID
Héritage récessif lié à l'X
Cellules T
absence ou réduction significative
Cellules B
Normal mais dysfonctionnel
Provoque une production réduite d’Ig et un trouble de conversion de type
déficit en adénosine désaminase
Déficit en adénosine désaminase (ADA)
transmission autosomique récessive
principe
Une carence enzymatique altère la décomposition de l'adénosine et de la désoxyadénosine
Provoque un stockage important de métabolites nucléotidiques dATP et dGTP
Effets toxiques sur les premiers lymphocytes T et B
Provoque des anomalies des lymphocytes T et des lymphocytes B
signification clinique
Après la vaccination du nourrisson avec le vaccin BCG
Une infection mortelle et disséminée se produit
maladie d'immunodéficience secondaire
Syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA)
sida
Infecter
Cellules T CD4
principal
Macrophages
Cellules dendritiques
Cellules B
Microglies dans les tissus cérébraux
indice
Anticorps VIH positif
Susceptibilité à la pneumonie à Pneumocystis carinii
Inversion du rapport CD4/CD8
le sarcome de Kaposi
Augmentation des lymphocytes B et des immunoglobulines
test de dépistage préliminaire
Méthode ELISA
Test de validation
immunoblot
test
Test immunologique humoral
Détection des défauts des lymphocytes B
Test immunologique cellulaire
Détection des défauts des lymphocytes T
test cutané
antigène
Substances facilement sensibilisées par contact dans le milieu naturel
tuberculine
Candida albicans
trichomycine
Streptokinase-Streptokinase (SK-SD)
virus des oreillons
test
Test simultané de plusieurs antigènes
Positif
Test cutané positif à plus de 3 antigènes
Enfants de moins de 2 ans
un antigène positif
Négatif
Positif pour moins de 2 antigènes
Diamètre de réaction de 48 heures
<10mm
indice
Immunodéficience ou réactivité réduite
Test de stimulation PHA
fonction immunitaire cellulaire non spécifique
PHA-L : phytohémagglutinine
Le PHA stimule le test de prolifération et de transformation des lymphocytes
Déterminer la fonction des lymphocytes T
Test de prolifération et de transformation lymphocytaire
Nouveau-né une semaine plus tard
Une réaction d’irritation au PHA se produit
Éliminer la possibilité d’un déficit immunitaire cellulaire grave
sida
Envahit principalement les cellules CD4 (cellules T auxiliaires Th)
gp120 se lie à la protéine du récepteur CD4
Diminution du rapport CD4/CD8
Déficit de la fonction immunitaire cellulaire
Maladie de déficit en phagocytose
Capacité bactéricide intracellulaire des neutrophiles
Test de réduction du nitro bleu tétrazolium (NBT)
Positif significativement augmenté
septicémie
Test fonctionnel de chimiotaxie
Méthode de chambre de Boyden
Chimiotaxie dans une petite pièce
phagocytose des macrophages
Test de dégagement des particules de carbone
maladie immunoproliférative
Maladies causées par une prolifération anormale des lymphocytes
maladie des plasmocytes
Causée par une prolifération excessive de plasmocytes ou de lymphocytes B producteurs d'Ig
Quantités excessives dans le sérum ou l'urine
immunoglobuline monoclonale
ou fragments de chaînes légères ou lourdes
plasmocytome
Synthèse réduite d'IL-4, inhibition de l'activation des lymphocytes B et inhibition de la capacité de présentation de l'antigène APC
maladie des chaînes lourdes
Mutations et prolifération anormale des plasmocytes
ne peut que produire
Chaîne lourde d'immunoglobuline ou chaîne lourde défectueuse
De grandes quantités dans le sérum ou l'urine
Maladies causées par les chaînes lourdes d'immunoglobulines libres
maladie maligne des plasmocytes
maladie des chaînes légères
Les plasmocytes mutés produisent de grandes quantités de chaînes légères anormales
Dépôts excessifs de chaînes légères dans les reins et autres tissus viscéraux
Provoque des lésions rénales et une amylose
Les types de protéines à chaîne légère sont divisés en type lambda et type k.
La néphrotoxicité de type Lambda est plus forte
Protéinémie M de type K
Rapport de type K/λ dans le sérum
>4:1
Classification
maladie maligne des plasmocytes
Myélome multiple (MM)
Tumeur maligne caractérisée par la prolifération anormale d'une seule lignée de plasmocytes dans la moelle osseuse
tumeurs matures à cellules B
macroglobulinémie primaire
maladie des chaînes lourdes
maladie bénigne des plasmocytes
Igémie monoclonale bénigne primitive
HyperIgémie monoclonale secondaire
manifestations cliniques
Protéinurie de débordement/protéinurie prérénale
= chaîne légère d'immunoglobuline
= protéine B-J urinaire/BJP/semaine protéine/agglutinine/chaîne légère d'immunoglobuline
Hyperplasie des plasmocytes monoclonaux
Immunoglobuline monoclonale (protéine M)
syndrome d'hyperviscosité
Augmentation du taux de sédimentation des érythrocytes
Protéine urinaire
blocage des tubules rénaux
conduisant à une insuffisance rénale
Les plasmocytes envahissent la moelle osseuse
Provoque une destruction de la moelle osseuse, des douleurs osseuses (le plus souvent) ou des fractures
hypercalcémie
Anémie, infection, saignement, dysfonctionnement immunitaire
Parce que les cellules normales de la moelle osseuse ne peuvent pas produire
tests de laboratoire
Détection quantitative des immunoglobulines sériques (protéine M)
protéine M
prolifération monoclonale des plasmocytes
Classe, sous-classe, génotypique et idiotype homogène
Immunoglobuline
Aucune activité d'anticorps
Aucune autre activité immunologique
Plus courant dans
Myélome multiple, hypergammaglobulinémie, lymphome malin, maladie des chaînes lourdes, maladie des chaînes légères
Augmentation de la concentration totale en protéines et augmentation de la protéine M
Les IgG sont les plus courantes
Augmentation des IgA
test de dépistage préliminaire
immunodiffusion unidirectionnelle sur gélose
immunoturbidimétrie
Détection de la protéine de la chaîne légère urinaire
Protéine de la semaine (BJP)
Chaîne légère d'immunoglobuline (protéine M)
Condensine
test de dépistage préliminaire
Méthode de précipitation-dissolution thermique
Sous condition de PH : 4,9 ± 0,1
Chauffer à 40-60℃
la coagulation se produit
Augmenter à 90-100℃
redissoudre
Réduire à 56℃
Resolidifier
Peut être négatif dans le sang
Parce que la protéine de cette semaine a un petit poids moléculaire
Facilement excrété par les reins
Électrophorèse de zone sérique
utiliser
Membrane d'acétate de cellulose et électrophorèse sur agarose
Bande de protéine M
bande protéique étroite et dense
dans la zone r (parfois dans la bêta ou dans une zone)
Les méthodes de sélection préliminaire et de test qualitatif les plus élémentaires et préférées
Impossible de déterminer correctement le type d'immunoglobuline
immunoélectrophorèse
Nous pouvons seulement estimer de quel type d’Ig il s’agit.
Impossible de confirmer
électrophorèse par immunofixation
Test de confirmation de la protéine M
méthode la plus couramment utilisée
Identification qualitative et typage des anticorps monoclonaux
Méthode préférée
Identification des types de chaînes légères de protéines M
méthode la plus couramment utilisée
sous-thème
maladie auto-immune
concept de base
Tolérance immunitaire
à ses propres tissus et composants cellulaires
Aucune réponse immunitaire
générer une réponse immunitaire minimale
A un effet immunostabilisant
Des traces d'autoanticorps et de lymphocytes sensibilisés peuvent exister dans le sérum humain normal
auto-immune
La tolérance immunitaire est perturbée
Générer une réponse immunitaire aux composants du soi
La présence d'autoanticorps ou de lymphocytes T sensibilisés
maladie auto-immune
Les autoanticorps ou les lymphocytes T sensibilisés peuvent produire des réponses immunitaires avec les auto-composants correspondants
Dommages aux tissus et aux organes ou provoquer un dysfonctionnement dû à la réponse immunitaire
Classification
maladies auto-immunes spécifiques à un organe
limité à un certain organe ou tissu
Thyroïdite chronique, thyroïdite de Hashimoto
Maladie d'Addison (insuffisance surrénalienne chronique primaire)
Myasthénie grave, gastrite atrophique
Purpura thrombocytopénique idiopathique, anémie hémolytique auto-immune
Plaquettes spécifiques et globules rouges
maladies auto-immunes non spécifiques à un organe
Un groupe de maladies qui envahissent plusieurs tissus, organes ou systèmes
Lupus érythémateux systémique (LED), polyarthrite rhumatoïde (PR), maladie de Sjögren (SS)
Caractéristique commune
La plupart des causes sont inconnues
Plusieurs fois sans incitation
spontanéité
Idiopathique
Surtout des femmes
Plus de femmes que d'hommes
Plus de personnes âgées que de jeunes
génétiquement prédisposé
Lymphocytes T sensibilisés avec auto-anticorps ou cellules tissulaires autologues
Les maladies peuvent se chevaucher
incurable
Alternance de crises et de rémissions
autoantigène
Libération d'antigènes cryptiques
Sperme, contenu des yeux, cerveau, etc.
Ceux qui n’ont pas été en contact avec le système immunitaire, le système immunitaire ne le sait pas
Ophtalmie sympathique
Un globe oculaire blessé, le contenu libéré
Le corps attaquera également l’autre œil sain
changements dans sa propre composition
IgG dénaturées
Stimule l'organisme à produire des anticorps IgG anti-dénaturés (facteur rhumatoïde RF)
polyarthrite rhumatoïde
Réactivité croisée causée par des antigènes courants
rhumatisme articulaire aigu
Protéine M dans les streptocoques hémolytiques du groupe A
Identiques aux antigènes des membranes basales endocardiques, articulaires et glomérulaires
provoquer une réaction croisée
glomérulonéphrite aiguë
rhumatisme articulaire aigu
Maladies auto-immunes courantes
Réaction d'hypersensibilité de type I
II réaction d'hypersensibilité
myasthénie grave
autoantigène
récepteur de l'acétylcholine
mécanisme
Les autoanticorps se lient aux récepteurs de l'acétylcholine au niveau de la jonction neuromusculaire
Intériorisé et dégradé
Provoque une diminution de la réactivité des cellules musculaires à l'acétylcholine libérée par les motoneurones
Provoque une faiblesse des muscles squelettiques
Hyperthyroïdie (maladie de Basedow)
autoantigène
Récepteur de l'hormone stimulant la thyroïde (TSHR)
Anticorps contre les récepteurs TSH
mécanisme
goitre toxique diffus
Réaction d'hypersensibilité de type III
Lupus érythémateux systémique (LED)
autoantigène
antigène nucléaire
Acides nucléiques, nucléoprotéines, histones
autoanticorps
anticorps antinucléaires (ANA)
mécanisme
Les complexes immunitaires se déposent dans
Tissu conjonctif cardiovasculaire, membrane basale glomérulaire, séreuse, synoviale articulaire et parois des petits vaisseaux sanguins des organes
activer le complément
Attirer l’infiltration des neutrophiles
Caractéristiques
Plus fréquent chez les jeunes femmes
Multi-organes cumulatifs, multi-systèmes
affronter
Érythème du papillon
peau
érythème annulaire
Photosensibilité, fièvre, éruption cutanée
Lésions rénales (glomérulonéphrite), maladies cardiovasculaires
anémie, symptômes psychiatriques
Arthralgie, sérite
complément
période active
en raison d'une suractivation
baisses de niveau
Après stabilisation
réactivité accrue
autoanticorps
anticorps antinucléaires (ANA)
La plupart des maladies auto-immunes sont positives
Principalement trouvé dans le LED non traité
Principalement de type IgG
Non spécifique à un organe ou à une espèce
Réagit avec les noyaux cellulaires de tous les animaux
Classification
anticorps anti-ADN
anticorps anti-histones
Anticorps anti-non-histones
anticorps anti-nucléolaires
Détection
immunofluorescence indirecte
anticorps anti-ADNdb
Anticorps anti-ADN double brin
Appartient aux anticorps antinucléaires (ANA)
Anticorps spécifiques et caractéristiques
Apparition fréquente pendant les périodes actives
méthode
Trypanosoma equi ou Greenfly
matrice d'antigène
immunofluorescence indirecte
La méthode la plus spécifique, la plus sensible et la plus couramment utilisée
anticorps anti-Sm
auto-anticorps signature
Polyarthrite rhumatoïde (PR)
autoanticorps
taper
Facteur rhumatoïde (RF)
Segment IgG Fc dénaturé
autoanticorps pour cibler les antigènes
Principalement de type IgM
IgA, IgG, IgE
Un résultat négatif n’exclut pas la PR
Anticorps antikératine (AKA)
signes de pronostic
titre élevé
La condition est plus grave
Anticorps citrullinés anticycliques (anticorps anti-CCP)
Très spécifique
Un diagnostic précoce peut donner lieu à des résultats positifs
Méthode de détection RF
Test d'agglutination des particules de latex
méthode indirecte
Peut uniquement vérifier les IgM
ELISA
RF pour différents types d'Ig
L'IgG de lapin est utilisée comme antigène enduit sur le support en phase solide
Combiné avec l'échantillon à tester
Ajouter respectivement des IgG, IgM, IgA et IgE anti-humaines marquées par des enzymes
RF comme antigène de pont
Syndrome de Gougerot-Sjögren (SS)
aussi connu sous le nom
le syndrome de Sjogren
fonctionnalité
Dysfonctionnement des glandes sécrétoires
Sécheresse de la peau et des muqueuses
Les glandes lacrymales et salivaires sont les plus souvent touchées
Yeux et bouche secs
divisée en
primaire
Tissus cumulatifs autres que les glandes exocrines
Secondaire
Anticorps drapeau
anticorps anti-SSA/Ro
anticorps anti-SSB/La
Polymyosite (PM) et dermatomyosite (DM)
polymyosite
Dommages musculaires principalement
Dermatomyosite
Dommages musculaires et dommages cutanés
Anticorps drapeau
Jo-1
J'ai frappé ma peau avec mes pieds.
PM-1
Sclérodermie (Scl)
Maladie systémique
Sclérose systémique progressive (PSS)
Performance
La peau devient plus ferme et plus dure
Anticorps drapeau
anticorps anti-Scl-70
Soyez dur avec votre femme (7)
Méthode de détection des anticorps antinucléaires totaux sériques (ANA totaux)
Test d'immunofluorescence indirecte (IIF)
antigène
Cellules HEp2
Cellules cancéreuses de la tête humaine, riches en composants nucléaires
Réagit avec le sérum testé
Ajoutez ensuite des IgG anti-humaines marquées au FITC (anticorps secondaire)
Le plus efficace
Modèles de fluorescence et signification clinique
Type homogène
Haute puissance
Observé dans le lupus érythémateux disséminé (LED)
Type de membrane périphérique/nucléaire
Haute puissance
Uniquement vu en SLE
Surtout pendant la période active SEL
Activité rapide de la maladie
Le plus commun
type tacheté
Maladie mixte du tissu conjonctif (MCTD)
spots mixtes
type nucléolaire
Sclérodermie (SCL)
Des gens au cœur dur
Réaction d'hypersensibilité de type IV
Réponse des lymphocytes T aux auto-antigènes
Médiation par les lymphocytes T autoréactifs
diabète de type 1
La présence de cellules T autoréactives chez les patients
CD8 CTL
Cellules Th1
Tests d'auto-anticorps courants
Profil d'anticorps anti-ENA
ENA
Nom général des antigènes zygogènes extractibles
Disponible en solution saline ou tampon phosphate
extrayez-le
ANA ne peut pas
Anticorps ENA
Principalement des IgG
Méthode de détection
immunoblot
signification clinique
N'inclut pas l'ADN anti-double brin (anticorps anti-ADNdb)
Parce qu'il appartient à ANA
Détection d'autres autoanticorps
Anticorps cytoplasmiques antineutrophiles (ANCA)
Vascularite
Antigène cible des anticorps périnucléaires (pANCA)
Myéloperoxydase (MPO)
Spécifique aux myéloïdes
Donc autour du noyau
Antigène cible des anticorps cytoplasmiques (cANCA)
Protéase-3 (PR3)
Anticorps antimitochondriaux (AMA)
Cirrhose biliaire primitive (CBP)
Anticorps antiphospholipidique (APLA)
Comprend les anticorps anticardiolipine (ACLA)
État hypercoagulable du sang
thrombose
ACLA
Les femmes atteintes de LED sont plus susceptibles de développer des caillots sanguins
Les fausses couches sont susceptibles de se produire pendant la grossesse
Anticorps anti-muscles lisses (ASMA)
Hépatite auto-immune (HAI)
Test d'immunofluorescence indirecte (IIF)
comme substrat
Cellules hépatiques de singe
Tissu rénal, gastrique ou hépatique de rat
Anticorps antithyroglobuline (ATGA)
Thyroïdite de Hashimoto (HT)
Anticorps anti-cellules pariétales (PCA), anticorps anti-facteur intrinsèque
gastrite atrophique
anémie pernicieuse
maladie d'hypersensibilité
réaction d'hypersensibilité
allergie
Après une première réponse à la sensibilisation
réponds à nouveau
dysfonctionnement physiologique
perte de cellules tissulaires
Réponse immunitaire anormale
défense immunitaire
trop haut
Réaction d'hypersensibilité de type I
Médiation par les anticorps IgE
Cytotropisme
se lie aux mastocytes
Hypersensibilité/anaphylaxie immédiate
quelques minutes
principe
Production d'IgE spécifiques à l'allergène après une réponse primaire
Se lie aux récepteurs IgE Fc des mastocytes
sensibilisation
Dégranulation des mastocytes sensibilisés lors d'une nouvelle réponse
Libérer des médiateurs bioactifs
Histamine, leucotriènes
cause
spasme des muscles lisses
Principalement causé par les leucotriènes
Principales substances provoquant l'asthme bronchique
Perméabilité accrue des petits vaisseaux sanguins
Augmentation de la sécrétion des glandes muqueuses
Terminaisons nerveuses sensibles
activation des éosinophiles
Les principaux composants impliqués dans la réaction
allergènes
certains médicaments
pénicilline
allergènes inhalés
pollen, acariens
allergènes alimentaires
lait, crevettes
Nécessite la participation du facteur d’activation plaquettaire
Anticorps
Anticorps IgE
Des sous-classes d'IgG peuvent également apparaître
IgG4
Parce que cela n'active pas le complément
Hypersensibilité de type I sans atteinte du complément
cellules participantes
Mastocytes
éosinophiles
infection parasitaire
Peut être augmenté
basophiles
Symptômes cliniques
formule
Type I à apparition rapide, I milliard acido-basique, asthme de choc de type I et allergies
Milliard:E:IgE
Systémique
choc anaphylactique
Causée par un médicament ou une injection de sérum hétérogène
Tels que l'antitoxine tétanique, l'antitoxine diphtérique
choc anaphylactique à la pénicilline
la tension artérielle chute
Causée par des substances vasoactives
télangiectasie
infection parasitaire
localité
réaction allergique respiratoire
Rhinite allergique et asthme allergique
Réaction allergique gastro-intestinale
gastro-entérite allergique
réaction cutanée allergique
Urticaire, eczéma, angio-œdème
Provoquer des dommages fonctionnels aux organes effecteurs
mais pas de dommages pathologiques substantiels
provoquant des réactions d'hypersensibilité de type I
IL3/IL5, IL4
Méthode de test
Test de spécificité
Test intradermique d'allergène
Cueillette, grattage, injection intradermique
injection intradermique
Test cutané tel que la pénicilline
contrôle positif
Chlorhydrate d'histamine
faux positif
Un grand nombre de médicaments hormonaux
faux négatif
Effets des antihistaminiques
processus
Une seringue injecte l'extrait d'allergène dans la peau
L'antigène doit être dilué de manière appropriée
Volume injecté
0,01-0,02 ml
site d'injection
avant-bras intérieur
Ne peut pas saigner ou injecter par voie sous-cutanée
plusieurs allergènes simultanément
espacement
2,5-5,0 cm
Très suspect et sensible
5,0 cm
20-30 minutes pour observer les résultats
Rougissement (prick-test)
Papules (test intradermique)
Détection des IgE spécifiques (sigE)
Test d'adsorption des radioallergènes (RAST)
processus
Adsorber les allergènes purifiés sur des supports solides
Ajouter le sérum à tester
Introduire un anticorps anti-IgE radiomarqué (anticorps secondaire)
Détection quantitative de niveaux d'IgE spécifiques dans le sérum
Comme l'allergie au sérum
Injection d'antitoxine tétanique requise
Petites et multiples injections
Réaction d'hypersensibilité de type II
Cytotoxique ou cytolytique
Poison de type II, 23mygod
Les antigènes de surface des cellules cibles se lient aux antigènes de classe IgG ou IgM
Avec la participation du complément, des macrophages et des cellules NK
Les ingrédients principaux
Anticorps
IgG ou IgM
Implication complémentaire
dissolution
cellules participantes
Macrophages
Opsonophagocytose
Cellules NK
Effet ADCC
maladie clinique
formule
Hyperthyroïdie, force musculaire, chaleur et hémorragie
réaction transfusionnelle
maladie hémolytique du nouveau-né
Rh pour la femme enceinte (-), Rh pour le premier enfant ( )
Prévenir l'hémolyse fœtale lors d'une autre grossesse
Dans les 72 heures après la livraison
Injection d'anticorps anti-Rh
Peu importe la vitesse
Maladie hémolytique auto-immune (AIHA)
Cytopénie allergique aux médicaments
Purpura thrombocytopénique idiopathique (PTI)
Syndrome de néphrite hémorragique pulmonaire (syndrome de Goodpasture)
Hyperthyroïdie
(Maladie de Graves)
myasthénie grave
(MG)
rhumatisme articulaire aigu
(ARF)
Détection
Test d'anticorps anti-cellules sanguines
Peut être causé par l'antigène ABO
Alors voici tout sur le sang
signification clinique
Aide au diagnostic de l'anémie hémolytique auto-immune
anticorps anti-Rh
Aide à lutter contre la maladie hémolytique chez les nouveau-nés causée par une incompatibilité du groupe sanguin Rh
Streptolysine O (ASO)
Protéine M de la paroi cellulaire streptococcique
Compatible avec le cœur et le glomérule
Par conséquent, ceux-ci seront combinés pour causer des dégâts.
Maladies liées au streptocoque
pharyngite
amygdalite
otite moyenne
scarlatine
glomérulonéphrite aiguë
rhumatisme articulaire aigu
Réaction d'hypersensibilité de type III
complexe immunitaire
Complexe immun soluble de taille moyenne (IC : IgG, IgM)
Déposé dans la membrane basale capillaire localement ou à plusieurs endroits dans tout le corps
activer le complément
Le complément endommage les parois des vaisseaux sanguins
Et puis induire la participation des plaquettes, des basophiles et des neutrophiles
Congestion, œdème, nécrose locale
Infiltration de neutrophiles
La principale caractéristique de la réaction inflammatoire
méthode de mémoire
Composé de type III, 23mygod, troisième séance plénière
Les ingrédients principaux
Anticorps
IgG, IgM
cellules participantes
neutrophiles
La cause la plus puissante de lésions tissulaires
basophiles
Mastocytes
plaquettes
Complexe immunitaire (IC), complexe immunitaire circulant (CIC)
Complexe immun antigène-anticorps soluble de taille moyenne
maladie
maladie du complexe immunitaire local
Réaction d'Arthus/Réaction d'Arthur
Réaction allergique locale expérimentale
Injections sous-cutanées multiples de sérum de cheval chez des lapins
Après 4 à 6 injections
Œdème local, hémorragie et nécrose
Réaction à la Arthus
insuline
Par conséquent, lors de l’injection d’insuline, vous devez l’injecter là où se trouve le patient.
vaccin
injection d'antisérum
maladie systémique du complexe immunitaire
formule
Fenglang rein rafraîchissant A
A : Réaction à la manière d’Arthus
maladie sérique
Le début survient 1 à 2 semaines après l’injection de sérum animal xénogénique
Fièvre, éruption cutanée, lymphadénopathie, gonflement et douleur des articulations et protéinurie transitoire
Choc immédiat
Réaction d'hypersensibilité de type I
Glomérulonéphrite poststreptococcique
Infection à streptocoque hémolytique du groupe A
2-3 semaines
Déposé sur la membrane basale glomérulaire
néphrite à complexes immuns
Polyarthrite rhumatoïde
IgG dénaturées
Autoanticorps anti-IgG = facteur rhumatoïde (RF)
Autoanticorps anti-IgG
Principalement des anticorps IgM
Se produit dans les petites articulations
polyarthrite rhumatoïde
Se produit dans les grosses articulations
le lupus érythémateux disséminé
Complexes d'ADN et d'anticorps anti-ADN
membrane basale des vaisseaux sanguins déposés dans les reins, les articulations et d'autres parties du corps
Provoque une glomérulonéphrite, de l'arthrite et d'autres lésions de plusieurs organes
Détection
Détection dans l'organisation
immunohistochimie
Détection des complexes immuns (CIC)
(CIC)
Classification
Méthodes spécifiques à l'antigène
méthodes non spécifiques à l'antigène
Souvent utilisé en clinique
Réaction d'hypersensibilité de type IV
Hypersensibilité de type retardée (DTH)
Cellules T effectrices (CD4 Th1) (CD8 CTL)
Après liaison à un antigène spécifique
Une réponse inflammatoire caractérisée par une infiltration de macrophages mononucléaires et des lésions tissulaires.
Les ingrédients principaux
antigène
parasites intracellulaires
Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Salmonella typhi
C'est tellement triste de ne pas se marier
Virus, parasites
Matériau chimique
Colorants, peintures, pesticides, cosmétiques
médicament
pénicilline
Une hypersensibilité de type I peut également survenir
cellules cibles
cellules hébergeant Mycobacterium tuberculosis
Cellules ou organes transplantés
cellules tumorales
protéine à laquelle l'haptène est attaché
cellules participantes
Cellules T effectrices
CD4
Th1
CD8
CTL
Macrophages mononucléaires
maladie
réaction d'hypersensibilité infectieuse retardée
Infection par des agents pathogènes parasitaires intracellulaires
Mycobacterium tuberculosis
tuberculose cavitaire
Virus
protozoaire
dermatite de contact
Exposition à des substances haptènes à petites molécules
rejet de greffe
réaction de l'hôte contre le greffon
HVGR
réaction du greffon contre l'hôte
GHR
Détection
Principe du test cutané
Injection intradermique, patch cutané
24-48h
Rougeur locale, gonflement, induration, cloques, etc.
But
Détection des réactions d'hypersensibilité de type IV
État de la fonction immunitaire cellulaire
Test tuberculinique (OT)
méthode
4 à 8 semaines après l'infection
peut apparaître
Tuberculine ancienne (OT) ou dérivé protéique purifié (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
48-72h d'observation
rougeur, gonflement ou dureté
>5mm
Positif
Jugement des résultats
<5mm
Négatif
Cela ne signifie pas que le patient est infecté par la tuberculose
Parce que Mycobacterium tuberculosis apparaît tardivement
5-9/10-19mm
Positif
Avoir été infecté par Mycobacterium tuberculosis ou vacciné par Bacillus Calmette-Guérin (BCG)
≥20 mm ou cloques ou nécrose
Fort positif
Risque élevé de contracter la tuberculose
But
Choisissez les receveurs du vaccin BCG
Éliminer une infection tuberculeuse
Comprendre le fonctionnement de l'immunité cellulaire
test cutané
Gaze imbibée d'une solution allergène et placée à l'intérieur de l'avant-bras ou du dos
Couvrir de cellophane ou de papier ciré
24-72h
rougeur, gonflement, cloques
Différence de test cutané
pneumonie infiltrante
Ombre inégale des poumons
Fièvre, toux, sang dans les crachats
diagnostic
Culture de bacilles acido-résistants dans les crachats
Diagnostiquer la tuberculose
Résumer
formule
Type I à action immédiate, poison de type II, complexe de type III, IV à action retardée
Anticorps et cellules
100 millions d'engrais acido-basiques, 23mygod, la troisième session plénière du Comité central du PCC, cellules 4T
maladie
Tapez I
Choc Asthme et Allergies
Type II
Hyperthyroïdie, force musculaire, chaleur et hémorragie
Type III
Rein de Fenglang rafraîchissant
Type IV
Dermatite de contact tuberculeuse de transplantation
Maladies infectieuses
infection bactérienne
infection streptococcique
Streptocoques à Gram positif
Streptocoque pyogène
Streptocoque bêta-hémolytique du groupe A
Méthode de test
test d'agglutination au latex
immunoturbidimétrie
Marqueurs immunologiques couramment utilisés
Antistreptolysine "O"
ASS
augmenter la hauteur
Pharyngite aiguë et autres infections des voies respiratoires supérieures
rhumatisme articulaire aigu
Réaction d'hypersensibilité de type III
myocardite rhumatismale
polyarthrite rhumatoïde
péricardite
glomérulonéphrite aiguë
Salmonella typhi
Symptômes cliniques
gastro-entérite auto-guérison
Fièvre typhoïde mortelle (fièvre entérique)
Méthode de test
réponse hypertrophique
Si gros, si triste
Dosage immuno-enzymatique
ELISA
Mycobacterium tuberculosis
tuberculose
Méthode de test
test à la tuberculine
Tuberculine ancienne (OT)
Dérivé protéique purifié de tuberculine (PPD)
Symboles de l'activité tuberculeuse
anticorps anti-PPD
Positif
infection virale
virus de la grippe
structure
Hémagglutinine (HA)
Neuraminidase (NA)
méthode
Test d'inhibition de l'hémagglutination
principe
La suspension virale est mélangée au sérum (anticorps) à tester
Avoir des anticorps correspondants
Peut inhiber la liaison de l'hémagglutinine à la surface du virus aux globules rouges
Si vous ajoutez des globules rouges, ils ne se combineront plus.
Pas d'agglutination
Positif
virus Coxsackie
Peut infecter le corps et stimuler le système immunitaire du corps
Attaque les cellules bêta pancréatiques
provoquer le diabète
Hépatite A
Méthode de détection
Technologie ELISA et chimiluminescence
Détection du VHA-IgM et IgG
IgM
Diagnostiquer l’infection actuelle
infection précoce
IgG
Stade avancé de l'infection
infection passée
Hépatite B
AgHBs (antigène de surface)
est apparu plus tôt
HBsAb (anticorps anti-HBs)
anticorps protecteurs
AgHBe (antigène e)
Indique que le VHB se réplique activement in vivo
Très contagieux
HBeAb (anticorps anti-HBe)
Capacité de réplication réduite
Contagiosité réduite
AgHBc (antigène central)
Le VHB est présent et se réplique activement
indicateur direct
Difficile à détecter
HBcAb (anti-HBc)
IgM
Phase aiguë de l’hépatite B et infection précoce
IgG
infection passée
ADNHVB
le plus sensible
le plus direct
hépatite chronique active
manifestations cliniques
avez des antécédents d’hépatite chronique
IgM HBc positives
fonction hépatique anormale
gène de dommage
lésion extrahépatique
Causé par le dépôt de complexes immuns
mécanisme de destruction
Les cellules CD8 provoquent la lyse cellulaire en reconnaissant l'HBcAg et le HLA-I exprimés sur la membrane des cellules hépatiques
Demandez un double sérum
But
Observez si le titre d'anticorps pendant la période de récupération est supérieur à celui de la phase initiale
infection congénitale
Infections reçues par le fœtus dans le corps de la mère
collectivement appelé TORCH
4 éléments d'eugénisme et d'éducation
Toxoplasma gondii (TOX)
Virus de la rubéole (RUV)
Cytomégalovirus (HCMV)
Virus de l'herpès simplex (HSV)
Symptômes cliniques
avortement
déformation
Retard mental, déficience auditive
infection parasitaire
Infection à Schistosome
réaction de précipitation des œufs en anneau
Réaction antigène-anticorps
Sécrétion de miracidies matures dans les œufs (autour des œufs)
Se lie aux anticorps présents dans le sérum humain
Formation de précipités spécifiques en forme de bulle, de doigt ou de bande avec des propriétés réfractives évidentes
Positif
polyéthylène glycol
technologie des hybridomes
agent de fusion
turbidité immunitaire
Agent augmentant la turbidité
Purification des antigènes
méthode de précipitation des polymères