Вход
Войти

Галерея диаграмм связей Природная медицинская химия Сахаров и гликозидов определение структуры, экстракция и выделение

Природная медицинская химия Сахаров и гликозидов определение структуры, экстракция и выделение

Это интеллектуальная карта о природной медицинской химии, включая определение чистоты моносахаридов и олигосахаридов, определение структуры сахарных цепей, экстракцию и разделение сахаров и т. д.

Отредактировано в 2024-01-16 20:31:36

ArteVeloce

Недавние работы Смотреть другие работы>>

Природная медицинская химия Сахаров и гликозидов определение структуры, экстракция и выделение

ArteVeloce

Недавние работы Смотреть другие работы>>

Рекомендовано вам
Структура

Стереохимия флавоноидов, биологическая активность
- 2
WSysQn6v
Физические и химические свойства алкалоидов, экстракция и разделение, структурная идентификация.
- 2
ArteVeloce
Алкалоиды – обзор и классификация
- 2
ArteVeloce
Природная медицинская химия тритерпены и их гликозиды.
- 2
ArteVeloce
Природная медицинская химия Терпены и летучие масла
- 1
ArteVeloce
Спектральные характеристики флавоноидов
- 3
ArteVeloce
Обзор флавоноидных соединений, физические и химические свойства, цветная реакция, экстракция и разделение, хроматографическое разделение.
- 3
ArteVeloce
Природная медицинская химия Хиноны
- 3
ArteVeloce
Природная лекарственная химия Фенилпропаноиды
- 2
ArteVeloce
Природная медицинская химия Спектрально-резонансные свойства сахаров
- 1
ArteVeloce

сахара и гликозиды

Определение чистоты моносахаридов и олигосахаридов

ПК (бумажная хроматография)

Система расширения: обычно используемые водонасыщенные органические растворители.

Проявитель цвета: фталевая кислота анилин (придает редуцирующему сахару коричневый и черный цвет)

ТСХ (тонкослойная хроматография)

(0,03 М раствор неорганической соли борной кислоты) силикагель → изготовление пластин

ГХ (газовая хроматография)

Получение сахара в виде триметилсилилового эфира: повышение его летучести

альдоза

Восстановление NaBH4 до полиола (избегает образования аномеров)

Превращается в ацетил или трифторацетил.

ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография)

Упаковочный материал: химически модифицированный силикагель, например, колонка -NH2.

Подходит для анализа термолабильных, нелетучих олигосахаридов и полисахаридов.

ИЭК (ионообменная хроматография)

Комплексы борной кислоты с сахарами: пригодны для ионообменной хроматографии.

Не нужно делать производные

Прямое разделение водным раствором

Определение строения сахарных цепей

Процесс: Чистота - MW - Состав моносахаридов - Определение абсолютной конфигурации моносахаридов - Определение положений соединения между моносахаридами - Определение последовательности соединения сахарных цепей - Определение конфигурации гликозидных связей и кислородного кольца

Определение чистоты полисахаридов

ультрацентрифугирование

Высоковольтный электрофорез (HPCE)

Гель-хроматография: колонка h:d > 40

Поляриметрия: разные концентрации этанола↓, сравнение

Другое: метод молярного соотношения функциональных групп, RI, метод ВЭЖХ и т. д.

Определение молекулярной массы

традиционный метод

Седиментационный метод, метод светорассеяния, метод вискозиметрии, метод осмотического давления, метод ультрафильтрации, метод ультрацентрифугирования.

гель-колоночная хроматография

РС

ESI-MS: однозарядные или многозарядные протоны

MALDI-TOF-MS: в основном однозарядные протоны.

Определение моносахаридного состава (общий гидролиз)

ПК

Определение развития окраски: тип моносахарида

TLCS: примерно количественный

ГК

Раствор CH3OH → ТМС

Используйте маннит или мио-инозитол в качестве внутреннего стандарта и известные моносахариды в качестве стандарта.

ВЭЖХ

Дополнительный детектор показателя преломления для определения абсолютной конфигурации моносахаридов.

Определение абсолютной конфигурации моносахаридов

Принципы разделения энантиомеров

Дериватизация, введение новых хиральных центров → диастереомеры

Хроматографические колонки хиральные.

метод

ГК

Процесс: моносахаридный хиральный реагент → диастереомерный → ТМС.

Метод: D, L-моносахарид реагирует с одной конфигурацией хирального реагента (L-); 1 моносахарид реагирует с 2 хиральными реагентами (D, L-);

ВЭЖХ

Хиральный реагент: (S)-(-)-1-фенилэтиламин.

Меньший расход образца, чувствительность не такая высокая, как у ГХ;

Хиральная хроматография: дорого

Оптический детектор вращения: дорогой прибор

Метод сравнения оптического вращения: большой объем образца

Определение положений соединения между моносахаридами

Полисахарид: перметилирование → гидролиз → GC качественный и количественный

гидролиз

Сначала гидролизуйте 90% HCOOH, затем 0,05 М H2SO4 или CF3COOH.

Раствор CH3OH: иногда он вызывает метилирование места соединения сахара, поэтому используйте его экономно!

Олигосахариды

1H-ЯМР: перацетилирование → 2D-ЯМР

Определение 13C-ЯМР: сдвиг гликозилирования

Определение последовательности соединения сахарных цепей

мягкий гидролиз

Гидролиз полисахаридных цепей на более мелкие фрагменты и последующий анализ порядка соединения этих олигосахаридов.

метод ЯМР

13С-ЯМР: время релаксации Т1.

2D-ЯМР

Масс-спектрометрии

ФАБ-МС

Экстракция и сепарация сахара

Экстракция гликозидов

гликозиды, убивающие ферменты

Соберите свежие материалы

Быстрое нагревание и сушка; хранение в замороженном виде; часто добавляют карбонат кальция, чтобы предотвратить разрушение ферментов во время экстракции.

Растворительный метод: вода; разбавленный спирт (моносахариды, олигосахариды, полисахариды).

Методы разделения и очистки сахаристых соединений.

изысканный

удаление белка

Метод Севага: водный раствор полисахарида пентанола (бутанола) CHCl3 5:1:25 → энергично встряхивать в течение 20 минут → центрифугировать для удаления денатурированных белков между двумя фазами. Метод с трифтортрихлорэтаном: водный раствор полисахарида CF3-CCl3 1:1 → Перемешать в течение 10 минут → Центрифугировать и дважды собрать слой воды. Метод с трихлоруксусной кислотой: добавьте по каплям 3,13 COOH к водному раствору полисахарида → пока он не перестанет мутнеть → в течение ночи при 5–10°C → центрифугируйте для удаления осадка. Ферментативный гидролиз: водный раствор полисахаридов пепсин, трипсин, папаин, проназа и др.

Разделение кислых полисахаридов: метод осаждения гидроксидом четвертичного аммония.

Особенности: Эмульгатор, может образовывать осадок с кислыми полисахаридами: повышать pH раствора или содержать бурный буфер (повышенная кислотность). Обычно используемые соли четвертичного аммония: CTAB/CP-OH. Операция: 1~10% CTAB или CP-OH, при перемешивании добавляют по каплям к 0,1~1% раствору полисахарида (pH<9, без буры), контролируйте концентрацию четвертичной аммониевой соли для разделения различных кислых полисахаридов;

Разделение полисахаридов различной полярности: метод фракционного осаждения или постепенного растворения.

Раствор сахара, постепенно добавляйте этанол (ацетон) → каждую часть ↓

Полисахариды обычно осуществляются при pH=7. Кислые полисахариды перерабатываются при pH=2~4. Чтобы предотвратить кислотный гидролиз гликозидных связей, операцию следует проводить быстро.

Превращается в продукты этерификации и ацетилирования, растворимые в спирте.

Пошагово Малый полярный растворитель (диэтиловый эфир)→↓

хроматографическое разделение

Колоночная хроматография с активированным углем (неполярная)

Последовательность элюирования: вода → органический растворитель (EtOH): H2O → 10% → 20% → 30% → 50% → 70% EtOH, Первыми выходят наиболее водорастворимые: неорганические соли → моносахариды → дисахариды → трисахариды → полисахариды.

целлюлозная хроматография

Ионообменная колоночная хроматография

По мере увеличения кислотных групп в молекулах полисахаридов сила адсорбции увеличивается; для линейных молекул легче адсорбироваться с прямыми цепями;

гель-колоночная хроматография

Порядок выхода из колонки таков: сначала из колонки выходят крупные молекулы, а позже - мелкие.

препаративный зональный электрофорез

Верхний конец является положительным электродом, а нижний конец — отрицательным электродом.