基本構造単位：アミノ酸

サンプルを加熱し、濃硫酸とタンパク質を分解する触媒で消化します。その際、炭素と水素が二酸化炭素に酸化され、水が逃げます。一方、サンプル中の有機窒素はアンモニアに変換され、硫酸と結合して生成します。硫酸アンモニウム。次に、蒸留用のアルカリを加えてアンモニアを蒸発させ、ホウ酸で吸収し、標準酸で滴定します。標準酸の消費量に基づいてサンプル中のタンパク質含有量を計算できます。

消化：サンプルの前処理後、濃硫酸、硫酸カリウム（沸点を上げる）、硫酸銅（触媒、終点指示薬）を添加します。

蒸留吸収：アルカリ（NaOH、400g/L）を加え、アンモニアを蒸留し、ホウ酸（20g/L）で吸収

滴定：0.05mol/L標準酸または硫酸（溶液が青色から赤色に変化します）

データ処理（粗タンパク質）

その結果得られるのが粗タンパク質です

F値に合わせて

過剰なアンモニアを防ぐために過剰な硫酸を使用する必要があります

2 部の尿素が 180°C で凝縮されてビウレットとなり、アルカリ環境下で硫酸銅と反応して赤紫の錯体を形成します。

標準タンパク質溶液

Coomassie G-520 はタンパク質に結合して、595nm に最大吸収ピークを持つ着色複合体を形成します。

標準液：牛血清アルブミン標準液

アミノ酸には酸性の-COOHと塩基性の-NH2が含まれており、これらが相互作用してアミノ酸は中性内部塩になりますが、ホルムアルデヒドを加えると-NH2がホルムアルデヒドと結合してアルカリ性がなくなり、-COOH基が酸性を示すようになります。標準溶液の滴定を使用します。

アミノ酸の両性効果により、ホルムアルデヒドを添加してアミノ基のアルカリ性を固定し、カルボキシル基を酸性化します。酸度計のガラス電極とカロメル電極を同時に測定液中に挿入して形成します。 NaOH 標準溶液を使用して、酸度計の指示に従って滴定します。pH 値が終点を決定します。

ニンヒドリン→ニンヒドリン水和物→ニンヒドリン水和物→ニンヒドリン水和物→青紫色化合物