Le spectre d'absorption UV change considérablement avec sa série d'ionisation.
Dans les solutions acides, les barbituriques 5,5-disubstitués et 1,5,5-trisubstitués ne s'ionisent pas et ne présentent pas de pics d'absorption UV évidents.
Dans une solution alcaline de pH 10, une ionisation de premier ordre se produit, formant une structure de système conjugué avec un pic d'absorption maximal à une longueur d'onde de 240 nm.
Dans une solution fortement alcaline de pH 13, les barbituriques 5,5-disubstitués subissent une ionisation secondaire, provoquant une prolongation du système conjugué, provoquant un décalage vers le rouge du pic d'absorption à 255 nm.
Les barbituriques 1,5,5-trisubstitués ne subissent pas d'ionisation secondaire en raison de la présence du substituant en position 1, et la longueur d'onde d'absorption maximale est toujours à 240 nm.
Le spectre d'absorption UV des thiobarbituriques est différent
Il a une absorption UV évidente dans les solutions acides ou alcalines.
Dans une solution d'acide chlorhydrique (0,1mol/L), les deux pics d'absorption sont respectivement à 287 nm et 238 nm.
Dans une solution d'hydroxyde de sodium (0,1mol/L), les deux pics d'absorption se déplacent respectivement à 304 nm et 255 nm.
Dans une solution fortement alcaline de pH 13, le pic d'absorption à 255 nm disparaît et seul le pic d'absorption à 304 nm existe.
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