MindMap Gallery 细胞化学染色
细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学,是以细胞形态学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学成分(如酶类、酯类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。
Edited at 2023-10-21 11:36:00细胞化学染色
细胞化学染色概述
定义:细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学,是以细胞形态学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学成分(如酶类、酯类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。
临床应用
辅助判断急性白血病的细胞类型
辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断
观察疾病疗效和预后
探讨发病机制
步骤:①固定②显示③复染
常用的细胞化学染色方法
过氧化物酶染色(POX)
过氧化物酶广泛存在于生物体中,血细胞所含的过氧化物酶主要为髓过氧化物酶,它是人类中性粒细胞含量最多的一种蛋白质。
ICSH推荐方法:二氨基联苯胺法DAB(临床常用方法) 二盐酸联苯胺法、过氧化物酶氨基-甲基卡巴唑染色法
染色反应
粒细胞系:多呈( )
原始粒细胞
分化差(-)
分化好( )
成熟
中性分叶核粒细胞( )或强
嗜酸粒细胞( )且最强
嗜碱粒细胞(-)
单核细胞系:多呈弱阳阳
原始单核细胞(-)
幼稚、成熟单核细胞多呈弱阳性
淋巴细胞系、浆细胞、幼红细胞、巨核细胞(-)
临床意义
辅助诊断急性白血病类型首选、最重要的细胞化学染色方法。
急性粒细胞白血病时,原始粒细胞呈阴性/阳性,多呈阳性
急性淋巴细胞白血病时,原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞均呈阴性,阳性率<3%
急性单核细胞白血病时,原始单核细胞、幼稚单核细胞多数呈阴性或弱阳性
苏丹黑B染色(SBB)
苏丹黑是一种脂溶性重氮染料,能溶解于细胞内的含脂结构(如中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇)中,使脂类物质呈棕黑色或深黑色而显示出来。脂类物质在粒细胞中含量丰富,在单核细胞中也有少量。
临床意义
与POX染色基本相似,不同之处在于
特异性:POX染色高于SBB染色 敏感性:SBB染色高于POX染色
对涂片新鲜度要求不同:SBB染色可用陈旧涂片,POX染色要求涂片新鲜。
酯酶染色
特异性酯酶
氯乙酸AS-D茶酚酯酶(NAS-DCE)
非特异性酯酶(根据pH值不同)
酸性α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)
中性酯酶
a-醋酸茶酚酯酶(a-NAE)
醋酸AS-D蔡酚酯酶(NAS-DAE)
碱性酯酶(a-丁酸蔡酚酯酶;a-NBE)
染色反应
NAS-DCE(粒、特异性)
粒细胞系统
原始粒细胞
分化好( )
分化差(-)
早幼粒细胞( )
成熟粒细胞
中性粒细胞( )
嗜酸性粒细胞( )/(-)
嗜碱性粒细胞( )
其他细胞多(-)
α-NAE(中、非、特)/α-NBE/ANAE
单核细胞系统
原始单核细胞
分化好( )
分化差(-)
幼稚单核细胞、成熟单核细胞( )
阳性反应能被氟化钠抑制
粒细胞系统、淋巴细胞系统、其他系统(-)/( ) 阳性反应不被氟化钠抑制
临床意义
白血病细胞α-NAE染色呈明显的阳性反应,且阳性产物能被氟化钠抑制时,应考虑为急单。
酸性磷酸酶染色(ACP)
多毛细胞( )耐L-酒石酸,阳性不能被L-酒石酸抑制
戈谢细胞( )耐酒石酸 、尼曼匹克细胞(-)
临床意义:诊断多毛细胞白血病、鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞
糖原染色(PAS)又称碘酸-希夫反应
染色反应
粒细胞系统
原始粒细胞
分化好( )
分化差(-)
成熟粒细胞
中性粒细胞( )
嗜酸性粒细胞( )在颗粒间
嗜碱性粒细胞( )在颗粒上
红细胞系:均成(-)
其他系(-)/( )
结果判断:阳性结果为胞质中出血红色颗粒、块状或呈弥漫状红色。
临床意义
红细胞系统
( ):红血病、红白血病、骨髓增生异常综合症、严重缺铁性贫血、严重地中海贫血
(-):巨幼细胞性贫血、再生障碍性贫血、其他溶血性贫血
中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)
NAP主要存在于中性成熟粒细胞,故中性成熟粒细胞呈阳性反应,其他细胞基本呈阴性。阳性反应表现在胞质中出现棕黑色或棕红色颗粒。
阳性率:在油镜下,连续观察100个成熟中性粒细胞,记录其阳性反应细胞所占百分率。阳性率<40%
对所有阳性反应细胞逐个按其反应强度作出( )~( )的分级,将各级所占的百分率乘以级数,然后相加,即为积分值 30-130分
临床意义
1.慢粒↓/0 类白↑2.PNH活性↓ 再障活性↑3.急粒↓ 急单↓ /正常 急淋↑4.细菌感染↑ 病毒感染(-)无变化
NAP积分增加:见于细菌性感染、类白血病反应、再生障碍性贫血、某些骨髓增殖性疾病、慢性粒细胞白血
NAP积分降低:见于慢性粒细胞白血病慢性期、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、骨髓增生异常综合征、恶性组织细胞病等。
铁粒染色
细胞外铁主要存在于骨髓小粒的巨噬细胞中,细胞内铁主要存在于中幼红细胞、晚幼红细胞及红细胞中细胞内铁
细胞外铁
分为I型,II型,III型,IV型及环形铁粒幼红细胞
环形铁粒幼红细胞是指幼红细胞胞质内含铁颗粒≥6粒,并环绕细胞核周排列1/3圈以上
参考区间:细胞外铁( )~( ),细胞内铁阳性率12%~44%,以I型为主,少数为II型,无环形铁粒幼红细胞及铁粒红细胞
临床意义
缺fe贫
外fe 阴
内fe ↓/0
fe粒幼贫
外fe↑
内fe↑出现环铁红
NPS
外fe↑
内fe↑