Wondershare EdrawMind
MindMap Gallery Parasitic mind maps
- 111
Parasitic mind maps
This clear parasiti mind map mainly explains protozoa, ciliates, insect classes, etc., with each content further divided into several levels such as phylum Ciliophora, forming a radial structure that mimics the human brain's neural network, aiding in memory, information organization, and creativity stimulation.
Edited at 2023-05-07 21:15:21
- Recommended to you
- Outline
Paraziti
Trematoda (sesači, metljaji)
Digenea
Echinostomatida
Fasciolidae
Fasciola
Fasciola hepatica (Veliki metljaj)
NASELJUJE: žolčevodi konjev, prežvekovalcev, ljudi RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj zaužije invazivno obliko (METACERKARIJE) skupaj s travo/rastlinami 2. juvenilni sesači perforirajo steno črevesja → trebušna votlina → jetra ali žolčevodi, kjer dozorijo v odrasle 3. rumena jajčeca se z žolčem izločajo v črevesje in z iztrebki v okolje 4. v 9-10 dneh v jajčecu dozori MIRACIDIJ 5. miracidij se aktivno zavrta v polža malega mlakarja (Galba ali Limnea truncatula) - vodno okolje! 6. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA → REDIJA → CERKARIJA 7. cerkarija zaposti polža, odvrže repek, se obda z ovojnico in se nalepi na rastline kot metacerkarija MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžin 2-3cm, širina 1,3sm - oblika akacijevega lista - v sprednjem delu sta ustni in trebušni prisesek - trnji na povrhnjici v sprednjem delu
Fascioloides
Fasciola magna
Paramphistomidae
Paramphistomum
Paramphistomum cervi (Vampov sesač)
NASELJUJE: vamp prežvekovalcev RAZVOJNI KROG: 1. končni g zaužije METACERKARIJE na travi/rastlinah 2. juvenilni sesač v duodenum, nato v vamp, kjer spolno dozorijo 3. prozorna jajčeca z iztrebki v okolje 4. MIRACIDIJ iz jajčeca → okolje → polž (rod Planorbis/Bullinus) 5. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA → REDIJA → CERKARIJA 6. cerkarija zapusti polža, odvrže repek, se obda z ovojnico in nalepi na rastline kot METACERKARIJA MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina 13mm, širina o,5mm - hruškaste oblike - povrhnjica groba brez trnov - 2 priseska v amfistomnem položaju - žrelo ni izoblikovano
Plagiorchida
Dicrocoelium dendriticum (Mali metljaj)
NASELJUJE: žolčevode prežvekovalcev, konjev, medvedov RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj zaužije mravljo (rod Formica/Proformica) z METACERKARIJAMI 2. juvenilni sesači iz črevesja → krvni obtok → jetra (žolčevodi) - tu spolno dozorijo 3. rjavo jajčece v katerem je že oblikovan MIRACIDIJ se izloči z iztrebki (žolč→črevesje→iztrebki) 4. prvi vmesni gostitelj polž (rod Helicera/Zebrina) zaužije jajčece z miracidijem 5. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA (redij ni) → CERKARIJE 6. cerkarije se v polžu povežejo v skupke, jih izloči 7. mravlja zaužije cerkarije, v mravlji: CERKARIJA → METACERKARIJA MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina 7-12mm, širina 2mm - suličaste oblike - prozorne barve
Strigeidida
Schistosomatidae
Schistosoma mansoni
Diplostomatide
Alaria alata
Protozoa
Apicomplexa
Gregarinomorphea
Cryptosporidium parvum
Eucoccidiorida
Eimeriidae
Eimeria
Eimeria tenella
Eimeria maxima
Eimeria necatrix
Isospora
Isospora canis
Isospora suis
Sacrocystiidae
Sacrocystis cruzi
Toxoplasma gondii
Neospora caninum
Piroplasmorida
Theileriidae
Theileria equi
Theileria parva
Babesiidae
Babesia bovis
Babesia canis
Babesia equi
Mastigophora
Diplomonadida
Giardia duodenalis
Trypanosomatida
Trymanosoma
Trypanosoma equiperdum
Leishmania
Leishmania infantum
Leishmania donovani
Trichomonadida
Dientamoebidae
Histomonas meleagridis
Trichomonadidae
Trichomonas Foetus
Ciliophora
Trichostomatorida
Ichthyophtirius multifiliis
Balantidium coli
Arthropoda (členonožci)
Insecta
Diptera
Nematocera
Culicoides
Simulium
Brachycera
Oestrinae
Oestrus bovis
Hypodermatinae
Hypoderma bovis
Gasterophilinae
Gastrophilus interstinalis
Siphonaptera
Ceratophyllidae
Ceratophyllus gallinae
Pulicidae
Echidnophaga gallinacea
Spilopsyllus cuniculi
Ctenocephalides canis
Ctenocephalides felis
Phthiraptera
Anoplura
Haematopinidae
Haematopinus suis
Amblycera
Cyropidae
Gliricooa porcelli
Menoponidae
Ischnocera
Bovicolidae
Bovicola bovis
Philopteridae
Trichodectidae
Trichodectes canis
Felicola subrostratus
Arachnida
Ixodida
Ixodidae
Ixoides ricinus
Mesostigmata
Dermanyssus gallinae
Prostigmata
Demodicidae
Demodex canis
Cheyletidae
Astigmata
Sacroptidae
Sacroptes scabiei
var. canis
var. suis
Psoroptida
Psoroptes communis ovis
Cestoda (trakulje)
Cyclophyllidea
Hymenolepididae
Hymenolepis nana
Davaineidae
Davainea proglottina
NASELJUJE: tanko črevo ptic RAZVOJNI KROG: 1. ptica zaužije invadiranega polža (rod Limax/Agriolimax) s CISTICERKOIDI 2. v tankem črevesju trakulja spolno dozori 3. jajčeca v odrivki z iztrebki v okolje 4. jajčeca zaužijejo polži MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina: 0,5-3mm - majhna glavica (SCOLEX), 4 priseski s trni in ROSTELLUM s trni (80-94) - RECEPTACULUM ROSTELLI (vrečka v katero se lahko skrije rostellum) - 4-6 odrivkov (proglotid) - genitalni atrij PRAVILNO ALTERNIRA (se menja na levo in desno) - v proksimalnih proglotidah najprej viden razvoj moških spolnih organov, v distalnih se razvijejo še ženski in nastane spolno zreli odrivek - gravidni odrivek (zadnji) je zrel, v njem so samo jajčeca (posamezno jajčece povito z ovojnico), meri 1/3 telesa
Mesocestoididae
Mesocestoides lineatus
NASELJUJE: RAZVOJNI KROG: MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI:
Taeniidae
Taenia
Taenia hydatigena
Taenia solium
Taenia saginata
Echinococcus
Echinococcus granulosus
Echinococcus multilocularis
Anoplocephalidae
Anoplocephala
Anoplocephala magna
NASELJUJE: črevesje (redko želodec) ekvidov RAZVOJNI KROG: 1. konj zaužije travo s pršico (družina Oribatidae) s CISTICERKOIDOM 2. v črevesju trakulja spolno dozori 3. jajčeca v proglotidah z iztrebki 4. pršice pojejo jajčeca - v njih dozori cisticerkoid MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina: 60-80cm, širina spolno zrele proglotide: do 2cm - glavica: 4-6mm, 4 priseski - rostellum ni prisoten - kratek vrat - 1 spolni kompleks v proglotidi - okoli 500 testikulov
Anoplocephala perfoliata
NASELJUJE: ileocekalno področje ekvidov RAZVOJNI KROG: isto kot A. magna MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina:8-25cm - na glavi so 4 priseski s 4 PRIVESKI (izrastki pod priseski s katerimi se pritrjuje na sluznico) - rostellum ni prisoten
Monezia
NASELJUJE: tanko črevo prežvekovalcev RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj popase pršico (družina Oribatidae) s cisticerkoidom 2. spolno zrela trakulja izloča odrivke z jajčeci v tanko črevo → z iztrebki v okolje 3. pršica poje jajčeca, v njej se razvije cisticerkoid SKUPNE MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - rostellum ni prisoten - široki odrivki z 2 spolnima kompleksoma - ovarij v obliki venčka obkroža vitelarij (rumenjačne žleze) - okoli 200 testikulov
Funkcija interproglotidnih žlez: pomagajo odstranjevati izločke iz proglotide do vodoravnega ekskretornega kanala, ki se vliva v navpičnega
Monezia benedeni
JAJČECA: kvadratasta, 80qm INTERPROGLOTIDNE ŽLEZE: zgoščene na sprednjem robu proglotide DOLŽINA: 6m ŠIRINA spolno zrelih proglotid: do 2,5cm
Monezia expansa
JAJČECA: trikotna, 65qm INTERPROGLOTIDNE ŽLEZE: raztegnjene po celotni dolžini proglotide DOLŽINA: do 10m ŠIRINA: do 1,5cm
Dilepididae
Diplydium caninum
Pseudophyllidea
Diphyllobothriidae
Diphyllobothrium latum
Nematoda (valjasti črvi)
Secernentea
Oxyurida
Oxyruis equi
Strongylida
Strongyloidea
Syngamidae
Syngamus tracheae
Ancilostomatidae
Bunostomum phlebotomum
Bunostomum trigonocephalus
Ancylostoma caninum
Strongylidae
Strongylus
Strongylus vulgaris
Strongylus edentatus
Strongylus equinus
Strongylinae
Chabertia ovina
Oesophagostomum columbianum
Oesophagostomum venulosum
Oesophagostumum radiatum
Oesophagostomum dentatum
Metastrongyloidea
Angyostrongylidae
Metastrongylidae
Metastrongylus pudendotectus
Metastrongylus apri
Crenosomatidae
Filaroididea
Protostrongylidae
Müllerius
Protostrongylus
Cystocaulus
Neostrongylus
Trichostrongyloidea
Dictyocaulidae
Dictyocaulus
Dictyocaulus viviparis
Dictyocaulus filaria
Dictyocaulus arnfieldi
Trichostrongylidae
Haemonchus
Haemonchus contortus
Ostertagia
Ostertagia ostertagi
Ostertagia circumcinta
Ostertagia trifurcata
Trichostrongylua
Ascaridia
Ascarididae
Ascaridia galli
Heterakis gallinarium
Spirurida
Filariodea
Onchocercidae
Dirofilaria immitis
Spirocercidae
Ascarops strongylina
Physocephalus sexalatus
Adebophora
Enoplida
Trichinella spiralis
Trichinella britovi
Trichinella pseudospiralis
Trichinella nativa
Vzorčenje
Dopis
Lastnik/pošiljatelj
Naslov lastnika/pošiljatelja
Vrsta vzorca
Vrsta živali
Starost živali
Plačnik
Anamneza
Morebitni klinični znaki (driska, bruhanje, hujšanje, kašljanje...), koliko časa trajajo klinični znaki, ali se pojavljajo v določenih presledkih V kakšnih razmerah žival živi Ali je bila nedavno na potovanju Ali je bila zdravljena, kdaj, s katerim zdravilom
Želena parazitološka preiskava
V ambulanti lahko ob pregledu veterinar oceni, katere preiskave bi želel
Iztrebki
Male živali
Vzorec vzamemo z žličko/lopatko/vrečko takoj po defekaciji Prenesemo ga v posodico /pustimo v vrečki
Velike živali
Vzorec vzamemo rektalno, z rokavico Prenesemo v posodo, vrečko, pustimo v rokavici Ne jemljemo iz tal - lahko kontaminiran s prostoživečimi nematodami
Skupinski vzorec
Od vsake živali enako količino vzorca, ga homogeniziramo v večji posodi in od tega prenesemo v manjšo posodo do cca 0.5kg vzorca
Ptice
v kletki ali ob krmišču pustimo list papirja, počakamo nekaj ur, iztrebke skupaj s papirjem v ustrezno vrecko ali posodo
Pošiljanje
svež vzorec pred pošiljanjem hranimo na 4°C
v lab pošljemo ustrezno označene in zapakirane
Količina
Mlade živali
koprološke preiskave
konj, govedo: 5-10g
ovca, koza, prašič: 3-5g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 2-3g
ptice, glodalci, mali plazilci:0,5-1g
Baermann
konj, govedo: ≥10g
ovca, koza, prašič: ≥10g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: ≥5g
ptice, glodalci, mali plazilci: /
Odrasle živali
koprološke preiskave
konj, govedo: 20-30g
ovca, koza, prašič: 10-20g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 3-5g
ptice, glodalci, mali plazilci: 1-2g
Baermann
konj, govedo: 20g
ovca, koza, prašič: 20g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 10g
ptice, glodalci, mali plazilci: /
Kri
polna (periferna) kri
Dlaka, volna, perje
sum na večje zunanje zajedavce (tekuti, uši): dlako odstrižemo čim bližje koži/spremembi
sum na Demodex sp.: ob robu spremembe populimonekaj dlak
posamezne zunenje zajedavce shranimo v plastičnih posodicah/fiksiramo v 70% alkoholu, pošljemo v lab
Nastilj
okoli 0,5g
odvzamemo na več krajih
Organi in mišičnina, vsebina želodca, črevesja
po smrti živali
posamezni deli prebavil ali deli organov s spremembo
mišičnina, maseter, diafragma, sprednja okončina
Manjše živali:pregled celega črevesja
fiksiramo v 10% formalinu ali 70% alkoholu (če pregleda ne opravimo v nekaj dneh)
Ostružek kože (sum na garjavce)
suhi ostružek kože: 1. z ostro žlico/ skalpelom pod kotom 45° močno podrgnemo na meji med spremenjenim in nespremenjenim delom kože 2. drgnemo dokler se koža ne zarosi in malo zakrvavi (poškodba kapilar → segli smo do dermisa - tam so Sarcoptes scabiei) 3. postopek na več kraih ponovimo
z vatiranko obrišemo notranjo stran ušesa
KUNEC: sum na Psoroptes cuniculli
PES, MAČKA: sum na Otodectes cynotis
Urin
jajčeca Capillaria, Dioctophyma
centrifugiramo, razmaz sedimenta
Punktat
sum na lejšmaniozo
vzorec bezgavk z TIAB (tankoigelna aspiracijska biopsija)
Preiskave
Urin
pregled sedimenta (jajčeca Capillaria in Dioctophyma)
urin najprej 5min centrifugiramo na 2000 obratov
Iztrebki
Makroskopski pregled iztrebka
Pregledamo
konsistenco (penasta, vodena, čvrsta, pastozna, kašasta..)
barvo
primesi (sluz, kri)
morebitne odrivke trakulj
odrasle zajedavce ali njihove razvojne oblike
ko opazimo kaj nenavadnega → prenesemo na predmetnico, dodamo kapljico vode/mlečne kisline, pokrijemo s pokrovnico, pregledamo pod mikroskopom
odrivek trakulj: ne dodamo mlečne kisline zaradi velike vsebnosti kalcijevih zrn v parenhimu (v kislini se topijo, mehurčki motijo)
Nativni pregled
če je v iztrebku veliko jajčec (strongilidi, askaridi...) ali oocist pri perutnini, kuncih, psih, mačkah
če je iztrebka malo
pregled brisov (rektalni, kljunske votline, golše...)
POSTOPEK: 2mg iztrebka na predmetnico, dodamo 1-2 kapljici vode, premešamo/dispergiramoiztrebek, pokrovnica, mikroskop
Sedimentacija
določamo prisotnost težkih jajčec - težja od specifične teže vode (1,0): imajo spec. težo okoli 1,3 jajčeca padejo na dnočaše kadar so razpršena v vodi
kvalitativna diagnostična koprološka metoda
Dokazujemo
jajčeca digenih sesačev (Fasciola hepatica, Dicrocoelium dendriticum, Paramphistomum cervi)
Fasciola hepatica Veliki metljaj
jajčece polilecitalnega tipa (vsebuje veliko lecitina, v katerega je potopljena oplojena j. celica) Izrazito rumene barve (zaradi rumenjakovih celic), kronične invazije-lahko bolj rjavkaste jajčece operkulatnega tipa (ima polarno naznačen pokrovček oz operculum) ko zapusti gostitelja v njem še ni izoblikovan miracidij če v sedimentu iščemo izključno velikega metljaja lahko dodamo nekaj kapljic metilenskega modrila (vse razen jejčec se obarva modro, jajčeca ostanejo rumena) dolžina: 130-150qm, širina: 63-90qm
Dicrocoelium dendriticum Mali metljaj
izrazito rjave barve (nedozorelo je rjavo rumeno ali prozorno) asimetrično, slabo opazen pokrovček ko zapusti gostitelja v njem že izoblikovan miracidij z 2 očesnima pegama (senzor za svetlobo) dolžina: 37-45qm, širina; 22-30qm
Paramphistomum sp. Vampov sesač
podobno jajčecu velikega metljaja ampak večje rumenjakove celice, ki so svetlo sive, vlečejo na zeleno, prosojne opazen pokrovček dolžina: 160qm, širina: 90qm
jajčeca ježerilcev (Macracanthorhyncus hirudinaceus)
temno rjavo, ovalno, iz več plasti dolžina: 110qm, širina: 65qm
jajčece Trihuris sp. (Bičeglavec)
rjavo, ovalno-limonaste oblike z dvema poloma dolžina:58-70qm, širina:26-30qm
jajčeca pljučnih črvov prašičev iz družine Metastrongylidae (M. apri, M. pudendotectus)
podolgovate oplike, debela nagubana ovojnica sive barve v njem že izoblikovana ličinka L1 dolžina: 51-63qm, širina: 33-42qm
jajčeca valjastih črvov
večje oociste kokcidijev (prežv, konji) primer: Buxtonella sp. (Migetalkar/ciliata)
Cista ima v notranjosti vidne vakuole za prehranjevanje + temnejše jedro premer: 71-91qm
jajčeca trakulj
POSTOPEK
1. iztrebek razpršimo v čašo napolnjeno z 250-300ml vode skozi mrežico 2. počakamo 30 min da se delci sedimentirajo na dno čaše 3. odlijemo 3/4 vsebine in dolijemo vodo do roba, ponovno počakamo 30 min 4. postopek ponovimo 4-5x, dokler ni supernatant skoraj bister 5. supernatant zavržemo, sediment prelijemo v petrijevko, da je višina 3-4mm 6. pregledamo pod mikroskopom 7. če ne vidimo jasno dna petrijevke počakamo minuto in nato odlijemo še nekaj supernatanta
Flotacijska metoda
ugotavljamo prisotnost lahkih jajčec/oocist - spec. teža manj kot 1,2
uporabljamo nasičene raztopine NaCl, ZnCl2, MgSO4; spec.teža 1,2-1,3
Priprava nasičene raztopine NaCl
1. vodo zavremo, primešamo sol dokler se ne topi več (približno 360g za 1000ml vode) 2. ko kristali soli prekrijejo celotno površino nehamo segrevati in pustimo,da se ohladi 3. tekočino skupaj z vsedlino prelijemo v stekleno posodo Kontrola nasičenosti: stehtamo 1ml raztopine, če je nasičenost ustrezna tehta 1,20 - 1,25g
priprava ZnCl2
enako kot NaCl..? 1000ml vode → 436g ZnCl2 spec. teža: 1,30 toksično, potrebna previdnost
MgSO4: oociste Cryptosporidium sp. - obarvajo se rahko rožnato priprava sladkorne raztopine
enako kot NaCl..? 1000ml vode → 550g sladkorja spec teža: 1,30 da se raztopina ne pokvari moramo dodato formalin; močno viskozno
kvalitativna diagnostična koprološka metoda
UGOTAVLJAMO
jajčeca nematodov, valjastih črvov (razen metastrongilidov)
Strongyloides sp.
ima že formirano ličinko različnih velikosti pri različnih živalskih vrstah dolžina:35-65qm, širina; 25-45qm
Nematodirus sp
veliko z nekaj blastomerami dolžina: 130-200qm, širina: 67-120qm
Strongylida (govedo, drobnica)/ Strongylidae (konj)
tankostena blastomerizirana jajčeca dolžina:70-125qm, širina: 30-55qm
Prašičja glista, Ascaris suum
dolžina:50-70qm širina: 40-60qm
ptičja glista, Ascaridia galli
elipsoidne oblike, ob straneh rahlo izbočena, z gladko in večslojno ovojnico dolžina: 75-80qm, širina:45-50qm
pasja glista, Toxacara canis
okrogle oblike, temno rjave barve s svetlo rumenim robom in neravno ovojnico dolžina:90qm, širina: 75qm
konjska glista, Parascaris equorum
okroglo ovalne oblike, temno rjavo z debelo steno in neravno ovojnico dolžina:100qm, širina:90qm
Bičeglavec, Capillaria sp
podobno Trichuris sp. - razlika v velikosti in barvi lahko temnejša, asimetrična robova in striirana ovojnica, pola nista tako izrazita dolžina: 60-74qm, širina: 29-40qm
Anoplocephala sp.
polmesečaste oblike, lahko kroglasto, obdano s tremi ovojnicami (rumenjakova (vitelinska), albuminska in hitinska) prozorno, v notranjosti viden hruškast aparat s 6 trni 50-80qm
Syngamus tracheae
elipsoidne oblike s pokrovčkom (operculum) na obeh polih v notranjosti vidnih 8-16 blastomer dolžina:78-100qm, širina: 43-60qm
oociste kokcidijev (Eimeria sp, Isospora sp, Sacrocystis sp)
Eimeria sp.
oociste so lahko prozorne, obarvane velikost od 12qm do 80qm
Isospora sp.
večje od oocist eimerij dolžina: 12-40qm, širina:10-30qm sporulirana ima 2 krogca nesporulirana p enga
jajčeca razpadlih odrivkov trakulj v prebavilih (Taenia sp, Monezia sp)
Monezia sp.
v jajčecih viden aparat hruškaste oblike in embrio s šestimi trni (heksakant) M. benedeni: kvadratna M. expansa: trikotne dolžina:70qm, širina: 60qm
Taenia sp.
okrogla z debelejšo striirano ovojnico 6 trnov v notranjosti embria 35qm - 45qm
POSTOPEK
1. iztrebek damo v čašo, prelijemo z nasičeno raztopino, dobro premešamo 2. vsebino prelijemo v epruveto skozi mrežico (uporabimo lijak), nalijemo do roba, nastati mora konveksni meniskus 3. počakamo 5-10min da jajčeca priplavajo na gladino, naberejo se na sredini meniskusa 4. z ezo zajamemo jajčeca s kapljico tekočine in jih prenesemo na predmetnico (ponovimo 2-3x, kapljice se na lredmetnici ne smejo stikat!) jajčeca/oociste lebdijo/flotirajo/se dvignejo na površino
metoda McMaster
Kvantitativna koprološka metoda, modificirana flotacija
na terenu (ne moremo natančno stehtati iztrebka) uporabimo modificirano metodo po Schmidu
komora McMaster
2 posebni predmetnici, ki se prilegata in sestavljata 2 komorici, v vsaki komorici vrisan kvadrat 1 x 1 cm, polje kvadrata razdeljeno na 5 ali 6 enakoh pravokotnikov
Določamo
EPG
eggs per gram: število jajčec v 1g iztrebka jajčeca valjastih črvov (razen metastrongylidov) in trakulj
OPG
oocist per gram: št oocist v 1g iztrebka oociste kokcidijev
Postopek
1. v plastično fiolo natoči o nasičeno raztopino NaCl do 1. oznake (42ml) 2. sodamo 3g iztrebka, dokler se raven tekočine ne dvigne do druge oznake (45ml) 3. iztrebke dobro premešamo (pomagamo si s steklenimi kroglicami), 4. vsebino fiole precedimo skozi mrežico in lijak v drugo posodico, premešamo s kapalko, prenesemo v obe komorici McMaster 5. počakamo 5-10min da jajčeca flotirajo 6. preštejemo pod 100x povečavo, ločeno štejemo različne vrste 7. računanje: če preštejemo 1 komorico pomnožimo s 100, če preštejemo obe komorici pomnožimo s 50 če uporabimo npr. 2g iztrebka ne pa 3 pomnožimo z 200/100 (ne pa z 100/50)
metoda po Vajdi
iztrebki ki so formirani v manjše bobke (drobnica, divji prežv.)
izkorišzčamo termotropizem ličink (sposobnost premikanja iz hladnejšega v toplejše okolje)
Določamo ličinke L1 pljučnih črvov iz družin
Dictyocaulidae
Dyctiocaulus filaria
Drobnica v sprednjem delu viden protoplazemski gumbek, v notranjosti zrnata struktura 550-580qm
Protostrongylidae
Neostrongylus sp.
drobnica in divji prezv licinke prozorne in mocno gibljive konica repa je razdeljena na 3 dele in ima ostroge
Müllerius sp.
drobnica prozorna in mocno gibljiva ima valovit rep in ostrogo 271-320qm
Postopek
1. na predmetnico položimo bobek in nanj s kapalko nakapljamo nekaj kapljic tople vode, da se pod iztrebkom pojavi majhna lužica 2. počakamo 5-10min (pazimo da se pužica ne izsuši - lahko dodamo vodo) 3. iztrebekodstranimo s pinceto, kapljico pregledamo pod mikroskopom
metoda po Baermanu
Ugotavljamo
ličinke L1 pljučnih črvov
Dyctiocaulidae
Dyctiocaulus filaria - drobnica (gumbek na sprednjem delu, večje ličinke, zrnata zgradba v notranjosti)
Dyctiocaulus viviparus - govedo
Protostrongylidae
Protostrongylus (valovit rep)
Müllerius (valovit rep in ostroga)
Drobnica
ekvidi, psi, mačke: Dyctiocaulus arnfieldi, Crenosoma vulpis, Angiostrongylus vasorum, Aelurostrongylus obstrusus
invazijske ličinke L3 želodčno-črevesnih zajedavcev
Baermannovaparat
večji lijak v katerem je mrežica ali gaza, na lijaku je gumijasta cev, ki je na koncu stisnjena s stiščkom lijak postavimo na stojalo, pod njega pa petrijevko
izkoriščamo termotropizem ličink
Boljša občutljivost kot Vajda ampak traja dalj časa
Postopek
1. preverimo, da stišček dobro tesni 2. na palčko obesimo mrežico/gazo z iztrebki, tako da visi nad lijakom 3. prelijemo s toplo vodo, da je iztrebek popolnoma potopljen, lijak z vzorcem prekrijemo z aluminijasto folijo 4. pustimo vsaj 4-6 ur, bolje čez noč 5. stišček zrahljamo, da ličinke s tekočio odtečejo v petrijevko, mikroskopiramo
koprokulture
Ugotavljamo ličinke L3 želodčno-črevesnih zajedavcev
družine Trichostrongylidae
družine Strongylidae
družine Strongyloides
družine Ancylostomidae
Princip
ko želimo iz jajčec izvaliti invazijske ličinke v pogojih in vitro jejčeca → ličinke L1 → se prehranjujejo in dvakrat levijo → invazijske ličinke L3 pospešimo postopek razvoja z primeeno temp (26°C), vlago in zrakom
Načini izdelave
po O´Sullivanu
za formirane iztrebke drobnice in divjih prežv
Izvedba
potrebujemo 2 atekleni posodi, tako da gre manjša v večjo 1. v manjšo posodopostavimo vlažen filtrirni papir, nanj položimo sveže iztrebke do zgornjega roba posode (ne smejo biti natlačeni) 2. manjšo posodo vstavimo v večjo, v katero smo natočili vodo tako, da ne prehaja v manjšo posodo (če manjša ni stabilna ko obtežimo) 3. prekrijemo s plastično vrečko, ki jo perforiramo 4. inkubiramo v termostatu 6 dni na 26°C (ličinke migrirajo vertikalno proti robu manjše posodice) 5. posodi postavimo na svetlobo za 30min (ličinke migrirajo še horizontalno) 6. ličinke L3 preidejo v vodo, ki jo lahko centrifugiramo ali sedimentiramo
po Volkenbergu
predvsem za neformirane iztrebke (govedo), če so redki jim dodamo živalsko oglje ali sterilizirane iztrebke druge živalske vrste
Izvedba
1. na dno petrijevke položimo vlažen filtrirni papir in nanj iztrebke 2. prekrijemo in inkubiramo v termostatu 6 dni na 26°C 3. papir z iztrebki prenesemo v Baermannov aparat - nadaljujemo po Baermannu
po Haradi in Mori
za zajedavce iz družine Ancylostomidae v iztrebkih psov
Namen: ločiti med ličinko Ancylostoma caninum (lahko zoonoza - Larva migrans cutanea) in manj patogeno Uncinaria stenocephala
Izvedba
1. v večjo epruveto (20dl) damo vodo do višine qcm (3ml) 2. iztrebek nanesemo na moker filtrirni papir v sloju debeline 1-2 mm in vstavimo v epruveto 3. epruveto zapremo, inkubiramo v termostatu 8-10 dni na 28°C (vsak dan pregledamo ali je v epruveti voda - dodamo) 4. larve preidejo iz iztrebka v vodo in jih determiniramo
dodatne preiskave na protozoje
nativni preparat brisa iztrebkov, kljunske votline, golše (Trichomonas)
brisu dodamo kapljico vode - opazujemo znač. gibanje trichomonadid
dodamo kapljico jodove raztopine - Trichomonas sp. se obarvajo rumeno, bički postanejo vidni, oblika telesa se lahko spremeni iz podolgovate v okroglo
flotacijska metoda (Eimeria, Isospora)
modificirano barvanje po Ziehl-Neelsenu (Cryptosporidium)
1. na predmetnici naredimo razmaz iztrebka, ga posušimo na rak, prelijemo s 96% metanolom, fiksiramo 5 min 2. razmaz posušimo na papirju, potegnemo predmetnico s spodnje strani čez plamen, 25 min barvamo s karbol fuksinom 3. speremo pod tekočo vodo, prelijemo z 2% žveplovo kislino, pustimo delovati 1 min 4. speremo pod tekočo vodo in 10min barvamo s 1% metilenskim modrilom 5. aperemo podtekočo vodo in posušimo na zraku
koncentriranje protozojev z metodo SAF (Giardia)
SAF
SAF = sodium acetat, acetic acid, formalin 15g natrijevega acetata + 0ml 100% ocetne kisline + 40ml 40% formalina + 925ml vode
Izvedba
1. iztrebke (2-5g) damo v čašo, dodamo 10-15ml raztopine SAF 2. premešamo, precedimo skozi gazo v epruveto, 1 min centrifugiramo na 2000 obratih 3. supernatant odlijemo, sedimentu dodamo 7 ml fiziološke raztopine in 2 ml etra 4. mešamo 3mij, centrifugiramo pri 2000 obratih 5. supernatant odstranimo s pipeto, nekaj kapljic sedimenta renesemo na predmetnico 6. krovno stekelce, mikroskopiramo
Koža, kožni ostružki
nativni preparat z dodatkom KOH (garjavci)
material na predmetnico, dodamo kapljico 10% kalijevega hidroksoda (KOH) ali kalijevega luga pokrijemo s pokrovnico in stisnemo (material se zmehča in stanjša)
kuhanje v KOH
Šibkejše invazije ali kadar je v vzorcu veliko krast in odmrlega rkiva epruvete ne segrevamo neposredno nad ognjem, ampak v posodici z vodo kuhamo približno 10min ali po potrebi (odvisno od materiala)
TIAB bezgavke (lejšmanioza - iščemo amastigotne oblike pod 100x povečavo)
razmaz, obarvan po Giemsi
Cevasti organi/črevesna vsebina
po smrti živali lahko ugotavljamo prisotnost parazitov v vseh razvojnih stadijih: jajčeca/oociste, ličinke, odrasle
metoda po Whitlocku
cevaste organi, lahko tudi pljuča, jetra, druge organe
Izvedba
1. prebavila/organe razrežemo, večje opazne zajedavce takoj odstranimo s pinceto 2. položimo na sito z največjimi okenci v mreži (postavljeno nad siti z vedno manjšimi okenci) 3. spiramo z močnim curkom vode 4. na sitih ostanejo zajedavci/razvojne oblike - sita obrnemo in jih s curkom vode izperemo v pladnje/posode za determinacijo
Nativni pregled
pozorni smo na odrasle parazite & na patološke spremembe
Parenhimski organi
Metoda po Skrjabinu
Izvedba 1
1. organ razrežemo na manjše koščke, prelijemo s toplo vodo in s prsti drobimo tkivo (tako osamimo odrasle in juvenilne zajedavce, ikrice in ličinke nematodov na migraciji) 2. JETRA: prerežemo večje žolčevode in žolčnik, prelijemo jih s toplo vodo - Fasciola hepatica, - Dicrocoelium dendriticum, - pri kuncih kokcidij Eimeria stiedae PLJUČA: prerežemo sapnik in sapnici na bifurkaciji, prelijemo s toplo vodo - nematode iz družine Dictyocaulidae- kopitarji, prezv - Protostrongylidae- v vozličih pljuč parenhima in na spodnjih robovih pljuč kril - prežvekovalci - liste iz družine Metastrongylidae - prašiči
Izvedba 2
organ ostrgamo tam, kjer so spremembe vidne snprostim očesom 1. na kraju spremembe organ prerežemo s škarjami/nožem in ostrgamo rezno površino 2. ostružek položimo na predmetnico, dodamo kapljico tople vode,npokrijemo s pokrovnico
Izvedba 3
ODTIS ORGANA: kadar je parazitoza zelo močna, vidna s prostim očesom organ prerežemo, površino rezne ploskve odtisnemo na predmetnico, dodamo kapljico vode, pokrijemo s pokrovnico
Prečno progasta mišičnina
za ličinke lasnice Trichinella sp. domači in divji prašič, medved, konj, jazbec MIŠIČNI DEL DIAFRAGME:prašič, medved ŽVEKALNA MIŠICA: konj, medved JEZIK: divji p., konj, medved MIŠICE SPREDNJE OKONČINE: divji p., lisica
kompresijska metoda
1 vzorec mišičnine (1,5g mišičnega stebrička diafragme) → 3 plošče z 28 podvzorci = skupaj 84 podvzorcev 1. podvzorce režemo vzporedno z m. vlakni v velikosti ovsenega zrna 2. razvrstimo jih v razdelke na spodnji plošči in jih pokrijemo z zgornjo 3. obe plošči privijemo z vijaki - podvzorci se med plošama stisnejo in stanšajo (skozi njih se mora videt tekst) 4. pregledamo pod mikroskopom - ličinke trihinele so 2,5x zavite v limonasti kapsuli (razen Trichinella pseudospiralis - ne tvori kapsule)
digestivna metoda
občutljivost: 1-3 ličinke/g mišičnine uradna metoda v lab v Slo v čaši z vzorcem ustvarimo podobne pogoje kot so v želodcu pogoje → ličinkam omogočimo da se sprosijo iz kapsule Izvedba za 100g skupnega vzorca: 1. v stekleno čašo (3l) damo 2l vode in jo na magnetnem mešalniku segrejemo na 46°C 2. dodamo 10g pepsina in 16ml 25% solne kisline → dobimo digestivno tekočino 3. dodamo vzorec mišičnine (prej odstranimo vezivno tkivo in maščobo, na drobno narežemo v rezalniku - ga 3x vklopimo za 5s, delci ne smejo biti manjši od 1mm) 4. po 30 min vzorec z digest. tekočino prelijemo v lij ločnik in sito preperemo z vodo 5. pustimo sedimentirati 30min, potem odpremo vijak na liju ločniku in spustimo v merilni valj 40ml sedimenta 6. sedimentiramo še 10min in potem 30ml supernatanta odpipetiramo 7. preostali sediment (10ml) prelijemo v 3 petrijevke, merilni valj sprermo z 10ml vode (jo dodamo v petrijevke) 8. petrijevke pregledamo
Dlaka, perje
pregled pod lupo
nativno
kuhanje v KOH
Šibkejše invazije ali kadar je v vzorcu veliko krast in odmrlega rkiva epruvete ne segrevamo neposredno nad ognjem, ampak v posodici z vodo kuhamo približno 10min ali po potrebi (odvisno od materiala)
Nastilj
Sedimentacija
Flotacija
Kri
krvni razmar, obarvan po Giemsi
pregled krvi psa, mačke, goveda, konja: tanek razmaz periferne krvi posušimo na zraku, fiksiramo z metanolom, obarvamo po Giemsi
ugotavljanje mikrofilarij iz rodu Dirofilaria
Metoda debelejše kaplje krvi: nativno obazujemo premikanje
krvni razmaz, obarvan po Giemsi
Paraziti
Trematoda (sesači, metljaji)
Digenea
Echinostomatida
Fasciolidae
Fasciola
Fasciola hepatica (Veliki metljaj)
NASELJUJE: žolčevodi konjev, prežvekovalcev, ljudi RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj zaužije invazivno obliko (METACERKARIJE) skupaj s travo/rastlinami 2. juvenilni sesači perforirajo steno črevesja → trebušna votlina → jetra ali žolčevodi, kjer dozorijo v odrasle 3. rumena jajčeca se z žolčem izločajo v črevesje in z iztrebki v okolje 4. v 9-10 dneh v jajčecu dozori MIRACIDIJ 5. miracidij se aktivno zavrta v polža malega mlakarja (Galba ali Limnea truncatula) - vodno okolje! 6. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA → REDIJA → CERKARIJA 7. cerkarija zaposti polža, odvrže repek, se obda z ovojnico in se nalepi na rastline kot metacerkarija MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžin 2-3cm, širina 1,3sm - oblika akacijevega lista - v sprednjem delu sta ustni in trebušni prisesek - trnji na povrhnjici v sprednjem delu
Fascioloides
Fasciola magna
Paramphistomidae
Paramphistomum
Paramphistomum cervi (Vampov sesač)
NASELJUJE: vamp prežvekovalcev RAZVOJNI KROG: 1. končni g zaužije METACERKARIJE na travi/rastlinah 2. juvenilni sesač v duodenum, nato v vamp, kjer spolno dozorijo 3. prozorna jajčeca z iztrebki v okolje 4. MIRACIDIJ iz jajčeca → okolje → polž (rod Planorbis/Bullinus) 5. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA → REDIJA → CERKARIJA 6. cerkarija zapusti polža, odvrže repek, se obda z ovojnico in nalepi na rastline kot METACERKARIJA MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina 13mm, širina o,5mm - hruškaste oblike - povrhnjica groba brez trnov - 2 priseska v amfistomnem položaju - žrelo ni izoblikovano
Plagiorchida
Dicrocoelium dendriticum (Mali metljaj)
NASELJUJE: žolčevode prežvekovalcev, konjev, medvedov RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj zaužije mravljo (rod Formica/Proformica) z METACERKARIJAMI 2. juvenilni sesači iz črevesja → krvni obtok → jetra (žolčevodi) - tu spolno dozorijo 3. rjavo jajčece v katerem je že oblikovan MIRACIDIJ se izloči z iztrebki (žolč→črevesje→iztrebki) 4. prvi vmesni gostitelj polž (rod Helicera/Zebrina) zaužije jajčece z miracidijem 5. v polžu: MIRACIDIJ → SPOROCISTA (redij ni) → CERKARIJE 6. cerkarije se v polžu povežejo v skupke, jih izloči 7. mravlja zaužije cerkarije, v mravlji: CERKARIJA → METACERKARIJA MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina 7-12mm, širina 2mm - suličaste oblike - prozorne barve
Strigeidida
Schistosomatidae
Schistosoma mansoni
Diplostomatide
Alaria alata
Protozoa
Apicomplexa
Gregarinomorphea
Cryptosporidium parvum
Eucoccidiorida
Eimeriidae
Eimeria
Eimeria tenella
Eimeria maxima
Eimeria necatrix
Isospora
Isospora canis
Isospora suis
Sacrocystiidae
Sacrocystis cruzi
Toxoplasma gondii
Neospora caninum
Piroplasmorida
Theileriidae
Theileria equi
Theileria parva
Babesiidae
Babesia bovis
Babesia canis
Babesia equi
Mastigophora
Diplomonadida
Giardia duodenalis
Trypanosomatida
Trymanosoma
Trypanosoma equiperdum
Leishmania
Leishmania infantum
Leishmania donovani
Trichomonadida
Dientamoebidae
Histomonas meleagridis
Trichomonadidae
Trichomonas Foetus
Ciliophora
Trichostomatorida
Ichthyophtirius multifiliis
Balantidium coli
Arthropoda (členonožci)
Insecta
Diptera
Nematocera
Culicoides
Simulium
Brachycera
Oestrinae
Oestrus bovis
Hypodermatinae
Hypoderma bovis
Gasterophilinae
Gastrophilus interstinalis
Siphonaptera
Ceratophyllidae
Ceratophyllus gallinae
Pulicidae
Echidnophaga gallinacea
Spilopsyllus cuniculi
Ctenocephalides canis
Ctenocephalides felis
Phthiraptera
Anoplura
Haematopinidae
Haematopinus suis
Amblycera
Cyropidae
Gliricooa porcelli
Menoponidae
Ischnocera
Bovicolidae
Bovicola bovis
Philopteridae
Trichodectidae
Trichodectes canis
Felicola subrostratus
Arachnida
Ixodida
Ixodidae
Ixoides ricinus
Mesostigmata
Dermanyssus gallinae
Prostigmata
Demodicidae
Demodex canis
Cheyletidae
Astigmata
Sacroptidae
Sacroptes scabiei
var. canis
var. suis
Psoroptida
Psoroptes communis ovis
Cestoda (trakulje)
Cyclophyllidea
Hymenolepididae
Hymenolepis nana
Davaineidae
Davainea proglottina
NASELJUJE: tanko črevo ptic RAZVOJNI KROG: 1. ptica zaužije invadiranega polža (rod Limax/Agriolimax) s CISTICERKOIDI 2. v tankem črevesju trakulja spolno dozori 3. jajčeca v odrivki z iztrebki v okolje 4. jajčeca zaužijejo polži MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina: 0,5-3mm - majhna glavica (SCOLEX), 4 priseski s trni in ROSTELLUM s trni (80-94) - RECEPTACULUM ROSTELLI (vrečka v katero se lahko skrije rostellum) - 4-6 odrivkov (proglotid) - genitalni atrij PRAVILNO ALTERNIRA (se menja na levo in desno) - v proksimalnih proglotidah najprej viden razvoj moških spolnih organov, v distalnih se razvijejo še ženski in nastane spolno zreli odrivek - gravidni odrivek (zadnji) je zrel, v njem so samo jajčeca (posamezno jajčece povito z ovojnico), meri 1/3 telesa
Mesocestoididae
Mesocestoides lineatus
NASELJUJE: RAZVOJNI KROG: MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI:
Taeniidae
Taenia
Taenia hydatigena
Taenia solium
Taenia saginata
Echinococcus
Echinococcus granulosus
Echinococcus multilocularis
Anoplocephalidae
Anoplocephala
Anoplocephala magna
NASELJUJE: črevesje (redko želodec) ekvidov RAZVOJNI KROG: 1. konj zaužije travo s pršico (družina Oribatidae) s CISTICERKOIDOM 2. v črevesju trakulja spolno dozori 3. jajčeca v proglotidah z iztrebki 4. pršice pojejo jajčeca - v njih dozori cisticerkoid MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina: 60-80cm, širina spolno zrele proglotide: do 2cm - glavica: 4-6mm, 4 priseski - rostellum ni prisoten - kratek vrat - 1 spolni kompleks v proglotidi - okoli 500 testikulov
Anoplocephala perfoliata
NASELJUJE: ileocekalno področje ekvidov RAZVOJNI KROG: isto kot A. magna MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - dolžina:8-25cm - na glavi so 4 priseski s 4 PRIVESKI (izrastki pod priseski s katerimi se pritrjuje na sluznico) - rostellum ni prisoten
Monezia
NASELJUJE: tanko črevo prežvekovalcev RAZVOJNI KROG: 1. končni gostitelj popase pršico (družina Oribatidae) s cisticerkoidom 2. spolno zrela trakulja izloča odrivke z jajčeci v tanko črevo → z iztrebki v okolje 3. pršica poje jajčeca, v njej se razvije cisticerkoid SKUPNE MORFOLOŠKE ZNAČILNOSTI: - rostellum ni prisoten - široki odrivki z 2 spolnima kompleksoma - ovarij v obliki venčka obkroža vitelarij (rumenjačne žleze) - okoli 200 testikulov
Funkcija interproglotidnih žlez: pomagajo odstranjevati izločke iz proglotide do vodoravnega ekskretornega kanala, ki se vliva v navpičnega
Monezia benedeni
JAJČECA: kvadratasta, 80qm INTERPROGLOTIDNE ŽLEZE: zgoščene na sprednjem robu proglotide DOLŽINA: 6m ŠIRINA spolno zrelih proglotid: do 2,5cm
Monezia expansa
JAJČECA: trikotna, 65qm INTERPROGLOTIDNE ŽLEZE: raztegnjene po celotni dolžini proglotide DOLŽINA: do 10m ŠIRINA: do 1,5cm
Dilepididae
Diplydium caninum
Pseudophyllidea
Diphyllobothriidae
Diphyllobothrium latum
Nematoda (valjasti črvi)
Secernentea
Oxyurida
Oxyruis equi
Strongylida
Strongyloidea
Syngamidae
Syngamus tracheae
Ancilostomatidae
Bunostomum phlebotomum
Bunostomum trigonocephalus
Ancylostoma caninum
Strongylidae
Strongylus
Strongylus vulgaris
Strongylus edentatus
Strongylus equinus
Strongylinae
Chabertia ovina
Oesophagostomum columbianum
Oesophagostomum venulosum
Oesophagostumum radiatum
Oesophagostomum dentatum
Metastrongyloidea
Angyostrongylidae
Metastrongylidae
Metastrongylus pudendotectus
Metastrongylus apri
Crenosomatidae
Filaroididea
Protostrongylidae
Müllerius
Protostrongylus
Cystocaulus
Neostrongylus
Trichostrongyloidea
Dictyocaulidae
Dictyocaulus
Dictyocaulus viviparis
Dictyocaulus filaria
Dictyocaulus arnfieldi
Trichostrongylidae
Haemonchus
Haemonchus contortus
Ostertagia
Ostertagia ostertagi
Ostertagia circumcinta
Ostertagia trifurcata
Trichostrongylua
Ascaridia
Ascarididae
Ascaridia galli
Heterakis gallinarium
Spirurida
Filariodea
Onchocercidae
Dirofilaria immitis
Spirocercidae
Ascarops strongylina
Physocephalus sexalatus
Adebophora
Enoplida
Trichinella spiralis
Trichinella britovi
Trichinella pseudospiralis
Trichinella nativa
Vzorčenje
Dopis
Lastnik/pošiljatelj
Naslov lastnika/pošiljatelja
Vrsta vzorca
Vrsta živali
Starost živali
Plačnik
Anamneza
Morebitni klinični znaki (driska, bruhanje, hujšanje, kašljanje...), koliko časa trajajo klinični znaki, ali se pojavljajo v določenih presledkih V kakšnih razmerah žival živi Ali je bila nedavno na potovanju Ali je bila zdravljena, kdaj, s katerim zdravilom
Želena parazitološka preiskava
V ambulanti lahko ob pregledu veterinar oceni, katere preiskave bi želel
Iztrebki
Male živali
Vzorec vzamemo z žličko/lopatko/vrečko takoj po defekaciji Prenesemo ga v posodico /pustimo v vrečki
Velike živali
Vzorec vzamemo rektalno, z rokavico Prenesemo v posodo, vrečko, pustimo v rokavici Ne jemljemo iz tal - lahko kontaminiran s prostoživečimi nematodami
Skupinski vzorec
Od vsake živali enako količino vzorca, ga homogeniziramo v večji posodi in od tega prenesemo v manjšo posodo do cca 0.5kg vzorca
Ptice
v kletki ali ob krmišču pustimo list papirja, počakamo nekaj ur, iztrebke skupaj s papirjem v ustrezno vrecko ali posodo
Pošiljanje
svež vzorec pred pošiljanjem hranimo na 4°C
v lab pošljemo ustrezno označene in zapakirane
Količina
Mlade živali
koprološke preiskave
konj, govedo: 5-10g
ovca, koza, prašič: 3-5g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 2-3g
ptice, glodalci, mali plazilci:0,5-1g
Baermann
konj, govedo: ≥10g
ovca, koza, prašič: ≥10g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: ≥5g
ptice, glodalci, mali plazilci: /
Odrasle živali
koprološke preiskave
konj, govedo: 20-30g
ovca, koza, prašič: 10-20g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 3-5g
ptice, glodalci, mali plazilci: 1-2g
Baermann
konj, govedo: 20g
ovca, koza, prašič: 20g
pes, mačka, kunec, večji plazilci: 10g
ptice, glodalci, mali plazilci: /
Kri
polna (periferna) kri
Dlaka, volna, perje
sum na večje zunanje zajedavce (tekuti, uši): dlako odstrižemo čim bližje koži/spremembi
sum na Demodex sp.: ob robu spremembe populimonekaj dlak
posamezne zunenje zajedavce shranimo v plastičnih posodicah/fiksiramo v 70% alkoholu, pošljemo v lab
Nastilj
okoli 0,5g
odvzamemo na več krajih
Organi in mišičnina, vsebina želodca, črevesja
po smrti živali
posamezni deli prebavil ali deli organov s spremembo
mišičnina, maseter, diafragma, sprednja okončina
Manjše živali:pregled celega črevesja
fiksiramo v 10% formalinu ali 70% alkoholu (če pregleda ne opravimo v nekaj dneh)
Ostružek kože (sum na garjavce)
suhi ostružek kože: 1. z ostro žlico/ skalpelom pod kotom 45° močno podrgnemo na meji med spremenjenim in nespremenjenim delom kože 2. drgnemo dokler se koža ne zarosi in malo zakrvavi (poškodba kapilar → segli smo do dermisa - tam so Sarcoptes scabiei) 3. postopek na več kraih ponovimo
z vatiranko obrišemo notranjo stran ušesa
KUNEC: sum na Psoroptes cuniculli
PES, MAČKA: sum na Otodectes cynotis
Urin
jajčeca Capillaria, Dioctophyma
centrifugiramo, razmaz sedimenta
Punktat
sum na lejšmaniozo
vzorec bezgavk z TIAB (tankoigelna aspiracijska biopsija)
Preiskave
Urin
pregled sedimenta (jajčeca Capillaria in Dioctophyma)
urin najprej 5min centrifugiramo na 2000 obratov
Iztrebki
Makroskopski pregled iztrebka
Pregledamo
konsistenco (penasta, vodena, čvrsta, pastozna, kašasta..)
barvo
primesi (sluz, kri)
morebitne odrivke trakulj
odrasle zajedavce ali njihove razvojne oblike
ko opazimo kaj nenavadnega → prenesemo na predmetnico, dodamo kapljico vode/mlečne kisline, pokrijemo s pokrovnico, pregledamo pod mikroskopom
odrivek trakulj: ne dodamo mlečne kisline zaradi velike vsebnosti kalcijevih zrn v parenhimu (v kislini se topijo, mehurčki motijo)
Nativni pregled
če je v iztrebku veliko jajčec (strongilidi, askaridi...) ali oocist pri perutnini, kuncih, psih, mačkah
če je iztrebka malo
pregled brisov (rektalni, kljunske votline, golše...)
POSTOPEK: 2mg iztrebka na predmetnico, dodamo 1-2 kapljici vode, premešamo/dispergiramoiztrebek, pokrovnica, mikroskop
Sedimentacija
določamo prisotnost težkih jajčec - težja od specifične teže vode (1,0): imajo spec. težo okoli 1,3 jajčeca padejo na dnočaše kadar so razpršena v vodi
kvalitativna diagnostična koprološka metoda
Dokazujemo
jajčeca digenih sesačev (Fasciola hepatica, Dicrocoelium dendriticum, Paramphistomum cervi)
Fasciola hepatica Veliki metljaj
jajčece polilecitalnega tipa (vsebuje veliko lecitina, v katerega je potopljena oplojena j. celica) Izrazito rumene barve (zaradi rumenjakovih celic), kronične invazije-lahko bolj rjavkaste jajčece operkulatnega tipa (ima polarno naznačen pokrovček oz operculum) ko zapusti gostitelja v njem še ni izoblikovan miracidij če v sedimentu iščemo izključno velikega metljaja lahko dodamo nekaj kapljic metilenskega modrila (vse razen jejčec se obarva modro, jajčeca ostanejo rumena) dolžina: 130-150qm, širina: 63-90qm
Dicrocoelium dendriticum Mali metljaj
izrazito rjave barve (nedozorelo je rjavo rumeno ali prozorno) asimetrično, slabo opazen pokrovček ko zapusti gostitelja v njem že izoblikovan miracidij z 2 očesnima pegama (senzor za svetlobo) dolžina: 37-45qm, širina; 22-30qm
Paramphistomum sp. Vampov sesač
podobno jajčecu velikega metljaja ampak večje rumenjakove celice, ki so svetlo sive, vlečejo na zeleno, prosojne opazen pokrovček dolžina: 160qm, širina: 90qm
jajčeca ježerilcev (Macracanthorhyncus hirudinaceus)
temno rjavo, ovalno, iz več plasti dolžina: 110qm, širina: 65qm
jajčece Trihuris sp. (Bičeglavec)
rjavo, ovalno-limonaste oblike z dvema poloma dolžina:58-70qm, širina:26-30qm
jajčeca pljučnih črvov prašičev iz družine Metastrongylidae (M. apri, M. pudendotectus)
podolgovate oplike, debela nagubana ovojnica sive barve v njem že izoblikovana ličinka L1 dolžina: 51-63qm, širina: 33-42qm
jajčeca valjastih črvov
večje oociste kokcidijev (prežv, konji) primer: Buxtonella sp. (Migetalkar/ciliata)
Cista ima v notranjosti vidne vakuole za prehranjevanje + temnejše jedro premer: 71-91qm
jajčeca trakulj
POSTOPEK
1. iztrebek razpršimo v čašo napolnjeno z 250-300ml vode skozi mrežico 2. počakamo 30 min da se delci sedimentirajo na dno čaše 3. odlijemo 3/4 vsebine in dolijemo vodo do roba, ponovno počakamo 30 min 4. postopek ponovimo 4-5x, dokler ni supernatant skoraj bister 5. supernatant zavržemo, sediment prelijemo v petrijevko, da je višina 3-4mm 6. pregledamo pod mikroskopom 7. če ne vidimo jasno dna petrijevke počakamo minuto in nato odlijemo še nekaj supernatanta
Flotacijska metoda
ugotavljamo prisotnost lahkih jajčec/oocist - spec. teža manj kot 1,2
uporabljamo nasičene raztopine NaCl, ZnCl2, MgSO4; spec.teža 1,2-1,3
Priprava nasičene raztopine NaCl
1. vodo zavremo, primešamo sol dokler se ne topi več (približno 360g za 1000ml vode) 2. ko kristali soli prekrijejo celotno površino nehamo segrevati in pustimo,da se ohladi 3. tekočino skupaj z vsedlino prelijemo v stekleno posodo Kontrola nasičenosti: stehtamo 1ml raztopine, če je nasičenost ustrezna tehta 1,20 - 1,25g
priprava ZnCl2
enako kot NaCl..? 1000ml vode → 436g ZnCl2 spec. teža: 1,30 toksično, potrebna previdnost
MgSO4: oociste Cryptosporidium sp. - obarvajo se rahko rožnato priprava sladkorne raztopine
enako kot NaCl..? 1000ml vode → 550g sladkorja spec teža: 1,30 da se raztopina ne pokvari moramo dodato formalin; močno viskozno
kvalitativna diagnostična koprološka metoda
UGOTAVLJAMO
jajčeca nematodov, valjastih črvov (razen metastrongilidov)
Strongyloides sp.
ima že formirano ličinko različnih velikosti pri različnih živalskih vrstah dolžina:35-65qm, širina; 25-45qm
Nematodirus sp
veliko z nekaj blastomerami dolžina: 130-200qm, širina: 67-120qm
Strongylida (govedo, drobnica)/ Strongylidae (konj)
tankostena blastomerizirana jajčeca dolžina:70-125qm, širina: 30-55qm
Prašičja glista, Ascaris suum
dolžina:50-70qm širina: 40-60qm
ptičja glista, Ascaridia galli
elipsoidne oblike, ob straneh rahlo izbočena, z gladko in večslojno ovojnico dolžina: 75-80qm, širina:45-50qm
pasja glista, Toxacara canis
okrogle oblike, temno rjave barve s svetlo rumenim robom in neravno ovojnico dolžina:90qm, širina: 75qm
konjska glista, Parascaris equorum
okroglo ovalne oblike, temno rjavo z debelo steno in neravno ovojnico dolžina:100qm, širina:90qm
Bičeglavec, Capillaria sp
podobno Trichuris sp. - razlika v velikosti in barvi lahko temnejša, asimetrična robova in striirana ovojnica, pola nista tako izrazita dolžina: 60-74qm, širina: 29-40qm
Anoplocephala sp.
polmesečaste oblike, lahko kroglasto, obdano s tremi ovojnicami (rumenjakova (vitelinska), albuminska in hitinska) prozorno, v notranjosti viden hruškast aparat s 6 trni 50-80qm
Syngamus tracheae
elipsoidne oblike s pokrovčkom (operculum) na obeh polih v notranjosti vidnih 8-16 blastomer dolžina:78-100qm, širina: 43-60qm
oociste kokcidijev (Eimeria sp, Isospora sp, Sacrocystis sp)
Eimeria sp.
oociste so lahko prozorne, obarvane velikost od 12qm do 80qm
Isospora sp.
večje od oocist eimerij dolžina: 12-40qm, širina:10-30qm sporulirana ima 2 krogca nesporulirana p enga
jajčeca razpadlih odrivkov trakulj v prebavilih (Taenia sp, Monezia sp)
Monezia sp.
v jajčecih viden aparat hruškaste oblike in embrio s šestimi trni (heksakant) M. benedeni: kvadratna M. expansa: trikotne dolžina:70qm, širina: 60qm
Taenia sp.
okrogla z debelejšo striirano ovojnico 6 trnov v notranjosti embria 35qm - 45qm
POSTOPEK
1. iztrebek damo v čašo, prelijemo z nasičeno raztopino, dobro premešamo 2. vsebino prelijemo v epruveto skozi mrežico (uporabimo lijak), nalijemo do roba, nastati mora konveksni meniskus 3. počakamo 5-10min da jajčeca priplavajo na gladino, naberejo se na sredini meniskusa 4. z ezo zajamemo jajčeca s kapljico tekočine in jih prenesemo na predmetnico (ponovimo 2-3x, kapljice se na lredmetnici ne smejo stikat!) jajčeca/oociste lebdijo/flotirajo/se dvignejo na površino
metoda McMaster
Kvantitativna koprološka metoda, modificirana flotacija
na terenu (ne moremo natančno stehtati iztrebka) uporabimo modificirano metodo po Schmidu
komora McMaster
2 posebni predmetnici, ki se prilegata in sestavljata 2 komorici, v vsaki komorici vrisan kvadrat 1 x 1 cm, polje kvadrata razdeljeno na 5 ali 6 enakoh pravokotnikov
Določamo
EPG
eggs per gram: število jajčec v 1g iztrebka jajčeca valjastih črvov (razen metastrongylidov) in trakulj
OPG
oocist per gram: št oocist v 1g iztrebka oociste kokcidijev
Postopek
1. v plastično fiolo natoči o nasičeno raztopino NaCl do 1. oznake (42ml) 2. sodamo 3g iztrebka, dokler se raven tekočine ne dvigne do druge oznake (45ml) 3. iztrebke dobro premešamo (pomagamo si s steklenimi kroglicami), 4. vsebino fiole precedimo skozi mrežico in lijak v drugo posodico, premešamo s kapalko, prenesemo v obe komorici McMaster 5. počakamo 5-10min da jajčeca flotirajo 6. preštejemo pod 100x povečavo, ločeno štejemo različne vrste 7. računanje: če preštejemo 1 komorico pomnožimo s 100, če preštejemo obe komorici pomnožimo s 50 če uporabimo npr. 2g iztrebka ne pa 3 pomnožimo z 200/100 (ne pa z 100/50)
metoda po Vajdi
iztrebki ki so formirani v manjše bobke (drobnica, divji prežv.)
izkorišzčamo termotropizem ličink (sposobnost premikanja iz hladnejšega v toplejše okolje)
Določamo ličinke L1 pljučnih črvov iz družin
Dictyocaulidae
Dyctiocaulus filaria
Drobnica v sprednjem delu viden protoplazemski gumbek, v notranjosti zrnata struktura 550-580qm
Protostrongylidae
Neostrongylus sp.
drobnica in divji prezv licinke prozorne in mocno gibljive konica repa je razdeljena na 3 dele in ima ostroge
Müllerius sp.
drobnica prozorna in mocno gibljiva ima valovit rep in ostrogo 271-320qm
Postopek
1. na predmetnico položimo bobek in nanj s kapalko nakapljamo nekaj kapljic tople vode, da se pod iztrebkom pojavi majhna lužica 2. počakamo 5-10min (pazimo da se pužica ne izsuši - lahko dodamo vodo) 3. iztrebekodstranimo s pinceto, kapljico pregledamo pod mikroskopom
metoda po Baermanu
Ugotavljamo
ličinke L1 pljučnih črvov
Dyctiocaulidae
Dyctiocaulus filaria - drobnica (gumbek na sprednjem delu, večje ličinke, zrnata zgradba v notranjosti)
Dyctiocaulus viviparus - govedo
Protostrongylidae
Protostrongylus (valovit rep)
Müllerius (valovit rep in ostroga)
Drobnica
ekvidi, psi, mačke: Dyctiocaulus arnfieldi, Crenosoma vulpis, Angiostrongylus vasorum, Aelurostrongylus obstrusus
invazijske ličinke L3 želodčno-črevesnih zajedavcev
Baermannovaparat
večji lijak v katerem je mrežica ali gaza, na lijaku je gumijasta cev, ki je na koncu stisnjena s stiščkom lijak postavimo na stojalo, pod njega pa petrijevko
izkoriščamo termotropizem ličink
Boljša občutljivost kot Vajda ampak traja dalj časa
Postopek
1. preverimo, da stišček dobro tesni 2. na palčko obesimo mrežico/gazo z iztrebki, tako da visi nad lijakom 3. prelijemo s toplo vodo, da je iztrebek popolnoma potopljen, lijak z vzorcem prekrijemo z aluminijasto folijo 4. pustimo vsaj 4-6 ur, bolje čez noč 5. stišček zrahljamo, da ličinke s tekočio odtečejo v petrijevko, mikroskopiramo
koprokulture
Ugotavljamo ličinke L3 želodčno-črevesnih zajedavcev
družine Trichostrongylidae
družine Strongylidae
družine Strongyloides
družine Ancylostomidae
Princip
ko želimo iz jajčec izvaliti invazijske ličinke v pogojih in vitro jejčeca → ličinke L1 → se prehranjujejo in dvakrat levijo → invazijske ličinke L3 pospešimo postopek razvoja z primeeno temp (26°C), vlago in zrakom
Načini izdelave
po O´Sullivanu
za formirane iztrebke drobnice in divjih prežv
Izvedba
potrebujemo 2 atekleni posodi, tako da gre manjša v večjo 1. v manjšo posodopostavimo vlažen filtrirni papir, nanj položimo sveže iztrebke do zgornjega roba posode (ne smejo biti natlačeni) 2. manjšo posodo vstavimo v večjo, v katero smo natočili vodo tako, da ne prehaja v manjšo posodo (če manjša ni stabilna ko obtežimo) 3. prekrijemo s plastično vrečko, ki jo perforiramo 4. inkubiramo v termostatu 6 dni na 26°C (ličinke migrirajo vertikalno proti robu manjše posodice) 5. posodi postavimo na svetlobo za 30min (ličinke migrirajo še horizontalno) 6. ličinke L3 preidejo v vodo, ki jo lahko centrifugiramo ali sedimentiramo
po Volkenbergu
predvsem za neformirane iztrebke (govedo), če so redki jim dodamo živalsko oglje ali sterilizirane iztrebke druge živalske vrste
Izvedba
1. na dno petrijevke položimo vlažen filtrirni papir in nanj iztrebke 2. prekrijemo in inkubiramo v termostatu 6 dni na 26°C 3. papir z iztrebki prenesemo v Baermannov aparat - nadaljujemo po Baermannu
po Haradi in Mori
za zajedavce iz družine Ancylostomidae v iztrebkih psov
Namen: ločiti med ličinko Ancylostoma caninum (lahko zoonoza - Larva migrans cutanea) in manj patogeno Uncinaria stenocephala
Izvedba
1. v večjo epruveto (20dl) damo vodo do višine qcm (3ml) 2. iztrebek nanesemo na moker filtrirni papir v sloju debeline 1-2 mm in vstavimo v epruveto 3. epruveto zapremo, inkubiramo v termostatu 8-10 dni na 28°C (vsak dan pregledamo ali je v epruveti voda - dodamo) 4. larve preidejo iz iztrebka v vodo in jih determiniramo
dodatne preiskave na protozoje
nativni preparat brisa iztrebkov, kljunske votline, golše (Trichomonas)
brisu dodamo kapljico vode - opazujemo znač. gibanje trichomonadid
dodamo kapljico jodove raztopine - Trichomonas sp. se obarvajo rumeno, bički postanejo vidni, oblika telesa se lahko spremeni iz podolgovate v okroglo
flotacijska metoda (Eimeria, Isospora)
modificirano barvanje po Ziehl-Neelsenu (Cryptosporidium)
1. na predmetnici naredimo razmaz iztrebka, ga posušimo na rak, prelijemo s 96% metanolom, fiksiramo 5 min 2. razmaz posušimo na papirju, potegnemo predmetnico s spodnje strani čez plamen, 25 min barvamo s karbol fuksinom 3. speremo pod tekočo vodo, prelijemo z 2% žveplovo kislino, pustimo delovati 1 min 4. speremo pod tekočo vodo in 10min barvamo s 1% metilenskim modrilom 5. aperemo podtekočo vodo in posušimo na zraku
koncentriranje protozojev z metodo SAF (Giardia)
SAF
SAF = sodium acetat, acetic acid, formalin 15g natrijevega acetata + 0ml 100% ocetne kisline + 40ml 40% formalina + 925ml vode
Izvedba
1. iztrebke (2-5g) damo v čašo, dodamo 10-15ml raztopine SAF 2. premešamo, precedimo skozi gazo v epruveto, 1 min centrifugiramo na 2000 obratih 3. supernatant odlijemo, sedimentu dodamo 7 ml fiziološke raztopine in 2 ml etra 4. mešamo 3mij, centrifugiramo pri 2000 obratih 5. supernatant odstranimo s pipeto, nekaj kapljic sedimenta renesemo na predmetnico 6. krovno stekelce, mikroskopiramo
Koža, kožni ostružki
nativni preparat z dodatkom KOH (garjavci)
material na predmetnico, dodamo kapljico 10% kalijevega hidroksoda (KOH) ali kalijevega luga pokrijemo s pokrovnico in stisnemo (material se zmehča in stanjša)
kuhanje v KOH
Šibkejše invazije ali kadar je v vzorcu veliko krast in odmrlega rkiva epruvete ne segrevamo neposredno nad ognjem, ampak v posodici z vodo kuhamo približno 10min ali po potrebi (odvisno od materiala)
TIAB bezgavke (lejšmanioza - iščemo amastigotne oblike pod 100x povečavo)
razmaz, obarvan po Giemsi
Cevasti organi/črevesna vsebina
po smrti živali lahko ugotavljamo prisotnost parazitov v vseh razvojnih stadijih: jajčeca/oociste, ličinke, odrasle
metoda po Whitlocku
cevaste organi, lahko tudi pljuča, jetra, druge organe
Izvedba
1. prebavila/organe razrežemo, večje opazne zajedavce takoj odstranimo s pinceto 2. položimo na sito z največjimi okenci v mreži (postavljeno nad siti z vedno manjšimi okenci) 3. spiramo z močnim curkom vode 4. na sitih ostanejo zajedavci/razvojne oblike - sita obrnemo in jih s curkom vode izperemo v pladnje/posode za determinacijo
Nativni pregled
pozorni smo na odrasle parazite & na patološke spremembe
Parenhimski organi
Metoda po Skrjabinu
Izvedba 1
1. organ razrežemo na manjše koščke, prelijemo s toplo vodo in s prsti drobimo tkivo (tako osamimo odrasle in juvenilne zajedavce, ikrice in ličinke nematodov na migraciji) 2. JETRA: prerežemo večje žolčevode in žolčnik, prelijemo jih s toplo vodo - Fasciola hepatica, - Dicrocoelium dendriticum, - pri kuncih kokcidij Eimeria stiedae PLJUČA: prerežemo sapnik in sapnici na bifurkaciji, prelijemo s toplo vodo - nematode iz družine Dictyocaulidae- kopitarji, prezv - Protostrongylidae- v vozličih pljuč parenhima in na spodnjih robovih pljuč kril - prežvekovalci - liste iz družine Metastrongylidae - prašiči
Izvedba 2
organ ostrgamo tam, kjer so spremembe vidne snprostim očesom 1. na kraju spremembe organ prerežemo s škarjami/nožem in ostrgamo rezno površino 2. ostružek položimo na predmetnico, dodamo kapljico tople vode,npokrijemo s pokrovnico
Izvedba 3
ODTIS ORGANA: kadar je parazitoza zelo močna, vidna s prostim očesom organ prerežemo, površino rezne ploskve odtisnemo na predmetnico, dodamo kapljico vode, pokrijemo s pokrovnico
Prečno progasta mišičnina
za ličinke lasnice Trichinella sp. domači in divji prašič, medved, konj, jazbec MIŠIČNI DEL DIAFRAGME:prašič, medved ŽVEKALNA MIŠICA: konj, medved JEZIK: divji p., konj, medved MIŠICE SPREDNJE OKONČINE: divji p., lisica
kompresijska metoda
1 vzorec mišičnine (1,5g mišičnega stebrička diafragme) → 3 plošče z 28 podvzorci = skupaj 84 podvzorcev 1. podvzorce režemo vzporedno z m. vlakni v velikosti ovsenega zrna 2. razvrstimo jih v razdelke na spodnji plošči in jih pokrijemo z zgornjo 3. obe plošči privijemo z vijaki - podvzorci se med plošama stisnejo in stanšajo (skozi njih se mora videt tekst) 4. pregledamo pod mikroskopom - ličinke trihinele so 2,5x zavite v limonasti kapsuli (razen Trichinella pseudospiralis - ne tvori kapsule)
digestivna metoda
občutljivost: 1-3 ličinke/g mišičnine uradna metoda v lab v Slo v čaši z vzorcem ustvarimo podobne pogoje kot so v želodcu pogoje → ličinkam omogočimo da se sprosijo iz kapsule Izvedba za 100g skupnega vzorca: 1. v stekleno čašo (3l) damo 2l vode in jo na magnetnem mešalniku segrejemo na 46°C 2. dodamo 10g pepsina in 16ml 25% solne kisline → dobimo digestivno tekočino 3. dodamo vzorec mišičnine (prej odstranimo vezivno tkivo in maščobo, na drobno narežemo v rezalniku - ga 3x vklopimo za 5s, delci ne smejo biti manjši od 1mm) 4. po 30 min vzorec z digest. tekočino prelijemo v lij ločnik in sito preperemo z vodo 5. pustimo sedimentirati 30min, potem odpremo vijak na liju ločniku in spustimo v merilni valj 40ml sedimenta 6. sedimentiramo še 10min in potem 30ml supernatanta odpipetiramo 7. preostali sediment (10ml) prelijemo v 3 petrijevke, merilni valj sprermo z 10ml vode (jo dodamo v petrijevke) 8. petrijevke pregledamo
Dlaka, perje
pregled pod lupo
nativno
kuhanje v KOH
Šibkejše invazije ali kadar je v vzorcu veliko krast in odmrlega rkiva epruvete ne segrevamo neposredno nad ognjem, ampak v posodici z vodo kuhamo približno 10min ali po potrebi (odvisno od materiala)
Nastilj
Sedimentacija
Flotacija
Kri
krvni razmar, obarvan po Giemsi
pregled krvi psa, mačke, goveda, konja: tanek razmaz periferne krvi posušimo na zraku, fiksiramo z metanolom, obarvamo po Giemsi
ugotavljanje mikrofilarij iz rodu Dirofilaria
Metoda debelejše kaplje krvi: nativno obazujemo premikanje
krvni razmaz, obarvan po Giemsi